一、卵巢浆液性肿瘤MMP-9和TIMP-1的表达意义（论文文献综述）
朱慧芳[1]（2009）在《MMP-9和CD44V6基因蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义》文中研究表明目的探讨MMP-9和CD44V6的表达与卵巢浆液性肿瘤侵袭和转移的关系。方法应用流式细胞免疫法定量检测MMP-9和CD44V6在45例卵巢浆液性肿瘤中的表达。结果MMP-9在卵巢浆液性癌中的表达明显高于卵巢浆液性瘤（P<0.05）,且与卵巢浆液性癌组织分级和临床分期密切相关（P<0.05）。CD44V6在卵巢浆液性癌中的表达明显高于卵巢浆液性瘤（P<0.05）,且与卵巢浆液性癌组织分级和临床分期密切相关（P<0.05）。MMP-9和CD44V6在卵巢浆液性癌中的表达密切相关（P<0.05）。结论卵巢浆液性癌中MMP-9和CD44V6的高表达促进了癌的侵袭和转移,MMP-9和CD44V6在卵巢浆液性癌中的表达有相关性。提示MMP-9和CD44V6的共同检测可作为诊断和判断预后的参考指标。
杨杰斌,彭真年,吴伟强[2]（2008）在《WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在卵巢浆液性乳头状癌中的表达及意义》文中进行了进一步梳理目的:探讨WT-1、P53、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在卵巢浆液性乳头状癌中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法检测WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在52例卵巢浆液性乳头状癌中的表达,并与15例腹膜浆液性乳头状癌和11例子宫内膜浆液性乳头状癌进行比较。结果:WT-1蛋白在卵巢浆液性乳头状癌、腹膜浆液性乳头状癌和子宫内膜浆液性乳头状癌中的阳性表达率分别为96.2%、93.3%和36.4%;P53蛋白分别为78.8%、80%和72.7%;MMP-9和TIMP-2分别为90.4%、93.3%、100%和92.3%、93.3%、100%。图像分析卵巢浆液性乳头状癌低分化组表达WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2的面积积分光密度值（AIOD/μm2）均明显高于高分化组（P<0.01）。卵巢浆液性乳头状癌和腹膜浆液性乳头状癌表达WT-1的AIOD/μm2明显高于子宫内膜浆液性乳头状癌（P<0.01）。结论:WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在低分化卵巢浆液性乳头状癌中的表达高于高分化组。WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2的过表达与卵巢浆液性乳头状癌的分化程度有关。WT-1蛋白检测可作为鉴别卵巢浆液性乳头状癌与子宫内膜浆液性乳头状癌的标记物。
邵强,李芬芬,徐存拴[3]（2008）在《MMPs及TIMPs与妇科疾病的相关性》文中进行了进一步梳理
周杰[4]（2008）在《金属基质蛋白酶及其组织抑制物与卵巢癌浸润转移关系的相关研究》文中研究指明卵巢癌是最常见的女性恶性肿瘤之一,它的5年存活率低。侵袭和转移是卵巢癌重要的生物学特征,是引起卵巢癌患者死亡的主要原因。基质金属蛋白酶-9（matrixmetalloproteinase-9,MMP-9）通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭和转移中起了关键性的作用。基质金属蛋白酶组织抑制物-1（Tissue inhibitors of metalloproteinase-1,TIMP-1）是MMP-9的天然抑制物,它可与MMP-9形成复合物从而限制MMP-9的功能。因此,本课题探讨MMP-9及TIMP-1在卵巢恶性肿瘤发生、发展、转移及其预后中的价值。卵巢肿瘤患者血清金属基质蛋白酶-9测定及临床价值目的:探讨血清基质金属蛋白酶-9（MMP-9）测定对卵巢恶性肿瘤诊断、病情监测和转移预后的价值。方法:采用酶联免疫吸附法（ELISA）对15例健康妇女（对照组）、15例卵巢良性肿瘤（良性组）及55例卵巢恶性肿瘤（恶性组）进行血清MMP-9含量分析。结果:恶性组治疗前血清MMP-9含量472.95±169.48ng/ml显着高于良性组的230.99±91.81ng/ml及对照组的72.99±2.57ng/ml（P＜0.05）。恶性术后组血清MMP-9含量424.11±175.66ng/ml和复发组血清MMP-9含量478.13±183.90ng/ml也明显高于良性组和对照组,差异有显着性（P＜0.05）。恶性配对组中治疗前血清含量513.82±133.18ng/ml高于术后组437.15±144.41ng/ml（P＜0.05）。结论:血清MMP-9含量在卵巢恶性肿瘤中异常升高,可作为卵巢恶性肿瘤有价值的诊断、评价手术效果以及判断复发的指标。卵巢恶性肿瘤组织中MMP-9抑制物TIMP-1基因突变与其临床病理的关系研究目的:探讨TIMP-1基因突变与卵巢恶性肿瘤临床病理的关系及在卵巢恶性肿瘤发生、发展过程中的作用。方法:应用单链构象多态性分析（SSCP）检测39例卵巢恶性肿瘤患者,10例卵巢良性肿瘤患者,18例正常卵巢组织中TIMP-1基因突变情况。结果:TIMP-1基因第一、第二和第三编码外显子及其周边区域序列未检测到突变。TIMP-1基因第四编码外显子及其周边区域序列在我们检测的67例卵巢组织中,除了检测到的1例错义突变及1例内含子突变外,检测到具有NCBI中SNPsID为rs4898的SNP位点（TIMP-1基因第3296位）的共48例,其中突变纯合子为17例,突变杂合子为31例,在此SNP位点上,等位基因为T的占50%,为C占50%。Ⅰ～Ⅱ期患者该SNP位点突变为C的比例明显大于Ⅲ～Ⅳ期患者,差别有统计学意义（P＜0.05）。TIMP-1基因第五编码外显子除了检测到的2例错义突变及一例位于非编码外显子的外显子区域突变外,检测到具有NCBI中SNPsID为rs11551797的SNP位点（TIMP-1基因第4251位）的共29例,其中突变纯合子为6例,突变杂合子为23例。在此SNP位点上,等位基因为C的占72.7%,为T占27.3%。结论:恶性卵巢肿瘤组织能检测到错义突变,正常卵巢组织及良性卵巢肿瘤组织未能检测出错义突变,错义突变可能影响TIMP-1在恶性卵巢肿瘤组织中的功能;位于第四编码外显子的一SNP位点（TIMP-1基因第3296位）可能是卵巢恶性肿瘤发生、发展的早期事件。卵巢恶性肿瘤组织中MMP-9抑制物TIMP-1基因启动子区域CpG岛甲基化与其临床病理关系的初步研究目的:探讨TIMP-1基因启动子甲基化与卵巢恶性肿瘤发生发展的关系。方法:应用甲基化特异性聚合酶链式反应（Methylation-specific PCR,MS-PCR）检测39例卵巢恶性肿瘤患者,10例卵巢良性肿瘤患者,18例正常卵巢组织中TIMP-1基因启动子区域CpG岛甲基化情况。结果:正常卵巢组织中TIMP-1启动子区域CpG岛甲基化程度为83.33%（10/12）,良性卵巢肿瘤组织为100%（5/5）,恶性卵巢肿瘤组织为100%（10/10）,TIMP-1启动子区域CpG岛总甲基化率高达92.6%。结论:MSP法不能区分正常女性Xi染色体上TIMP-1启动子区域CpG岛甲基化及能导致肿瘤细胞TIMP-1基因表达下降的另一条X染色体（Xa染色体）启动子区域CpG岛甲基化。
