一、摄像辅助医疗注射（论文文献综述）
王子安[1]（2021）在《基于高速摄像的栓塞胶同轴输注技术离体研究》文中提出血管介入栓塞术是在医学影像设备的引导下,将栓塞剂经微导管有控制地注入到靶血管内,使之发生闭塞、中断血供而达到预期治疗效果的技术。氰基丙烯酸脂类栓塞胶因其快速聚合、高流动性、低粘度、低组织毒性等特性,常作为栓塞迂曲、缠绕血管畸形的首选液体栓塞材料。临床介入栓塞手术中,氰基丙烯酸脂类栓塞胶常与超液化碘油混合,通过控制混合比例提高栓塞胶的可操控性,用以不同部位的血管栓塞。当氰基丙烯酸脂胶-碘油混合物经微导管同轴注射到血液中时,实现对注射过程中所产生的胶滴形态、尺寸及聚合速率等参数的有效控制是安全完成栓塞手术的必要前提。除了受栓塞胶自身快速聚合固化的影响外,注射方式、注射速率、血液流动及血管结构等因素的改变也会直接影响栓塞效果。然而,栓塞胶-碘油混合比例选择与其注射方式仍依赖医生的临床经验和操作习惯,注射方式、注射速率、血液流动及血管结构与胶滴形态、尺寸间的定量关系尚不明确,如何控制注射条件以达到预期的栓塞效果尚缺乏系统的研究。本研究构建了模拟栓塞胶血管介入同轴注射的离体装置,采用外围注射泵控制栓塞胶与碘油混合物（分散相）经微导管同轴注射到血液模拟液（连续相）中,并结合高速摄像采集系统记录了胶滴的生成过程。通过改变注射速率、栓塞胶-碘油混合物浓度、血液模拟液成分以及血液模拟液流动速率,记录不同注射条件下胶滴生成的图像。随后利用采集到的图像,通过图像处理与数值分析,定量研究了不同注射条件对胶滴形态分布、生成时间、胶滴尺寸间的影响。离体实验结果表明,在栓塞胶同轴注射过程中,胶滴生成过程受到栓塞胶聚合反应与同轴注射动力学的联合作用。当栓塞胶注射速率低或血液模拟液流动速率低时,表面聚合更剧烈,对生成胶滴的形态、时间以及尺寸影响都增大;随着栓塞胶注射速率的增大以及血液模拟液流动速率的增大,液滴生成时间和尺寸都将相对减小,但是血液模拟液流动速率的改变对栓塞胶胶滴生成的形态影响不大。栓塞胶-碘油混合物中栓塞胶浓度增大栓塞胶聚合反应影响更为剧烈,对生成胶滴的形态影响更大,从而导致生成胶滴所需的时间、体积也随之增大,反之亦然。此外,随着血液模拟液成分中蛋白质浓度的增加,栓塞胶聚合反应加剧,对生成胶滴的形态、时间和尺寸影响都会更加显着。本研究结果为血管介入栓塞手术中有效控制栓塞剂血管同轴注射过程、优化手术方案、提高手术安全性提供了重要实验依据。
徐清月[2]（2021）在《西安地区现代综合医院核医学科建筑设计研究》文中指出随着我国经济飞速发展,人们的作息时间颠倒,睡眠时间大大缩短,特别是饮食不规律,依靠外卖和方便食品过度,再加上我国的工业化、城镇化、老龄化进程的加快,生态环境和食品安全问题等等状况对居民健康产生很大影响。在光华博斯特发布的《2020年中国国民健康与营养大数据报告》中显示,心脑血管疾病和肿瘤成为我国死亡率最高的两大疾病,严重影响国民的健康寿命,近十年来心脑血管疾病和肿瘤患病人数增加了接近一倍,平均每10秒就有一个人患上肿瘤疾病,每30秒就有一个人因患心脑血管相关疾病而离世。而本文所研究的核医学科主要开展上述疾病的相关检查、诊断及治疗项目,作为一门重要医技科室,起到辅助临床科室对相关疾病作出准确诊断和制定治疗方案的重要作用。核医学诊断具有灵敏度高、放射性药物种类繁多、特异性的优势特点。目前我国核医学科还处于快速发展阶段,但有关核医学科建筑设计的规范较少,尚未形成系统的研究,缺乏建设核医学科完整的理论指导,研究现代医院核医学科的建筑设计具有很大的必要性的迫切性。本论文属于《现代医院专科专属医治空间建筑设计研究》总课题下的子课题,随着现代医学科学技术的进步,针对不同病种,不同诊断模式、不同治疗方案,强调适应差异化医学需求的专科专属医治空间已成为现代医院解决疾病疗愈环境的一种必要保障。本文也将从核医学科专科专属医治空间建筑设计研究作为出发点,根据核医学科的特殊性进一步对核医学科进行详细的建筑设计研究。本论文第一章通过对现代综合医院核医学科的背景研究、国内外资料查询及核医学科建筑设计研究现状,明确了研究内容和意义,以及列出研究方法和框架;第二章阐述核医学科相关概念、发展过程、主要设备、主要业务、检查流程、科室设置条件和设备配置条件,也为之后的建筑空间设计研究奠定了良好的基础;第三章对西安地区现代综合医院进行调研,筛选符合本文研究对象的医院,选取单廊式、双廊式和多廊式各一家医院进行详细的案例分析,分别从科室概况、功能分区、房间组成、流线分析和人性化设计等方面进行阐述,总结出目前西安地区现代综合医院中核医学科的发展现状和现存问题;第四章通过查找相关资料及建筑设计理论知识解决上述问题,阐述核医学科的场地选址、规模要求、布局方式以及建筑空间设计的功能房间组成、流线设计、流线组织方式和人性化设计等方面的建筑设计要点,总结出一套现代综合医院核医学科专科专属医疗空间的设计方法和规律;第五章主要介绍了现代综合医院核医学科特殊的的辐射防护、空调通风、排水和设备供配电等方面设计要点,以及这些特殊的其他专业设计对建筑空间的影像和要求。最后,得出本论文主要的研究成果,总结西安地区核医学科发展趋势,提出优化策略,并结合当代新技术的发展,展望核医学科未来发展,为之后现代综合医学院的核医学科建设提供可以借鉴的参考和依据。