杨杰斌[5]（2008）在《WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在卵巢浆液性乳头状癌中的表达及意义》文中进行了进一步梳理目的:研究WT-1、P53、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（TIMP-2）在卵巢浆液性乳头状癌中的表达。探讨这些免疫标记物在卵巢浆液性乳头状癌的表达与分化程度和转移的关系,并比较其在卵巢浆液性乳头状癌、腹膜浆液性乳头状癌和子宫浆液性乳头状癌中表达的差异及其意义。方法:采用免疫组化SP法染色显示WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在52例卵巢浆液性乳头状癌（高分化18例,中分化8例,低分化26例）,15例腹膜浆液性乳头状癌和11例子宫浆液性乳头状癌中的表达。并用计数阳性率与图像分析技术检测并分析了各组肿瘤表达WT-1、P53、MMP-9以及TIMP-2的差异。结果:1.WT-1蛋白在52例卵巢浆液性乳头状癌中有50例表达WT-1,阳性率为96.2%,其中46例为强阳性。15例腹膜浆液性乳头状癌中,14例阳性表达,阳性率为93.3%,其中11例为强阳性。11例子宫浆液性乳头状癌中仅4例阳性有弱阳性表达,阳性率为36.4%。卵巢浆液性乳头状癌和腹膜浆液性乳头状癌阳性表达率分别与子宫浆液性乳头状癌阳性表达率比较,差异显着有统计学意义（P<0.05）。图像分析显示卵巢浆液性乳头状癌和腹膜浆液性乳头状癌表达WT-1的面积积分光密度（Area integrated optical density,AIOD）明显高于子宫浆液性乳头状癌（P<0.01）。2. P53蛋白在52例卵巢浆液性乳头状癌中有41例为阳性表达,阳性率为78.8%,其中强阳性25例,中度阳性5例,弱阳性11例。15例腹膜浆液性乳头状癌中,有12例阳性表达,阳性率为80.0%,其中强阳性6例,弱阳性6例。11例子宫浆液性乳头状癌,有8例阳性表达,阳性率为72.7%,其中强阳性4例,中度阳性1例,弱阳性3例。各组阳性率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。3. MMP-9在52例卵巢浆液性乳头状癌中的阳性表达有47例,阳性率为90.4%,强阳性30例,中等阳性6例,弱阳性11例。在15例腹膜浆液性乳头状癌中的阳性表达为14例,阳性率为93.3%,强阳性8例,中等阳性3例,弱阳性3例。在11例子宫浆液性乳头状癌中均为阳性,阳性率为100%,强阳性7例,弱阳性4例。各组阳性率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。4.TIMP-2在52例卵巢浆液性乳头状癌中的阳性表达有50例,阳性率为96.2%,其中强阳性38例,中等阳性4例,弱阳性8例。在15例腹膜浆液性乳头状癌中的阳性表达14例,阳性率为93.3%,其中强阳性11例,中等阳性1例,弱阳性2例。在11例子宫浆液性乳头状癌均为阳性表达,阳性率为100%,其中强阳性9例,中等阳性2例。各组阳性率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。5.图像分析显示卵巢浆液性乳头状癌低分化组表达WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2的AIOD值均明显高于高分化组（P<0.01）。结论:1.卵巢浆液性乳头状癌和腹膜浆液性乳头状癌表达WT-1的AIOD值明显高于子宫浆液性乳头状癌（P<0.01）。表明WT-1蛋白检测可作为鉴别卵巢浆液性乳头状癌与子宫浆液性乳头状癌的一种标记物。2. P53,MMP-9和TIMP-2过表达于大多数卵巢浆液性乳头状癌、腹膜浆液性乳头状癌和子宫浆液性乳头状癌,其阳性率以及AIOD值的差异均无统计学意义。P53,MMP-9和TIMP-2在卵巢浆液性乳头状癌过表达提示与卵巢浆液性癌的发生、发展有关3.图像分析结果显示卵巢浆液性乳头状癌低分化组表达WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2的AIOD值均明显高于高分化组（P<0.01）。这提示WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2的过表达与卵巢浆液性乳头状癌的分化程度有关。
李秀兰[6]（2008）在《MMP-2和TIMP-2基因启动子区多态性与卵巢上皮性癌关系的研究》文中提出目的:卵巢癌是妇科常见的恶性肿瘤,由于发病隐匿,进展迅速,缺乏有效的早期诊断方法,70%～80%的患者发现时已为晚期,5年生存率仍徘徊在25%～30%。目前卵巢癌的病因尚不清楚,但研究发现,约10%的卵巢恶性肿瘤患者具有遗传异常,因此,寻找易感基因,确立高危人群,实现早期诊断是提高卵巢癌生存率的有效途径。基质金属蛋白酶因其在肿瘤发生发展中的重要作用,已被作为一组重要的遗传候选基因,近年来成为研究的热点。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是降解细胞外基质成分的一类重要的Zn2+依赖性蛋白水解酶,组织金属蛋白酶抑制剂（tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs）是其天然抑制物,二者的表达失衡在肿瘤发生和侵袭转移过程中起着十分重要的作用。其中明胶酶MMP-2和其特异性抑制因子TIMP-2与肿瘤的关系倍受关注。随着分子生物学的发展,发现在MMP-2和TIMP-2基因启动子区有一些多态性位点,可以影响基因的转录水平和蛋白质表达,进而与某些肿瘤的发病相关。本研究旨在探讨MMP-2和TIMP-2基因启动子区单核苷酸多态性（SNPs）与卵巢上皮性癌发病风险的关系,从分子水平为卵巢癌的预防和诊治提供依据。方法:采用基于医院的病例-对照研究方法,以246例卵巢癌患者和324例健康对照妇女为研究对象,采集外周静脉血5 ml,以蛋白酶K消化-饱和氯化钠盐析法提取基因组DNA,聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism ,PCR-RFLP）方法对MMP-2基因启动子区C-1306T、C-735T和TIMP-2基因启动子区G-418C 3个SNPs位点进行基因分型。数据统计分析采用SPSS11.5版软件包（SPSS Company, Chicago,Illinois,USA）进行处理。正常对照组基因型频率分布行χ2检验做Hardy-Weinberg平衡分析。病例组与对照组的年龄、初潮年龄差异采用t检验,孕次、产次差异比较采用χ2检验。基因型和等位基因频率分布比较采用χ2检验,以非条件logistic回归方法计算表示相对风险度的比值比（odds ratio,OR）及其95%可信区间（confidence interval,CI）。采用EH软件分析MMP-2 C-1306T和C-735T基因单体型频率,2ld软件分析连锁不平衡状态。采用似然比检验（likelihood ratio test）分析MMP-2和TIMP-2基因之间的交互作用。P<0.05作为差异有显着性的标准。结果1对照组MMP-2 C-1306T、C-735T SNPs位点和TIMP-2 G-418C SNP位点的基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P=0.87,P=0.75和P=0.81）。2 MMP-2 C-1306T多态的基因型和等位基因频率在卵巢癌组和对照组中分布无显着性差异（P=0.42和P=0.55）。与T/T+C/T基因型比较,C/C基因型可能与卵巢癌的发病风险无关,OR值为1.07（95%CI=0.72～1.58）。以病理类型、临床分期或确诊时年龄分层分析,MMP-2 C-1306T多态的基因型频率在各组间分布也均未发现显着性差异（P值均大于0.05）。3 MMP-2 C-735T多态3种基因型频率（C/C、C/T、T/T）在卵巢癌组和对照组中分别是66.7%、28.0%、5.3%和55.9%、39.2%、4.9%,两组比较有显着性差异（P=0.02）;卵巢癌组的C等位基因频率（80.7%）明显高于对照组（75.5%）,两组比较有统计学意义（P=0.04）。