邓杰忠[3]（2021）在《维生素D对骨结核微环境中破骨细胞生成的影响及其机制研究》文中进行了进一步梳理研究背景骨重塑是维持骨吸收与骨形成之间的动态平衡的过程,主要有两个关键的参与者:负责骨合成的成骨细胞与负责骨吸收的破骨细胞。骨重塑的失衡比如过度的破骨细胞激活会导致骨质疏松症,类风湿性关节炎,多发性骨髓瘤等疾病。在全球范围内,结核病仍然是最严重的感染疾病之一,据2020年统计,大约有一亿人患结核病,其中有近140万人死亡。近年来耐药结核病面临巨大挑战。全球有近50万人患上了利福平耐药结核病（RR-TB）,其中78%患有耐多药结核病（MDR-TB）。作为最常见的肺外结核病,骨关节结核主要临床表现为骨质破坏,可能是由于结核分枝杆菌感染导致了异常破骨细胞激活,严重破坏了骨重塑的平衡。维生素D（VD）的经典作用是调节钙的吸收和稳态,骨代谢以及细胞的生长和分裂。1,25（OH）2D3作为具有生物活性的VD,已经被证明能够调节细胞的生长、迁移、分化和免疫应答。VD缺乏与许多病理状况有关,包括感染、自身免疫和过敏性疾病。前期课题组成功建立VD缺乏小鼠动物模型,VD缺乏显着抑制小鼠抗结核免疫功能,提示VD缺乏与结核病易感性相关,且VD缺乏者患结核后病情严重。文献报道的大剂量VD辅助治疗肺结核的随机、双盲临床研究发现,VD不仅能提高临床疗效,还能改善患者的影像学表现,但在骨结核中没有相关的研究报道。临床上,骨结核患者尤其是VD缺乏的患者表现出严重的骨质破坏,我们猜想可能是由于结核分枝杆菌通过TLR激活了巨噬细胞的炎症信号通路,从而促进了破骨细胞的生成,导致了骨破坏,但VD在结核引起破骨细胞异常激活中的作用尚不清楚。在2020年有关结核的会议报告上提出了“大幅度增加对结核病的预防性治疗”的目标。在此背景下,本研究旨在探究1,25（OH）2D3与VDR在结核导致的异常破骨激活中的作用及其机制。在抗结核新药和治疗性抗结核疫苗研发无重大进展的背景下,VD的免疫调节作用具有诱人的潜力,促使我们研究在化疗基础上辅助VD免疫调节治疗耐多药结核,以期增强杀菌效果、减轻结核病变程度和提高治愈率。研究方法1、破骨细胞体外诱导体系模型和结核分枝杆菌感染模型的建立。2、破骨细胞分化、融合和功能相关基因m RNA与蛋白表达定量检测。3、TRAP染色、FAK染色以及噬骨实验定性检测破骨细胞的分化、融合及功能。4、建立结核分枝杆菌诱导的小鼠颅骨骨溶解模型,在小鼠体内验证VD的作用。研究结果1、1,25（OH）2D3在破骨细胞的形态、基因表达以及功能等方面均显示出抑制作用。1,25（OH）2D3在破骨细胞的形态上显着抑制了破骨细胞的生成（F=38.06,p<0.0001）与融合（F=77.97,p<0.0001）;1,25（OH）2D3抑制了破骨细胞分化各时期c-Fos（组间F=3.280,p=0.0515;组内F=2.893,p=0.0163）、NFATc1（组间F=14.91,p<0.0001;组内F=6.595,p=0.0006）、Cts K（组间F=147.3,p<0.0001;组内F=30.05,p<0.0001）、MMP9（组间F=142.7,p<0.0001;组内F=26.58,p<0.0001）的m RNA表达水平;1,25（OH）2D3抑制了破骨细胞分化各时期c-Fos、NFATc1、Cts K、MMP9的蛋白质表达水平;1,25（OH）2D3抑制了破骨细胞的骨吸收功能（F=89.00,p<0.0001）。2、结核分枝杆菌（M.tb）感染导致异常的破骨细胞激活。M.tb感染在形态上促进了破骨细胞生成（t=12.99,p=0.0002）与融合（t=39.05,p<0.0001）;促进了破骨细胞分化各时期c-Fos（t=4.073,p=0.0066）、NFATc1（t=3.772,p=0.0196）、Cts K（t=5.961,p=0.0010）、MMP9（t=39.87,p<0.0001）的m RNA表达水平;促进了破骨细胞分化各时期c-Fos、NFATc1、Cts K、MMP9的蛋白质表达水平;促进了破骨细胞的骨吸收功能（t=41.45,p<0.0001）。3、1,25（OH）2D3抑制结核感染导致的异常破骨细胞生成,并具有浓度依赖性。