与T/T+C/T基因型比较,携带C/C基因型可显着增加卵巢癌的发病风险,OR值为1.58（95%CI=1.12～2.23）。以病理类型分层分析发现,C/C基因型与宫内膜样癌的发病风险明显相关（ OR=1.69 ,95%CI=1.03～2.79）,且有增加浆液性癌发病风险的趋势（OR=1.58,95%CI=0.97～2.56）;以临床分期分层分析显示,C/C基因型与早期卵巢癌的发病风险明显相关（OR=1.88,95%CI=1.11～3.17）,有增加晚期卵巢癌发病风险的趋势（OR=1.46,95%CI=0.99～2.15）;以年龄分层分析显示,携带C/C基因型明显增加年龄≥50岁妇女患卵巢癌的风险,OR值为1.71（95%CI=1.14～2.57）。4 TIMP-2 G-418C多态的基因型和等位基因频率在卵巢癌组与对照组中分布无显着性差异（P=0.47和P=0.33）,与C/C+G/C基因型相比,G/G基因型可能与卵巢癌的发病风险无关（OR=1.13,95%CI=0.80～1.62）。但进一步分层分析发现,携带G/G基因型有增加宫内膜样癌发病风险的趋势,OR值为1.62（95%CI=0.94～2.78）,而与临床分期及发病年龄无显着关联。5对MMP-2 C-1306T和C-735T两位点SNPs进行联合分析显示,C-1306-C-735单体型正常对照组中最常见的,占65.7%,但4种单体型（T-1306-T-735、T-1306-C-735、C-1306-T-735和C-1306-C-735）频率在卵巢癌组与对照组中分布无显着性差异（P=0.24）。另外发现,MMP-2 -1306C等位基因和-735C等位基因存在连锁不平衡现象（D’=0.78,P=0.00）。6采用似然比检验分析TIMP-2 G-418C SNP与MMP-2 C-1306T、C-735T 2个SNPs之间的基因-基因交互作用。结果显示,TIMP-2 G-418C与MMP-2 C-1306T或TIMP-2 G-418C与MMP-2 C-735T之间无明显交互作用存在（P=0.74和P=0.41）。但对不同基因型组合分析显示,卵巢癌组的C/CMMP-2 C-735T-G/GTIMP-2 G-418C频率（46.3%）明显高于对照组（36.4%）,差异有显着性（P=0.02）,且携带C/CMMP-2 C-735T- G/GTIMP-2 G-418C基因型个体的卵巢癌发病风险是携带C/T+T/TMMP-2 C-735T-G/GTIMP-2 G-418C基因型的1.67倍（95%CI= 1.10～2.54）。结论1 MMP-2 C-1306T的基因多态性可能与上皮性卵巢癌遗传易感性无关。2携带MMP-2 -735C/C基因型可能显着增加卵巢癌的发病风险,并与卵巢癌的病理类型、临床分期及年龄有显着关联,因此,该基因型可能为卵巢上皮性癌发病的潜在危险因素。3 MMP-2 C-1306T和C-735T多态间存在连锁不平衡现象,但4种单体型与卵巢癌的发病风险无显着关联。4 TIMP-2 G-418C单核苷酸多态性可能与不同病理类型的卵巢上皮性癌发病风险有关。5 TIMP-2 G-418C SNP与MMP-2 C-1306T、C-735T 2个SNPs之间,虽然未发现有明显交互作用存在,但同时携带具有强启动子活性的MMP-2 -735C/C和TIMP-2 -418G/G基因型,可以显着增加卵巢癌发病风险,可能有一定的累加效应。
王灵芝[7]（2007）在《基质金属蛋白酶及其抑制物在妊娠滋养细胞疾病中的表达及其临床意义》文中研究表明目的：探讨基质金属蛋白酶（MMPs）及其抑制物（TIMPs）的表达水平与妊娠滋养细胞疾病恶性程度之间的关系，及其它们在葡萄胎恶变中的预测作用。方法：采用免疫组织化学方法（PV-6000法）检测65例妊娠滋养细胞疾病组织（49例葡萄胎，8例发生恶变；6例侵蚀性葡萄胎；2例绒毛膜癌）和18例正常早孕绒毛组织中MMPs和TIMPs的蛋白表达水平；采用RT-PCR法检测35例葡萄胎组织（6例发生恶变）和18例正常早孕绒毛组织中MMPs和TIMPs的mRNA表达水平。结果：1、MMP-7蛋白及mRNA在正常绒毛组织和妊娠滋养细胞疾病组织中均有表达。2、MMP-7，MMP-9，TIMP-2蛋白表达在葡萄胎恶变组、侵葡组、绒癌组均分别高于正常绒毛组和葡萄胎未恶变组，差异有显着性（P＜0.05）；TIMP-1蛋白表达水平在各组中无差异性（P＞0.05）。3、MMP-7，MMP-9，TIMP-1、TIMP-2的mRNA表达水平在正常绒毛组、葡萄胎组和恶变葡萄胎组中无差异性（P＞0.05）。4、MMP-7，MMP-9存在正相关（P＜0.05），MMPs与TIMPs存在正相关（P＜0.05）。5、MMP-9／TIMP-1比值在葡萄胎恶变组、侵葡组、绒癌组中的表达均分别高于正常绒毛组和葡萄胎未恶变组，差异有显着性（P＜0.05）。6、MMP-7，MMP-9蛋白表达在有葡萄胎恶变高危因素组中均高于无高危因素组中的表达，差异有显着性（p＜0.05），TIMP-1，TIMP-2蛋白在两组中表达差异无显着性（P＞0.05）。结论：1、MMP-7在滋养细胞疾病中也有表达，可能与血道转移有关。2、MMP-7、MMP-9、TIMP-2蛋白表达水平随着妊娠滋养细胞疾病恶性程度的升高而升高，TIMP-1蛋白在各组中的表达水平无差异性，表明MMP-7、MMP-9、TIMP-2在一定程度上可以反映疾病的恶性程度。3、MMP-9／TIMP-1比值的升高与妊娠滋养细胞疾病的恶性程度及葡萄胎的恶变有关，有望成为预测葡萄胎恶变的指标，为临床预防性化疗提供理论依据。4、当葡萄胎患者存在恶变高危因素时，MMP-7、MMP-9蛋白表达升高，而TIMP-1、TIMP-2改变不明显，导致MMPs与TIMPs动态平衡的破坏，恶变的几率高。
喻静[8]（2005）在《姜黄素对卵巢癌细胞株HO-8910增殖和转移作用的研究》文中研究指明目的:探讨姜黄素（Curcumin,Cur）对卵巢癌细胞增殖和转移的影响,为临床用药提供科学依据。方法:①体外培养卵巢癌细胞株HO-8910。②采用MTT方法检测对照组、不同浓度（5、10、20、30、40、50、60umol/ml）Cur干预组（干预24、48、72、96小时）吸光值,计算细胞抑制率值。③应用光学显微镜观察不同组之间、不同时间点卵巢癌细胞形态改变。④利用RT-PCR技术与免疫细胞化学方法分别检测小剂量药物浓度Cur（1、5、10、20umol/ml）干预24小时后基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinases-2,MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases-9,MMP-9）基因在转录及翻译水平的表达以及其抑制物基质金属蛋白酶抑制剂-2（tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2）在翻译水平的表达,与对照组进行比较。结果:1、光学显微镜观察显示:随着姜黄素浓度的增高,卵巢癌细胞株形态逐渐发生变化,透光性及折光性降低,细胞皱缩,细胞数量减少,凋亡细胞增多。2、MTT结果显示:随着姜黄素浓度的增高,卵巢癌细胞OD570的值降低,提示细胞活力逐渐降低,即细胞抑制率增加。72小时内呈时间、浓度依赖性特点。在同一浓度组内,72小时时抑制率达高峰,96小时的细胞抑制率下降。不同浓度姜黄素与不同时间组之间均有显着性差异（P <0.01）。3、免疫细胞化学结果显示不同浓度姜黄素培养的卵巢癌细胞,随着药物浓度增高,细胞数目逐渐减少,TIMP-2表达逐渐增强,MMP-2及MMP-9表达逐渐减弱。差异有统计学意义（P <0.05）。4、RT-PCR结果显示不同浓度姜黄素培养的卵巢癌细胞,随着药物浓度增高,MMP-2及MMP-9mRNA表达逐渐减弱,差异有统计学意义（P <0.05）。结论:1、姜黄素能有效抑制人卵巢癌细胞株HO-8910体外增殖,72小时内呈时间、浓度依赖性特点。在同一浓度组内,72小时时抑制率达高峰,96小时的细胞抑制率下降。40umol/l姜黄素作用24小时后细胞抑制率达51.75%。2、结合免疫细胞化学及RT-PCR,分析卵巢癌HO-8910细胞株于姜黄素干预后的MMPs改变,提示MMP-2、9表达下调及TIMP-2表达上调,说明姜黄素可下调MMPs的表达及调节MMPs/TIMPs的平衡,这些可能与姜黄素抑制卵巢癌细胞浸润转移能力有关。3、说明姜黄素抑制卵巢癌细胞增殖及转移的机制十分复杂,作用靶点可以从DNA到mRNA及蛋白水平,说明姜黄素多方面抗肿瘤作用。
胡晓霞[9]（2005）在《基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与卵巢癌浸润转移关系的研究》文中认为卵巢癌是最常见的女性恶性肿瘤之一,它的5 年存活率低。侵袭和转移是卵巢癌重要的生物学特征,是引起卵巢癌患者死亡的主要原因。基质金属蛋白酶（MMP）通过降解细胞外基质（ECM）在肿瘤的侵袭和转移中起了关键性的作用。而基质金属蛋白酶的组织抑制剂（TIMPs）可抑制MMPs 的活性,MMPs 和TIMPs 的平衡失衡可导致肿瘤浸润和转移。本研究的目的是探讨基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在卵巢癌中的表达及与卵巢癌侵袭转移的关系,同时探讨反义核酸及RNA 干扰技术对MMP-9 基因的抑制作用及对卵巢癌细胞生物学行为的影响,并探讨使用RNAi 作为一种新的基因治疗的方法。应用RT-PCR 方法检测48 例卵巢癌、21 例良性卵巢肿瘤及22 例正常卵巢组织中MMP-9、2、7 及TIMP-1、2、3 mRNA 的表达情况,进行阳性率及半定量的比较,将结果与临床及病理资料进行统计学分析,并进行单因素生存分析及Cox 回归模型分析。结果显示MMP-9 阳性表达率和MMP-9、MMP-2 半定量值在卵巢恶性肿瘤组织中明显高于正常卵巢组织（P<0.05）;TIMP-2、MMP-7、TIMP-3 在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性表达率及半定量值明显高于正常卵巢组织,MMP-9/TIMP-1 在卵巢恶性肿瘤组织中的比值（0.91±0.67）明显高于正常卵巢组织（0.15±0.34）;MMP-9 表达水平与卵巢恶性肿瘤的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ-Ⅳ期患者中的表达（1.13±0.66）显着高于Ⅰ-Ⅱ期（0.60±0.54）患者（P<0.05）,其阳性患者中位生存时间为43.00±17.12 个月,其累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9 阴性者（100%）。经Cox 模型多因素生存分析,MMP-9、MMP-2、TIMP-2及残余灶大小可作为卵巢恶性肿瘤的独立预后因素。研究结果提示MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3 基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。MMP-9的高表达及MMP-9与TIMP-1 的平衡失调在晚期卵巢癌的发展中起重要作用,MMP-9 有可能作为监测晚期卵巢癌患者预后的一个指标。利用人卵巢癌组织进行RT-PCR扩增TIMP-1基因cDNA,获目的片段（631bp）连接至pcDNA4载体,转化大肠杆菌TOP10筛选阳性克隆并鉴定,并对克隆的全长片段进行DNA序列测定,构建人基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）真核表达重组质粒。利用聚合酶
胡晓霞,李力,黎丹戎,张玮,陈心秋,张洁清,唐步坚[10]（2004）在《MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义》文中研究指明背景与目的:基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases,MMPs）通过降解细胞外基质在肿瘤的侵袭与转移中起着重要作用,MMPs活性又受到其抑制剂（tissueinhibitorofmatrixmetalloproteinase,TIMPs）的调节。本研究通过检测MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA在卵巢肿瘤组织中的表达,探讨其与卵巢癌临床病理特征和预后的关系。方法:应用RT-PCR方法检测48例卵巢癌、21例良性肿瘤及22例正常卵巢组织中MMP-9、MMP-2、MMP-7及TIMP-1、TIMP-2、TIMP-3mRNA的表达。结果:MMP-9阳性率和MMP-9、MMP-2半定量值在卵巢癌组织中明显高于正常卵巢组织（P<0.05）。TIMP-2、MMP-7、TIMP-3在卵巢恶性及良性肿瘤组织中的阳性率及半定量值明显高于正常卵巢组织。MMP-9/TIMP-1在卵巢癌组织中的比值（0.91±0.67）明显高于正常卵巢组织（0.15±0.34）。MMP-9表达水平与卵巢癌的手术病理分期及预后有关,在Ⅲ～Ⅳ期患者中的表达（1.13±0.66）显着高于Ⅰ～Ⅱ期患者（0.60±0.54）（P<0.05）;MMP-9其阳性患者平均生存时间为（43.00±17.12）个月,累积生存率为47.37%,明显低于MMP-9阴性者（100%）。结论:MMP-9、MMP-2、MMP-7、TIMP-2、TIMP-3基因在卵巢恶性肿瘤组织中的表达增加。MMP-9的高表达及MMP-9与TIMP-1的平衡失调在晚期卵巢癌的发
二、卵巢浆液性肿瘤MMP-9和TIMP-1的表达意义（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、卵巢浆液性肿瘤MMP-9和TIMP-1的表达意义（论文提纲范文）
（1）MMP-9和CD44V6基因蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义（论文提纲范文）
| 1 材料和方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 试剂 |
| 1.4 结果判定 |
| 1.5 统计学处理 |
| 2 结果 |
| 2.1 MMP-9基因蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达 |
| 2.2 CD44V6基因蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达 |
| 2.3 MMP-9和CD44V6在卵巢浆液性肿瘤中表达的相关性 |
| 3 讨论 |
| 3.1 MMP-9在卵巢浆液性肿瘤中的表达 |
| 3.2 CD44V6在卵巢浆液性肿瘤中的表达 |
| 3.3 MMP-9和CD44V6在卵巢浆液性嚢腺肿瘤中表达的相互关系 |
（3）MMPs及TIMPs与妇科疾病的相关性（论文提纲范文）
| 1 MMPs的理化特性及调节 |
| 2 TIMPs的一般生物学特性 |
| 3 MMPs和TIMPs与妇科疾病 |
| 4 MMPs抑制剂治疗 |
| 4.1 生物抑制剂 |
| 4.2 化学合成抑制剂 |
| 5 展望 |
（4）金属基质蛋白酶及其组织抑制物与卵巢癌浸润转移关系的相关研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 卵巢恶性肿瘤浸润转移诊断治疗进展(文献综述) |