1,25（OH）2D3在破骨细胞的形态上显着抑制了结核感染导致的破骨细胞的异常生成（F=22.08,p=0.0003）与融合（F=55.59,p<0.0001）;抑制了破骨细胞标志基因c-Fos（F=354.6,p<0.0001）、NFATc1（F=68.02,p<0.0001）、Cts K（F=139.4,p<0.0001）、MMP9（F=264.2,p<0.0001）的m RNA表达水平;抑制了破骨细胞标志基因c-Fos、NFATc1、Cts K、MMP9的蛋白质表达水平;抑制了破骨细胞的骨吸收功能（F=194.0,p<0.0001）。4、1,25（OH）2D3通过VDR抑制M.tb诱导的异常破骨细胞生成。Western blot结果显示沉默组VDR的m RNA（t=16.62,p<0.0001）与蛋白质表达水平显着下调,免疫荧光结果显示沉默组VDR的阳性率弱。沉默组的破骨细胞标志基因c-Fos（t=9.782,p=0.0006）、NFATc1（t=7.030,p=0.0022）、Cts K（t=14.17,p=0.0001）、MMP9（t=4.304,p=0.0126）的m RNA表达水平上调。Western blot显示出相同的结果。5、VDR的激活能抑制IκB磷酸化从而抑制M.tb诱导的破骨细胞形成。M.tb感染促进了破骨细胞中VDR（t=13.09,p=0.0002）和NFκB p65（t=18.22,p<0.0001）的m RNA表达水平,且1,25（OH）2D3能抑制NFκB p65（F=60.91,p<0.0001）的表达水平。Western blot显示出相同的结果。1,25（OH）2D3能抑制NFκB p65和IκBα的磷酸化水平,阻止p65核转位,抑制M.tb诱导的破骨细胞形成。研究结论结核分枝杆菌感染导致破骨细胞生成异常激活,VDR表达显着上调。1,25（OH）2D3激活VDR可通过IκBα/p65信号通路抑制M.tb诱导的异常的破骨细胞生成（分化、融合和骨吸收活性）。随着耐多药结核病的日益严重,迫切需要新的药物治疗方法的开发。本研究结果揭示了1,25（OH）2D3作为一种新药在预防和改善骨关节结核方面的潜在价值。
侯季秋[4]（2021）在《从CXCR4/NF-κB/GSDMD探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究》文中研究表明目的:通过临床文献研究明确中药治疗冠心病合并焦虑抑郁疾病对患者体内炎症因子水平及焦虑抑郁状态的影响,得出中药治疗对机体炎症因子表达量影响及对焦虑抑郁状态改善情况。通过实验研究探析慢性应激性情绪刺激对心肌梗死后大鼠体内CXC趋化性炎症反应的影响,及柴胡加龙骨牡蛎汤治疗心肌梗死合并焦虑大鼠炎症反应的效用机制。方法:研究一:根据主要检索词,在中国知网、维普数据库、万方数据库和PubMed、Cochrane Library进行检索,检索年份不限。由2名研究者根据纳入标准独自进行文献检索及筛选。并按照Cochrane’s Handbook提供的偏倚风险Risk of bias（ROB）量表对纳入的文献进行质量评价,采用GRADEpro系统对证据质量进行评级。使用Cochrane Revman 5.3软件进行数据录入、分析,采用相应的模型进行分析处理。对临床异质性大而不能进行合并分析的研究则仅进行描述性分析,最后用森林图表示结果。研究二:本研究采用21天不可应激性空瓶刺激方法建立焦虑模型,结扎冠脉左前降支方式建立心肌梗死模型,根据实验目的分别给予不同的干预方式,并分成假手术组、心梗组、复合模型组、抑制剂组、中药组,每组6～9只不等,采用心电图、心脏超声对心肌梗死大鼠造模成功与否及心功能进行评价,采用高架十字迷宫和旷场试验评价大鼠的行为学,进行HE、Masson、尼氏染色及透射电镜观察组织细胞形态变化,采用ELISA、免疫组化、Western-Blot、QPCR对靶点蛋白和基因进行检测。结果:研究一:本研究共纳入21篇研究文献,总样本量2342例,试验组1175例,对照组1167例。药物干预试验组Hs-CRP因子表达量均值低于对照组[SMD=-1.61,95%CI（-2.14,-1.00）,P<0.01];药物干预试验组IL-6因子表达量均值低于对照组[SMD=-43.31,95%CI（-45.55,-41.07）,P<0.01];药物干预试验组IL-8因子表达量均值低于对照组[SMD=-5.03,95%CI（-8.37,-1.70）,P=0.003];药物干预试验组 IL-17 因子表达量均值低于对照组[SMD=-33.27,95%CI（-40.15,-26.39）,P<0.01];药物干预试验组 TNF-α因子表达量均值低于对照组[SMD=-1.18,95%CI（-1.98,-0.38）,P=0.004];药物干预试验组患者焦虑状态的汉密尔顿量表评分均值低于对照组[SMD=-1.97,95%CI（-2.48,-1.46）,P<0.01]。