| 1.1 卵巢恶性肿瘤浸润转移的主要步骤 |
| 1.1.1 肿瘤细胞的增殖和扩展 |
| 1.1.2 血管发生 |
| 1.1.3 恶性肿瘤细胞的运动性和趋化性 |
| 1.1.4 肿瘤细胞栓塞、循环、锚定与粘附 |
| 1.1.5 肿瘤转移的器官选择性 |
| 1.1.6 肿瘤细胞逸出循环系统 |
| 1.1.7 肿瘤细胞定位生长 |
| 1.1.8 转移的休眠 |
| 1.2 卵巢恶性肿瘤浸润转移的主要途径 |
| 1.2.1 直接种植播散至盆腹腔 |
| 1.2.2 淋巴道转移 |
| 1.2.3 远处转移 |
| 1.3 卵巢恶性肿瘤浸润转移的主要分子机理 |
| 1.3.1 与卵巢癌转移相关的黏附分子 |
| 1.3.1.1 整合素 |
| 1.3.1.2 钙离子依赖的细胞粘附素 |
| 1.3.1.3 免疫球蛋白超家族的粘附分子 |
| 1.3.1.4 选择素 |
| 1.3.1.5 其它未归类的粘附分子 |
| 1.3.2 基因调控制与卵巢癌转移 |
| 1.3.2.1 肿瘤转移基因 |
| 1.3.2.2 肿瘤转移抑制基因 |
| 1.3.3 趋化因子对癌细胞迁移的影响 |
| 1.3.4 血管生成与卵巢恶性肿瘤的侵袭转移 |
| 1.3.4.1 肿瘤的血管生成的经典理论 |
| 1.3.4.2 血管生成拟态 |
| 1.3.5 血管生成调节因子 |
| 1.3.5.1 血管内皮生长因子 |
| 1.3.5.2 内皮抑素 |
| 1.4 卵巢恶性肿瘤浸润转移的基质因素 |
| 1.4.1 基膜 |
| 1.4.2 间隙结缔组织 |
| 1.4.3 ECM降解系统 |
| 1.4.3.1 尿激酶型纤溶酶原激活系统 |
| 1.4.3.2 乙酰肝素酶 |
| 1.4.3.3 组织蛋白酶 |
| 1.5 卵巢恶性肿瘤的微转移 |
| 1.5.1 检测肿瘤微转移 |
| 1.5.1.1 获得用来检测肿瘤微转移的标本 |
| 1.5.1.2 肿瘤微转移的检测方法 |
| 1.5.1.3 卵巢恶性肿瘤的微转移检测 |
| 1.6 卵巢恶性肿瘤浸润转移的临床表现及特点 |
| 1.6.1 直接蔓延 |
| 1.6.2 腹腔种植 |
| 1.6.3 淋巴转移 |
| 1.6.4 血道转移 |
| 1.6.5 胸腔转移 |
| 1.7 卵巢恶性肿瘤浸润转移的物理诊断 |
| 1.7.1 B超 |
| 1.7.2 计算机控制体层摄影 |
| 1.7.3 (核)磁共振影像 |
| 1.7.4 正电子发射型计算机断层扫描-计算机断层扫描显像 |
| 1.8 卵巢恶性肿瘤浸润转移的分子诊断 |
| 1.8.1 CA125 |
| 1.8.2 细胞表面分子CD24 |
| 1.8.3 骨桥蛋白 |
| 1.9 卵巢恶性肿瘤浸润转移的手术治疗 |
| 1.9.1 大网膜切除在卵巢癌治疗中的价值 |
| 1.9.2 腹后腔淋巴结清扫在卵巢癌治疗中价值 |
| 1.9.3 阑尾切除在卵巢癌治疗中的价值 |
| 1.9.4 腹腔内其他脏器肿瘤细胞减灭在卵巢癌治疗中的价值 |
| 1.9.4.1 脾脏切除术在卵巢癌治疗中的价值 |
| 1.9.4.2 肠道切除在卵巢癌治疗评价 |
| 1.10 卵巢恶性肿瘤浸润转移的化学治疗 |
| 1.10.1 晚期卵巢癌化疗的适应症 |
| 1.10.1.1 新辅助化疗 |
| 1.10.1.2 维持或巩固化疗 |
| 1.10.2 化疗注意事项 |
| 1.10.3 化疗的药物、方案及途径 |
| 1.10.3.1 化疗药物 |
| 1.10.3.2 晚期卵巢癌一线化疗方案 |
| 1.10.3.3 化疗的途径 |
| 1.10.4 晚期卵巢癌化疗前瞻性多中心随机的临床验证 |
| 1.10.4.1 铂类+紫杉醇 |
| 1.10.4.2 多西紫杉醇与紫杉醇 |
| 1.10.4.3 拓扑替肯 |
| 1.10.4.4 晚期非上皮性卵巢恶性肿瘤化疗 |
| 1.11 晚期卵巢癌的靶向治疗 |
| 1.11.1 单克隆抗体 |
| 1.11.1.1 针对CA125的单克隆抗体 |
| 1.11.1.2 针对HER-2的单克隆抗体 |
| 1.11.2 信号传导通路抑制剂 |
| 1.11.2.1 RAS/RAF/MAP通路抑制剂 |
| 1.11.2.2 PBK-AKT通路抑制剂 |
| 1.11.2.3 PKC通路抑制剂 |
| 1.11.3 酪氨酸激酶抑制剂 |
| 1.11.3.1 EGFR抑制剂 |
| 1.11.3.2 其他酪氨酸激酶抑制剂 |
| 1.11.4 针对细胞周期的靶向治疗 |
| 1.11.5 抑制血管生成的靶向治疗 |
| 1.11.6 基因治疗 |
| 1.11.6.1 分子化疗—自杀疗法 |
| 1.11.6.2 基因表达封闭—RNA干扰(RNAi) |
| 1.11.6.3 多重耐药基因 |
| 1.11.6.4 抑癌基因 |
| 1.11.6.5 联合基因治疗 |
| 1.11.7 光动力学治疗 |
| 1.11.8 卵巢恶性肿瘤的免疫治疗 |
| 1.11.8.1 细胞因子治疗 |
| 1.11.8.2 过继免疫治疗 |
| 1.11.8.3 淋巴因子活化的杀伤细胞 |
| 1.11.8.4 肿瘤浸润的淋巴细胞 |
| 1.11.8.5 细胞毒T细胞 |
| 1.12 金属基质蛋白酶及抑制物在恶性肿瘤浸润转移中的作用研究进展 |
| 1.12.1 MMP家族及抑制物的分子结构 |
| 1.12.1.1 MMP家族的分子结构 |
| 1.12.1.2 MMP抑制物的分子结构 |
| 1.12.2 MMP家族及抑制物的主要生物学作用 |
| 1.12.2.1 MMP家族的主要生物学作用 |
| 1.12.2.2 MMP抑制物的主要生物学作用 |
| 1.12.3 MMP家族及抑制物的分子调节机制 |
| 1.12.3.1 MMP家族的分子调节机制 |
| 1.12.3.2 TIMP家族的分子调节机制 |
| 1.12.4 MMP家族及抑制物在恶性肿瘤浸润转移中的生物学作用 |
| 1.12.4.1 MMP破坏肿瘤细胞侵袭的组织学屏障 |
| 1.12.4.2 MMP通过重塑细胞间黏附力，使肿瘤细胞向周围生长 |
| 1.12.4.3 MMP参与肿瘤的免疫过程 |
| 1.12.4.4 MMP调节肿瘤细胞凋亡 |
| 1.12.4.5 MMP通过对ECM的改建，促进肿瘤新血管的形成 |
| 1.12.4.6 TIMPs在恶性肿瘤浸润转移中的生物学作用 |
| 1.12.4.7 在恶性肿瘤浸润转移中MMP及TIMP家族各成员的生物学作用 |
| 1.12.5 MMP家族及抑制物在卵巢癌浸润转移中的作用 |
| 1.12.6 MMP抑制物/MMP失衡 |
| 1.13 本研究的目的与意义 |
| 第二章 卵巢肿瘤患者血清金属基质蛋白酶-9测定及临床价值 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 病例来源 |
| 2.2 标本采集 |
| 2.3 试剂及试剂的配制和仪器 |
| 2.4 ELISA法检测 |
| 2.4.1 主要原理 |
| 2.4.2 主要步骤 |
| 2.4.3 标准曲线的建立及结果判断 |
| 2.4.4 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 各类卵巢肿瘤血清MMP-9浓度的比较 |
| 3.1.1 对照组、良性组与恶性治疗前组血清MMP-9的含量 |
| 3.1.2 恶性卵巢癌治疗前、术后配对资料血清MMP-9的含量变化 |
| 3.1.3 复发组与对照组、良性组及恶性术后组血清MMP-9含量 |
| 3.1.4 不同临床病理指标的卵巢恶性肿瘤患者治疗前血清MMP-9的含量 |
| 3.2 治疗前血清MMP-9的含量在卵巢恶性肿瘤临床诊断及判断浸润转移的价值分析 |
| 3.2.1 灵敏度 |
| 3.2.2 特异度 |
| 3.2.3 假阴性率 |