研究二:实验一:（1）慢性应激刺激下心肌梗死大鼠骨髓中CXCL12的含量降低:复合模型组大鼠骨髓中CXCL12表达量明显低于假手术及心肌梗死组（P<0.05）;（2）慢性应激刺激下心肌梗死大鼠心肌组织CXCR4表达亢进:复合模型组大鼠梗死边缘区心肌组织CXCR4的IOD值高于假手术组和心肌梗死组（P<0.05）;（3）心肌梗死后CXCL12/CXCR4生物轴失衡加重炎症反应:复合模型组中性粒细胞弹性蛋白酶表达明显高于假手术及心肌梗死组（P<0.05）,复合模型组和心肌梗死组心肌纤维排列紊乱,细胞骨架结构消失并发生大面积坏死,大量中性粒细胞及其他炎症因子浸润。实验二:（1）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制CXCR4/NF-κB/GSDMD通路炎症蛋白表达:中药组与抑制剂组大鼠CXCR4蛋白表达量比复合模型组明显降低（P<0.05）,给予中药及抑制剂的大鼠组织内NF-κB、IL-1β、IL-18、GSDMD蛋白的表达与复合模型组大鼠相比有所下降（P<0.05）;（2）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制CXCR4/NF-κB/GSDMD通路炎症蛋白基因表达:复合模型组大鼠体内CXCR4、NLRP3、NF-κB、GSDMD蛋白基因表达明显高于假手术组（P<0.05）,中药组可明显抑制心肌梗死合并焦虑大鼠体内CXCR4、NLRP3、NF-κB、GSDMD蛋白基因表达量（P<0.05）;（3）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死边缘区组织相关炎症蛋白表达:与假手术组比较,复合模型组NLRP3、GSDMD免疫组化染色阳性率增高（P<0.05）,但中药组大鼠心肌梗死边缘区的NLRP3、GSDMD表达水平低于复合模型组（P<0.05）;（4）柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌梗死后心脏功能:与假手术组比较,心肌梗死组和复合模型组LVEF%和LVFS%明显降低（P<0.05）,抑制剂组和中药组大鼠心脏LVEF%、LVFS%较复合模型组明显升高（P<0.05）,复合模型组及心肌梗死组大鼠的LVIDs、LVIDd比假手术组明显增加（P<0.05）,抑制剂组和中药组的LVIDd和LVIDs均比复合模型组下降（P<0.05）;（5）柴胡加龙骨牡蛎汤降低外周血中IL-1β和IL-18表达水平:与复合模型组和心肌梗死组相比,中药治疗后可降低外周血中IL-18、IL-1β水平（P<0.05）;（6）柴胡加龙骨牡蛎汤缓解大鼠的焦虑样行为,调节5-HT和DA蛋白表达:复合模型组大鼠进入开放臂次数和停留时间明显少于假手术组和心肌梗死组（P<0.05）,与复合模型组相比,给予中药或抑制剂的大鼠进入开放臂次数和停留时间增加（P<0.05）,复合模型组大鼠海马内焦虑相关神经递质5-HT和DA蛋白水平明显低于假手术组（P<0.05）,中药与抑制剂大鼠海马区5-HT和DA蛋白水平较复合模型组明显提高（P<0.05）。实验三:（1）柴胡加龙骨牡蛎汤抑制海马组织主要炎症蛋白表达:复合模型组、心肌梗死组、中药组大鼠海马组织中NLRP3、GSDMD、IL-1β、IL-18表达均高于假手术组（P<0.05）,与复合模型组相比,柴胡加龙骨牡蛎汤治疗组明显降低了心肌梗死合并大鼠脑部NLRP3、GSDMD、IL-1β、IL-18 的表达量（P<0.05）;（2）柴胡加龙骨牡蛎汤改善海马区神经损伤:与复合模型组及心肌梗死组相比,中药组大鼠海马区尼氏阳性面积增加（P<0.05）;（3）柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌梗死合并焦虑大鼠焦虑样行为:与假手术组相比,复合模型组大鼠OT%和OE%均明显下降（P<0.05）,复合模型组的大鼠水平运动得分和垂直运动得分均显着减少（P<0.05）,活动探索能力下降,中药组大鼠水平运动得分及垂直运动得分与复合模型组相比均有所增加（P<0.05）,活动及探索能力提高。结论:临床中采用中药治疗冠心病合并焦虑状态疗效显着且不良反应少,能够有效降低冠心病患者体内炎症因子的表达,缓解患者焦虑状态;活血化瘀法对冠心病合并焦虑抑郁患者体内Hs-CRP炎症因子的改善更具有优势。实验研究初步证明了心肌梗死合并焦虑大鼠体内骨髓及心肌梗死边缘区CXCL12/CXCR4生物轴表达失衡,CXCR4在心肌梗死急性期中表达明显上调,炎症反应亢进,心肌梗死边缘区心肌组织发生更多炎症因子浸润;而CXCR4表达亢进诱导的CXCR4/NFκB/GSDMD炎症信号通路激活,柴胡加龙骨牡蛎汤可能通过降低CXCR4的过表达,抑制CXCR4/NFκB/GSDMD炎症信号通路激活,减轻心肌组织炎症因子浸润,促进心肌梗死边缘区心肌细胞修复,改善心功能;同时,心肌梗死合并焦虑大鼠皮层及海马区相关炎症蛋白表达上调,柴胡加龙骨牡蛎汤可降低心肌梗死后皮层及海马区NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18 炎症因子表达,调节脑神经递质 5-HT、DA合成,缓解心肌梗死大鼠的焦虑样行为。
常海刚[5]（2021）在《脑深部电刺激前岛叶在药物成瘾中的治疗作用及机制研究》文中研究指明第一部分持续高频脑深部电刺激双侧前岛叶对大鼠吗啡条件性位置偏爱戒断后复发和消退的影响目的岛叶是内感受中枢,也是药物成瘾神经环路的一个关键底物。脑深部电刺激（DBS）是调节特定脑区神经元活性的一种可逆、微创伤神经外科措施,已逐渐成为难治性神经精神类疾病的一种治疗手段。最近研究表明,操控岛叶活性在治疗药物成瘾方面显示了很有希望的前景,DBS是一种很有效的神经调控技术。本实验的目的是探究持续高频DBS双侧前岛叶在吗啡成瘾动物模型的疗效。方法大鼠经过8天的药物匹配训练,建立了吗啡-条件性位置偏爱（CPP）（10mg/Kg,两天1次,共4次）,接着于双侧前岛叶植入DBS装置,术后恢复5天。在戒断阶段前14天给予持续高频电刺激（HF-DBS）（130Hz,150μA,90μs）,戒断阶段第16天、第30天和40天进行CPP测试。在消退阶段给予持续高频电刺激（130Hz,150μA,90μs）。消退阶段第5天进行CPP测试。在完全消退后,通过吗啡点燃剂量（2 mg/kg）注射恢复吗啡位置偏爱并立即行CPP测试。结果在戒断阶段第30天,持续高频DBS显着降低了吗啡-位置偏爱的表达,而停止电刺激10天后在戒断阶段第40天恢复了吗啡-位置偏爱。在吗啡CPP消退期,持续高频DBS加快促进吗啡位置偏爱完全消退并且阻止了吗啡点燃诱导的吗啡位置偏爱复发。前岛叶持续高频DBS对运动活动能力及自然奖赏没有影响,对新物体识别记忆无明显损害也不引起焦虑。结论双侧前岛叶持续高频DBS有效缓解了药物戒断15天后吗啡成瘾样行为的复发,而停止DBS后,治疗效应减弱。同时双侧前岛叶持续高频DBS促进吗啡偏爱的消退,并阻止药物点燃诱导的吗啡寻求行为的恢复。这些发现为治疗难治性药物成瘾探索新靶区和DBS作为一种有希望的潜在干预措施提供了实验证据。第二部分脑深部电刺激吗啡成瘾大鼠前岛叶的蛋白质组学分析及差异差蛋白在药物成瘾中的作用目的吗啡依赖或成瘾是一个严重的全球性公共卫生和社会问题,传统的治疗手段非常有限。脑深部电刺激（DBS）逐渐成为治疗药物成瘾最有潜力的一种新方法。鉴于使用吗啡可导致成瘾相关脑区或核团的神经适应性和蛋白质组学改变,本研究旨在对吗啡成瘾戒断后岛叶及DBS干预岛叶治疗的蛋白质组学及相关蛋白进行探索。方法在本研究中,大鼠接受吗啡条件性位置偏爱（CPP）训练,并分为吗啡组及吗啡-DBS组（双侧前岛叶植入DBS电极,恢复5天）。盐水组只接受生理盐水给药并进行CPP训练。这些大鼠戒除吗啡14天,在戒断阶段吗啡-DBS组进行了慢性持续高频电刺激。戒断停药后第15天,所有动物均进行CPP测试,并使用iTRAQ与2D-LC MS/MS结合技术对大鼠前岛叶进行蛋白质组学分析。挑选部分蛋白通过平行反应监测（PRM）进行验证。结果8天交替注射吗啡诱导了吗啡CPP表达并且慢性持续高频DBS可防止吗啡偏爱的复发。蛋白组学分析结果显示共鉴定出5575个蛋白质。与盐水组前岛叶相比,吗啡组有14个蛋白表达下调,3个蛋白上调了其表达。DBS组与吗啡组相比,有118个蛋白表达增加,87个蛋白表达减少。基于GO富集的KEGG通路分析发现,这些差异表达蛋白主要与蛋白质代谢过程、G蛋白偶联受体信号通路、钙介导信号通路、神经递质转运、多巴胺能突触、m TOR信号通路有关。结论本研究提供了与成瘾动物模型中与吗啡成瘾和高频DBS治疗相关的蛋白质组学变化的全面分析,发现了前岛叶可能与吗啡成瘾有关的分子机制中的几种蛋白质和细胞信号通路,这有助于岛叶参与药物成瘾及DBS在治疗药物成瘾方面的理解和进展。
张卓航[6]（2020）在《光控抑制A2AR的工具构建及A2AR在冲动行为中作用的初步研究》文中指出G蛋白偶联受体（G-protein coupled receptor,GPCR）是一类数量庞大的膜受体家族。在人体内GPCR发挥着重要的作用。腺苷2A受体(Adenosine 2A receptor,A2AR)是属于GPCR的A类家族成员,中枢内的大部分区域内都有A2AR的分布,尤其是在海马和纹状体等区域中高表达。在受到脑部创伤,炎症等刺激以及神经退行性疾病中会出现A2AR的表达增高,并引发相应行为的改变。这提示A2AR在中枢神经系统的相关疾病中发挥重要的作用。目前干预A2AR的方式包括使用天然或人工合成的化合物,生物大分子,基因遗传学方法或光遗传学方法等。