| 3.2.4 假阳性率 |
| 3.2.5 卵巢肿瘤患者血清CA125的含量在临床诊断及判断浸润转移的价值 |
| 3.2.6 治疗前血清MMP-9含量ROC曲线 |
| 3.3 卵巢肿瘤患者血清MMP-9含量与CA125的关系 |
| 3.4 在卵巢恶性肿瘤患者血清中MMP-9的表达与预后的关系 |
| 3.4.1 Kaplan-Meier生存曲线分析 |
| 3.4.2 Cox比例风险模型预后分析 |
| 4 讨论 |
| 4.1 MMP-9在恶性肿瘤中的作用 |
| 4.2 血清MMP-9水平与卵巢恶性肿瘤的诊断 |
| 4.3 血清MMP-9水平与卵巢恶性肿瘤的预后 |
| 4.4 MMP-9的肿瘤标志物特性 |
| 第三章 卵巢恶性肿瘤组织中MMP-9抑制物TIMP-1基因突变与其临床病理的关系研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 病例来源 |
| 2.2 标本采集 |
| 2.3 试剂及试剂的配制和仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 提取卵巢组织基因组DNA |
| 2.4.2 聚合酶链式反应(PCR) |
| 2.4.3 单链构象多态性(SSCP)分析 |
| 2.4.3.1 SSCP分析技术的基本原理 |
| 2.4.3.2 SSCP分析技术的实验操作步骤 |
| 2.4.4 结果判定 |
| 2.4.5 SSCP分析结果的验证 |
| 2.4.6 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 TIMP-1第一编码外显子突变情况测定 |
| 3.2 TIMP-1第二编码外显子突变情况测定 |
| 3.3 TIMP-1第三编码外显子突变情况测定 |
| 3.4 TIMP-1第四编码外显子突变情况测定 |
| 3.5 TIMP-1第五编码外显子突变情况测定 |
| 3.6 TIMP-1基因突变与其临床病理的关系 |
| 3.6.1 各编码外显子SNP位点与其临床病理的关系 |
| 3.6.2 其他部位突变检出情况 |
| 4 讨论 |
| 4.1 TIMP-1在卵巢恶性肿瘤中的作用 |
| 4.2 基因突变与恶性肿瘤的关系 |
| 4.3 TIMP-1基因突变率与卵巢恶性肿瘤的关系 |
| 4.4 TIMP-1基因突变类型与卵巢恶性肿瘤的关系 |
| 4.5 检测卵巢恶性肿瘤组织中TIMP-1基因突变情况的展望 |
| 第四章 卵巢恶性肿瘤组织中MMP-9抑制物TIMP-1基因启动子区域CpG岛甲基化与其临床病理关系的初步研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 病例来源 |
| 2.2 标本采集 |
| 2.3 试剂及试剂的配制和仪器 |
| 2.4 实验方法 |
| 2.4.1 提取卵巢组织DNA |
| 2.4.2 甲基化特异性聚合酶链式反应 |
| 2.4.2.1 原理 |
| 2.4.2.2 步骤 |
| 2.4.3 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 CpG岛甲基化 |
| 4.2 基因甲基化与卵巢肿瘤 |
| 4.3 TIMP-1基因甲基化与卵巢肿瘤 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 学习期间发表论文 |
（5）WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在卵巢浆液性乳头状癌中的表达及意义（论文提纲范文）
| 符号说明 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 1.实验材料与方法 |
| 2.结果 |
| 3.讨论 |
| 全文结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文目录 |
（6）MMP-2和TIMP-2基因启动子区多态性与卵巢上皮性癌关系的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 研究论文 MMP-2 和TIMP-2 基因启动子区多态性与卵巢上皮性癌关系的研究 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 基质金属蛋白酶及其组织抑制因子与卵巢癌关系的研究进展 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）基质金属蛋白酶及其抑制物在妊娠滋养细胞疾病中的表达及其临床意义（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 第一章 材料与方法 |
| 1.1 标本来源 |
| 1.2 仪器、材料和试剂 |
| 1.3 方法 |
| 第二章 结果 |
| 2.1 免疫组化结果 |
| 2.2 RT-PCR结果 |
| 第三章 讨论 |
| 3.1 MMPs与TIMPs的结构与功能 |
| 3.2 MMPs和TIMPs与妊娠滋养细胞疾病的关系 |
| 3.3 MMPs、TIMPs与葡萄胎恶变的关系 |
| 3.4 MMPs与TIMPs与葡萄胎恶变高危因素的关系 |
| 3.5 MMPs与TIMPs之间的相互关系 |
| 3.6 小结 |
| 结论 |
| 附图 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 致谢 |
（8）姜黄素对卵巢癌细胞株HO-8910增殖和转移作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 绪 论(前言) |
| 第一章 文献综述 |
| 1 基质金属蛋白酶及其抑制物与卵巢肿瘤关系的研究进展 |
| 2 姜黄素简介 |
| 3 应用与展望 |
| 第二章 材料、原理与方法 |
| 1 卵巢癌HO-8910 细胞株培养 |
| 2 试剂 |
| 3 主要仪器与材料 |
| 4 实验方法 |
| 第三章 实验结果 |
| 1 倒置相差显微镜观察卵巢癌细胞株HO-8910 |
| 2 MTT 观察细胞活力 |
| 3 免疫细胞化学检测细胞胞浆内MMP-2,9 及TIMP-2 蛋白 |
| 4 半定量 RT-PCR 测定卵巢癌细胞中MMP-2、9 及TIMP-2 的mRNA 的表达 |
| 第四章 讨论 |
| 1 卵巢癌浸润转移的分子基础 |
| 2 MMPs/TIMPs 与卵巢癌浸润转移的关系 |
| 3 MMPs/TIMPs 在卵巢肿瘤中的临床意义 |
| 4 MMPs 常用检测方法 |
| 5 姜黄素抗肿瘤作用机制探讨 |
| 6 问题与展望 |
| 第五章 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 作者简介 |
（9）基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与卵巢癌浸润转移关系的研究（论文提纲范文）
| 致谢 |
| 英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 前言(综述) |
| 1 卵巢恶性肿瘤研究进展 |
| 1.1 卵巢恶性肿瘤的遗传学研究进展 |
| 1.1.1 染色体异常与卵巢癌 |
| 1.1.2 与卵巢癌相关的基因改变 |
| 1.1.2.1 癌基因 |
| 1.1.2.2 抑癌基因 |
| 1.1.2.3 耐药相关蛋白 |
| 1.2 卵巢癌预后因素的研究概述 |
| 1.2.1 临床病理与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.2.1.1 临床分期与预后的关系 |