光遗传技术在研究中枢GPCR功能方面有着高度时-空特异性的优势,通过光遗传学技术可以有效地揭示包括A2AR在内的GPCR在神经环路的作用以及与行为之间的关系。现在已有激活型和抑制型A2AR光遗传学工具的出现,但这些抑制型光遗传工具是基于化学合成的药物构建而成,其原理是配体和受体的结合,因此难以避免药物存在的受体选择特异性的问题。既往的研究显示A2AR的拮抗在很多中枢相关的疾病中发挥着神经保护效应,因此对A2AR进行有效的特异性抑制是揭示A2AR功能的重要方式,但限于当前抑制性光遗传工具的不足难以深入研究特定环路部位的A2AR在神经系统疾病中的作用。那么,我们是否可以不通过基于配体-受体相互作用的原理构建具有高度A2AR特异性的光遗传工具,并运用此工具深入研究A2AR在环路中的作用呢?冲动行为是一种在正常生理情况下会出现,但在创伤性脑损伤（Traumatic brain injury,TBI）等疾病中易发的行为学改变。出现冲动行为增加的患者容易对其生活产生重大影响。杏仁核和皮质区域是与冲动行为高度相关的脑区,两个区域的相互联系在其中发挥了重要作用。TBI之后在多个脑区中有A2AR的高表达并且已有研究表明A2AR参与了冲动行为的调节,但目前的研究没有深入揭示脑区中的A2AR在TBI后冲动行为产生中的作用及机制,尤其是在特定细胞类型上A2AR的功能差异并不十分清楚。因此,在本研究中我们拟通过运用光控抑制A2AR的工具来探究不同位置的A2AR对冲动行为的影响,以探讨A2AR在冲动行为发生中的作用及机制。研究中我们首先利用A2AR的功能性抗体的部分片段合成具有拮抗A2AR功能的肽段Anti A2AR,通过酶联免疫反应,免疫组织化学,免疫蛋白印迹和动物行为学等方法从分子,细胞,组织和整体行为层面,证明构建的Anti A2AR可以有效地在体内外进行表达并特异性地阻断A2AR的下游信号。然后在Anti A2AR的基础上通过和光敏蛋白光、氧、电压结构域相连接设计可以实现对A2AR进行高选择性和高时-空特异性抑制的工具LOV-Anti A2AR,并对其功能进行验证。最后,通过在杏仁核中表达LOV-Anti A2AR并结合行为学实验揭示了A2AR在冲动行为中的作用和机制。主要实验结果及结论:1.利用A2AR特异性抗体Fab2838的重链结构的部分氨基酸序列构建了多个Anti A2AR短肽表达载体。构建的短肽能在HEK293T细胞中成功表达并与共转染的A2AR的表达位置相重合。通过用针对不同A2AR位点的抗体免疫印迹检测该细胞发现针对A2AR 213-230氨基酸序列的抗体无法检测到A2AR的表达,而针对373-391氨基酸序列的抗体可以检测到部分A2AR的表达,并且在HEK293T细胞免疫荧光染色中同样显示Anti A2AR可以遮蔽A2AR。在相关分子信号的检测中,多肽Anti A2AR（29）可以有效地拮抗A2AR对cAMP及其下游PKA,ERK和CREB的磷酸化水平的调节,并且在激动剂CGS21680存在时也可以有效阻断cAMP的升高。随着Anti A2AR与A2AR的比例逐渐升高Anti A2AR对A2AR的拮抗效应也逐渐增加,当比例达到400:1后拮抗效应不再增加。IP1和c GMP的水平不受Anti A2AR的影响提示Anti A2AR不影响其它G蛋白下游信号的变化。在原代培养的皮质神经元中Anti A2AR的表达可以抑制细胞钙信号的上升。在体表达方面,纹状体中表达的Anti A2AR与Neu N重合而不与GFAP重合,提示Anti A2AR特异性的在纹状体的神经元中表达,并且免疫荧光染色同样显示A2AR下游PKA和CREB的磷酸化水平降低。在纹状体中表达Anti A2AR后小鼠在旷场和Home-cage的中心区域活动增加,在高架十字迷宫中开放臂的进入次数和停留时间增多,提示在纹状体中表达的Anti A2AR有效地拮抗A2AR后可以使小鼠出现焦虑缓解样表现。以上结果显示Anti A2AR可以在细胞和动物体内特异性的发挥拮抗A2AR的作用。2.在已构建的可以拮抗A2AR功能的短肽Anti A2AR的基础上,通过与LOV相连接构建了具有时-空特异性的光控拮抗A2AR工具LOV-Anti A2AR。通过对LOV的修饰构建了5个不同长度的LOV-Anti A2AR。免疫荧光显示LOV-Anti A2AR在HEK293T细胞中表达位置与A2AR相重合。在蓝光照射下5个表达体中具有177个氨基酸长度的LOV-Anti A2AR显示出最强的cAMP抑制效果,在使用激动剂CGS21680处理后该抑制效果同样显着。与对照组相比在无光照的情况下LOV-Anti A2AR对cAMP的水平没有影响,提示LOV-Anti A2AR在无光照射的条件下没有活性。不同强度蓝光刺激结果显示LOV-Anti A2AR的拮抗效应是随光强增加而上升,随后达到饱和状态。cAMP水平在光刺激后降低,光撤除后升高的时间效应曲线提示LOV-Anti A2AR的作用具有即时开-关的特性。LOV-Anti A2AR的光激活对细胞中c GMP和IP1的水平无影响。免疫印迹和免疫荧光结果显示光激活LOV-Anti A2AR可以显着降低A2AR下游PKA,ERK和CREB的磷酸化水平。在体表达LOV-Anti A2AR观察多通道电生理,光照激活LOV-Anti A2AR可以降低神经元的放电频率,不影响放电的幅度。在纹状体中注射表达LOV-Anti A2AR并用光激活,小鼠在旷场和高架十字迷宫中表现出与光照时间相符的焦虑缓解样表现。并且免疫荧光染色结果也表明LOV-Anti A2AR在脑中是神经元特异性表达并且在光照后也能抑制PKA的磷酸化。以上结果说明构建LOV-Anti A2AR可以在体内外有效地拮抗A2AR的功能,并且此种拮抗作用具有较好的时-空特异性。3.通过我们自行组装的5-选择序列反应时间训练（5-CSRTT）装置建立检测冲动行为的模型,在该装置中通过对野生型的C57小鼠进行训练及测试表明该装置能够有效地检测小鼠的冲动行为。应用该装置对闭合性TBI的检测发现其完成每个阶段所需的训练次数与sham组相比有所增多,在进行测试时与sham组小鼠相比TBI小鼠的过早反应率增加。对野生型小鼠杏仁核区域注射激动剂CGS21680后过早反应率增加,而在杏仁核表达LOV-Anti A2AR的小鼠在TBI后光照激活后过早反应率不升反而降低,提示杏仁核区域的A2AR参与了冲动行为的发生,光控抑制杏仁核中的A2AR可以减少冲动行为的发生。综上,我们的研究表明人工构建的Anti A2AR是一种可以在体内和培养细胞中有效拮抗A2AR功能的肽段;在此基础上构建的LOV-Anti A2AR除具有特异性拮抗功能外,其光控活化还具有时-空特异性,并且具有可逆性。运用构建成功的LOV-Anti A2AR初步证明杏仁核中的A2AR在TBI后冲动行为中具有重要作用,为深入探索A2AR在其中的机制奠定了基础。
黄静[7]（2020）在《拉曼光谱在胚胎质量及发育潜能评估中的应用价值》文中指出第一部分拉曼光谱在胚胎质量评估中的应用价值【目的】探讨拉曼光谱在胚胎质量评估中的应用价值。【方法】收集在解放军联勤保障部队第901医院生殖中心行卵胞浆内单精子注射术（ICSI）16例患者受精后第3天（D 3）的胚胎培养液共122份,采用传统的形态学评分方法对D3胚胎进行评估,将其分为优质胚胎组（66份）与非优质胚胎组（56份）,利用拉曼光谱法结合传统的化学计量学方法[主成分分析principal component analysis,（PCA）]分别对两组培养液进行分析,结合机器学习算法[卷积神经网络模型Convolutional Neural Network,（CNN）]对所获得的拉曼数据进行模型构建及结果预测。【结果】优质胚胎组和非优质胚胎组的拉曼光谱在第一维主成分（principal component 1,PC1）有显着性差异（P<0.05）,在第二维主成分（principal component2,PC2）和第三维主成分（principal component 3,PC3）均无显着性差异。CNN算法构建模型及预测结果显示,拉曼光谱预测优质胚胎的特异性为71.21%,敏感性为73.21%,准确性为72.13%。【结论】优质胚胎与非优质胚胎其拉曼光谱显着不同,采用拉曼光谱结合PCA分析及CNN算法,可以区分优质胚胎与非优质胚胎,对胚胎质量评估有一定的参考价值。第二部分拉曼光谱在预测胚胎发育潜能中的应用【目的】探讨拉曼光谱在预测优质胚胎发育潜能的应用价值。【方法】收集在解放军联勤保障部队第901医院生殖中心行卵胞浆内单精子注射术（ICSI）12例患者D3优质卵裂胚的胚胎培养液共111份,其对应的胚胎行囊胚培养,观察其D5及D6囊胚形成情况,根据有无囊胚形成,将D3优质卵裂胚的胚胎培养液分为两组:囊胚组（57份）及未成囊组（54份）,利用拉曼光谱法结合传统的化学计量学方法[主成分分析principal component analysis,（PCA）]对两组培养液进行分析,结合先进的机器学习算法([卷积神经网络模型Convolutional Neural Network,（CNN）]对所获得的拉曼数据进行模型构建及结果预测。【结果】囊胚组与未成囊组的拉曼光谱在第一维主成分（principal component 1,PC1）和第二维主成分（principal component 2,PC2）有显着性差异（P<0.05）,两组间在第三维主成分（principal component 3,PC3）均无显着性差异。CNN算法构建模型及预测结果显示,拉曼光谱预测囊胚形成的特异性为75.44%,敏感性为74.07%,准确性为74.77%。【结论】囊胚组与未成囊组D3优质胚胎培养液的拉曼光谱显着不同,采用拉曼光谱结合PCA分析及CNN算法,可以预测优质卵裂胚的发育潜能。