| 1.2.1.2 组织学类型、分级与预后的关系 |
| 1.2.2 临床治疗与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.2.2.1 手术方式及术后残余灶与预后的关系 |
| 1.2.2.2 卵巢上皮性癌一线化疗方案及疗程与预后的关系 |
| 1.2.2.3 卵巢癌综合治疗与预后的关系 |
| 1.2.3 与卵巢癌预后相关的分子生物学因素 |
| 1.2.3.1 癌基因和抑癌基因表达变化与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.2.3.2 肿瘤转移相关基因与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.2.3.3 生长因子与生长因子受体与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.2.3.4 细胞周期调控因子与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.2.3.5 细胞凋亡基因与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.2.3.6 血清相关因子与卵巢癌预后因素的关系 |
| 1.3 卵巢恶性肿瘤的治疗概况 |
| 1.3.1 恶性肿瘤的手术治疗 |
| 1.3.1.1 I 期卵巢上皮性癌全面分期探查术 |
| 1.3.1.2 肿瘤细胞减灭术 |
| 1.3.1.3 二次剖腹探查术 |
| 1.3.1.4 复发肿瘤的手术治疗 |
| 1.3.1.5 腹腔镜在卵巢癌治疗中的应用 |
| 1.3.1.6 保留生育功能的手术 |
| 1.3.2 卵巢癌的化学治疗 |
| 1.3.2.1 Ⅰ期卵巢癌的化疗 |
| 1.3.2.2 晚期卵巢癌化疗 |
| 1.3.2.3 卵巢癌腹腔化疗 |
| 1.3.2.4 复发性卵巢癌化疗 |
| 1.3.2.5 卵巢癌的先期化疗 |
| 1.3.3 卵巢恶性肿瘤的生物治疗 |
| 1.3.3.1 基因治疗 |
| 1.3.3.2 免疫治疗 |
| 2 卵巢恶性肿瘤的侵袭和转移 |
| 2.1 卵巢癌病灶转移的临床特征 |
| 2.1.1 腹腔种植 |
| 2.1.2 淋巴转移 |
| 2.1.3 卵巢癌转移的预后 |
| 2.2 肿瘤侵袭转移步骤 |
| 2.2.1 肿瘤侵袭-肿瘤细胞从原发瘤进入循环系统 |
| 2.2.2 肿瘤转移-肿瘤细胞从循环系统进入继发器官 |
| 2.3 卵巢恶性肿瘤浸润转移的分子机理 |
| 2.3.1 基因调控与肿瘤侵袭转移 |
| 2.3.2 粘附分子与卵巢恶性肿瘤浸润转移 |
| 2.3.3 血管生成与卵巢恶性肿瘤的侵袭转移 |
| 2.3.3.1 肿瘤血管生成(angiogenesi)的过程 |
| 2.3.3.2 血管生成调节因子 |
| 2.3.3.3 血管生成促进肿瘤生长和扩散的可能机制 |
| 2.3.3.4 血管生成与卵巢恶性肿瘤 |
| 2.3.4 纤维蛋白溶解酶及其调节因子与卵巢恶性肿瘤的侵袭转移 |
| 2.3.5 基质金属蛋白酶及其抑制剂与卵巢肿瘤的侵袭转移 |
| 3 基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与卵巢癌侵袭转移的关系 |
| 3.1 细胞外基质(ECM)的结构 |
| 3.1.1 基膜( BMs) |
| 3.1.2 间隙结缔组织( ICT) |
| 3.2 基质金属蛋白酶(MMPS) 简介 |
| 3.2.1 MMPs 家族 |
| 3.2.2 MMPs 结构域 |
| 3.2.3 MMPs 的生理学功能 |
| 3.3 基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMPS)简介 |
| 3.4 MMPS 和TIMPS 的调节 |
| 3.4.1 MMPs 的激活 |
| 3.4.2 TIMPs 对MMPs 活性的调节 |
| 3.4.3 MMPs 的转录水平调节 |
| 3.5 TIMPS 对MMPS 在卵巢肿瘤中的表达 |
| 3.5.1 与病理类型和组织分级的关系 |
| 3.5.2 与临床分期的关系 |
| 3.5.3 与预后的关系 |
| 3.6 MMPS 和TIMPS 在肿瘤侵袭和转移中的作用 |
| 3.6.1 降解细胞外基质 |
| 3.6.2 在新生血管形成中的作用 |
| 3.6.3 调节细胞粘附 |
| 4 卵巢肿瘤侵袭转移治疗研究现状及展望 |
| 4.1 血管生成抑制剂 |
| 4.2 细胞粘附因子抑制剂 |
| 4.3 金属蛋白酶抑制剂 |
| 4.4 以MMPS 为靶子的基因治疗 |
| 第二章 基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在卵巢恶性肿瘤组织中的表达 |
| 1 材料和方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.1.1 组织标本 |
| 1.1.2 诊断标准 |
| 1.1.3 随访 |
| 1.1 主要试剂及配制 |
| 1.2.1 试剂 |
| 1.2.2 试剂的配制 |
| 1.3 仪器及用具处理 |
| 1.3.1 仪器 |
| 1.3.2 用具处理 |
| 1.4 引物的设计 |
| 1.5 方法 |
| 1.5.1 组织总RNA 提取 |
| 1.5.2 cDNA 合成 |
| 1.5.3 半定量PCR |
| 1.6 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 卵巢恶性肿瘤生存率 |
| 2.2 MMP-9 与TIMP-1MRNA 的表达 |
| 2.2.1 PT-PCR 扩增结果 |
| 2.2.2 在卵巢恶性、良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达 |
| 2.2.3 在卵巢恶性肿瘤中的表达与临床病理特征的关系 |
| 2.2.4 在卵巢恶性肿瘤组织中的表达与患者预后的关系 |
| 2.3 MMP-2 与TIMP-2 MRNA 的表达 |
| 2.3.1 PT-PCR 扩增结果 |
| 2.3.2 在卵巢恶性、良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达 |
| 2.3.3 在卵巢恶性肿瘤中的表达与临床病理特征的关系 |
| 2.3.4 在卵巢恶性肿瘤组织中的表达与患者预后的关系 |
| 2.4 MMP-7 与TIMP-3 MRNA 的表达 |
| 2.4.1 PT-PCR 扩增结果 |
| 2.4.2 在卵巢恶性肿瘤、良性肿瘤及正常卵巢组织中的表达 |
| 2.4.3 在卵巢恶性肿瘤组织中的表达与临床病理特征的关系 |
| 2.4.4 在卵巢恶性肿瘤组织的表达与预后的关系 |
| 2.5 COX比例风险模型预后分析 |
| 3 讨论 |
| 3.1 MMPS、TIMPS 在肿瘤中的作用及关系 |
| 3.2 MMP-9、TIMP-1 MRNA 的表达与卵巢肿瘤的关系 |
| 3.3 MMP-2、TIMP-2 MRNA 的表达与卵巢肿瘤的关系 |
| 3.4 MMP-7、TIMP-3 MRNA 的表达与卵巢肿瘤的关系 |
| 第三章 TIMP-1 真核表达质粒的构建及在卵巢肿瘤组织中突变的检测 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 材料 |
| 1.1.1 标本 |
| 1.1.2 质粒与菌株 |
| 1.1.3 试剂 |
| 1.1.4 仪器 |
| 1.2 原理 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 引物设计与合成 |
| 1.3.2 TIMP-1 全长cDNA 的PCR 扩增 |
| 1.3.3 PCR 产物的纯化与回收 |
| 1.3.4 大肠杆菌感受态细菌的制备 |
| 1.3.5 TOPO 克隆反应 |
| 1.3.6 质粒DNA 转化感受态大肠杆菌TOP10 |
| 1.3.7 挑选氨苄抗性克隆 |
| 1.3.8 质粒DNA 的快速提取 |
| 1.3.9 PCR 法鉴定 |
| 1.3.10 重组质粒的测序 |
| 1.3.11 序列分析 |
| 1.3.12 SSCP 的PCR 扩增 |
| 1.3.13 聚丙烯酰胺凝胶电泳 |
| 1.3.14 银染色 |
| 1.3.15 回收目标条带进行PCR 反应及产物测序 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 TIMP1 CDNA 的PCR 结果 |
| 2.2 质粒电泳结果 |
| 2.3 PCR 法重组质粒的鉴定结果 |
| 2.4 TIMP-1 全序列测定结果及BLAST 分析 |
| 2.5 PCR 结果 |
| 2.6 SSCP 结果 |
| 2.7 回收条带的PCR 测序结果 |
| 3 讨论 |
| 第四章 MMP-9 反义寡核苷酸对卵巢癌细胞生物学行为的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要材料和试剂 |
| 1.2 试剂的配制 |
| 1.3 仪器 |
| 1.4 寡核苷酸的设计与合成 |
| 1.5 引物的设计与合成 |
| 1.6 卵巢癌细胞MMP-9、MMP-2 及TIMP-1 表达的检测 |
| 1.6.1 细胞培养 |
| 1.6.3 纤粘连蛋白诱导卵巢癌细胞MMP-9、MMP-2 的mRNA 及蛋白的表达 |
| 1.6.4 Western Blot 检测蛋白的表达 |
| 1.7 MMP-9 反义寡核苷酸转染卵巢癌细胞 |
| 1.7.1 实验分组 |
| 1.7.2 Lipofectimine 介导的寡核苷酸转染(以24 孔板为例) |
| 1.8 绿色荧光蛋白载体(PEGFP-N1)的转染 |
| 1.9 姬姆萨染色法 |
| 1.10 MMP-9 的MRNA、蛋白及酶活性的检测 |
| 1.10.1 RT-PCR 检测MMP-9 mRNA 的表达 |
| 1.10.2 Western Blot 检测MMP-9 蛋白的表达 |
| 1.10.3 明胶酶谱法(Zymography)进行酶活性的检测 |
| 1.11 细胞生物学特性观察 |
| 1.11.1 细胞生长曲线测定法(活细胞计数法) |
| 1.11.2 细胞集落形成测定 |
| 1.11.3 流式细胞仪检测细胞生长周期的变化 |
| 1.12 细胞侵袭粘附能力的测定 |
| 1.12.1 细胞体外侵袭能力测定(Matrigel Invasion Assay) |
| 1.12.2 细胞体外迁移能力测定(Transwell Migration Assays) |
| 1.12.3 细胞体外黏附能力测定(Cell Adhersion Assay) |
| 1.13 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 卵巢癌细胞株MMP-9、MMP-2、TIMP-1 MRNA 的表达 |
| 2.2 纤粘连蛋白诱导后卵巢癌细胞MMP-9、MMP-2 的MRNA 及蛋白的表达 |
| 2.3 LIPOFECTIMINE 介导的转染效率的观察 |
| 2.4 转染对细胞MMP-9 MRNA、蛋白及酶活性表达的影响 |
| 2.4.1 MMP-9 mRNA 的表达 |
| 2.4.2 细胞MMP-9 蛋白表达 |
| 2.4.3 MMP-9 明胶酶活性的表达 |
| 2.5 转染对卵巢癌细胞生物学特征的影响 |
| 2.5.1 细胞形态的影响 |
| 2.5.2 细胞生长曲线的影响 |
| 2.5.3 克隆形成率的影响 |
| 2.6 MMP-9 反义寡核苷酸对卵巢癌细胞侵袭粘附能力的影响 |
| 2.6.1 细胞体外侵袭能力的检测 |
| 2.6.2 细胞体外迁移能力的测定 |
| 3 讨论 |
| 第五章 RNA 干扰抑制卵巢癌细胞MMP-9 基因表达的研究 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要材料和试剂 |
| 1.2 RNAI 实验 |
| 1.2.1 实验原理 |
| 1.2.2 siRNA 的选择及引物设计 |
| 1.2.2.1 基因序列的选择 |
| 1.2.2.2 下游引物序列 |
| 1.2.2.3 下游引物设计 |
| 1.2.3 实验分组 |
| 1.2.4 dsRNA 合成及转染 |
| 1.3 绿色荧光蛋白载体(PEGFP-N1)的转染 |
| 1.4 RT-PCR |
| 1.5 WESTERN BLOT |
| 1.6 细胞生长曲线测定法(MTT 比色法) |
| 1.7 .细胞体外侵袭能力测定(MATRIGEL INVASION ASSAY) |
| 1.8 细胞体外粘附能力测定(CELL ADHERSION ASSAY) |
| 1.9 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 DNA 的扩增与纯化 |
| 2.2 转染效率 |
| 2.3 SIRNA 对卵巢癌细胞HO-8910PM MMP-9 MRNA、蛋白表达的影响 |
| 2.3.1 MMP-9 mRNA 的表达 |
| 2.3.2 MMP-9 蛋白的表达 |
| 2.4 细胞生长曲线的变化 |
| 2.5 SIRNA 抑制MMP-9 基因表达对卵巢癌细胞侵袭粘附能力的影响 |
| 2.5.1 细胞体外侵袭能力的检测 |
| 2.5.2 细胞体外粘附能力测定 |
| 3 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 附彩图 |
| 学习期间发表论文 |
四、卵巢浆液性肿瘤MMP-9和TIMP-1的表达意义（论文参考文献）
- [1]MMP-9和CD44V6基因蛋白在卵巢浆液性肿瘤中的表达及意义[J]. 朱慧芳. 实用医药杂志, 2009(07)
- [2]WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在卵巢浆液性乳头状癌中的表达及意义[J]. 杨杰斌,彭真年,吴伟强. 重庆医科大学学报, 2008(12)
- [3]MMPs及TIMPs与妇科疾病的相关性[J]. 邵强,李芬芬,徐存拴. 中国妇幼保健, 2008(28)
- [4]金属基质蛋白酶及其组织抑制物与卵巢癌浸润转移关系的相关研究[D]. 周杰. 广西医科大学, 2008(10)
- [5]WT-1、P53、MMP-9和TIMP-2在卵巢浆液性乳头状癌中的表达及意义[D]. 杨杰斌. 重庆医科大学, 2008(01)
- [6]MMP-2和TIMP-2基因启动子区多态性与卵巢上皮性癌关系的研究[D]. 李秀兰. 河北医科大学, 2008(01)
- [7]基质金属蛋白酶及其抑制物在妊娠滋养细胞疾病中的表达及其临床意义[D]. 王灵芝. 青岛大学, 2007(01)
- [8]姜黄素对卵巢癌细胞株HO-8910增殖和转移作用的研究[D]. 喻静. 东南大学, 2005(01)
- [9]基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与卵巢癌浸润转移关系的研究[D]. 胡晓霞. 广西医科大学, 2005(05)
- [10]MMP-9,2,7及其抑制剂TIMP-1,2,3在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义[J]. 胡晓霞,李力,黎丹戎,张玮,陈心秋,张洁清,唐步坚. 癌症, 2004(10)