张玉林[8]（2020）在《人羊膜上皮细胞修复大鼠卵巢功能不全的实验研究》文中认为每年全球范围内有多达百万女性罹患癌症,其中大约10%的女性患者在育龄期。化学治疗的应用使癌症患者的生存率明显提高,约90%年轻的早期癌症患者在治疗后可以存活,但是化学治疗引起的远期并发症的风险却不可忽视。其中,最突出的远期影响包括因为化学治疗所引起的原发性卵巢功能不全（primary ovarian insufficiency,POI）或卵巢早衰（premature ovarian failure,POF）所致的早绝经和不育,极大地影响育龄期患者的生存质量。因此,在不妨碍癌症治疗的原则上,提高此类患者的生存质量、保护卵巢功能和生育力已经成为临床上医生与患者共同面临的难题。基础实验及临床病例表明,在杀灭癌症细胞的同时,许多化学治疗药物可以不同程度地损伤卵巢功能、使卵巢结构紊乱、卵巢纤维化明显、影响卵泡的启动、生长发育及成熟过程,但其具体机制仍不十分清楚。目前,临床上预防或者治疗化疗相关卵巢功能不全主要的方法有:促性腺激素释放激素类似物治疗、性激素替代治疗及生育力冷冻保存技术。促性腺激素释放激素类似物治疗预防化疗引起的卵巢功能不全目前只在乳腺癌中观察到有一定效果;性激素替代治疗只能改善患者的围绝经期症状,不能改善卵巢功能及生育能力;而生育力冷冻保存技术受到患者年龄、身体状态及婚姻状态等的制约,因此每种方法都有其局限性,尚不能广泛应用于临床。随着再生医学的兴起及发展,干细胞已经在多种疾病中证实有组织修复及组织再生的作用。目前,多个研究表明,干细胞移植在改善卵巢功能、修复卵巢组织结构及促进生育力方面具有一定的作用,但其机制仍不清楚。近年来,人羊膜上皮细胞（human amniotic epithelial cells,h AECs）的发现及研究为再生医学领域指引了新的研究方向。由于羊膜为医疗废物、来源丰富、获取简单、无道德伦理的制约,且h AECs具有一定干细胞特性、免疫原性低且未发现致瘤性,因此h AECs在再生医学领域具有广阔的应用前景,有望成为修复化疗所致卵巢功能不全的新方法。据报道,h AECs可以分泌多种细胞因子,这些细胞因子可能参与增殖、免疫调节、细胞凋亡和血管生成过程,并可以通过静脉移植、原位注射或腹腔注射h AECs或h AECs条件培养基改善卵巢功能,但其具体机制仍不十分清楚。第一部分 hAECs的原代细胞提取及生物学特性目的提取h AECs并培养、鉴定,为后续实验提供细胞移植的种子细胞。方法征得孕妇及家属同意并书面签署知情同意书后,收集经剖腹产分娩的羊膜组织,采用胰酶消化法获取h AECs;通过观察细胞形态,流式细胞术检测细胞表面标志物的表达,对分离培养的h AECs进行鉴定;通过细胞免疫荧光检测h AECs表达卵泡刺激素受体（Follicle-stimulating hormone receptor,FSHR）的情况。结果分离纯化的h AECs呈铺路石样,细胞大小及形态均一,呈圆形或多角形,并呈集落样生长;4代后细胞渐呈梭形,细胞增殖减慢;h AECs高表达干细胞标志物（SSEA4,Nanog）、上皮细胞标志物（CD324,CD326）;而低表达间充质细胞标志物（CD105）、造血干细胞标志物（CD34、CD45）和免疫学标志物（HLA-DR）;h AECs可以表达颗粒细胞的标志物FSHR。结论h AECs来源丰富,具有干细胞及上皮细胞特性,低免疫原性,无成瘤性,在干细胞治疗领域中具有广阔的应用前景。第二部分 环磷酰胺诱导大鼠卵巢损伤模型的建立目的建立稳定的环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的动物模型。方法将8-10周龄有规律动情周期的SD大鼠随机分为4组（环磷酰胺注射第1天记为D1）:对照组（D1-D15 0.9%生理盐水）;低剂量环磷酰胺损伤组（D1 50mg/kg,D2-D15 8mg/kg）;中剂量环磷酰胺损伤组（D1 100mg/kg,D2-D15 8mg/kg）;高剂量环磷酰胺损伤组（D1200mg/kg,D2-D15 8mg/kg）。（1）观察大鼠一般状态,称量体重及卵巢重量,绘制大鼠的生存曲线;（2）检测大鼠的动情周期改变,分析环磷酰胺对大鼠卵巢的毒性作用;（3）化学发光法检测化疗结束后3天及2周的血清雌激素E2水平,了解环磷酰胺对大鼠内分泌功能的作用;（4）Elisa检测化疗结束后2周的血清AMH及FSH水平,了解环磷酰胺对大鼠内分泌功能的作用;（5）HE染色观察大鼠卵巢组织学改变及卵泡计数,评估环磷酰胺对卵巢组织学的损伤情况及对卵泡的作用。结果（1）低剂量环磷酰胺组大鼠体重及卵巢重量降低,死亡率低,中、高剂量环磷酰胺组大鼠死亡率高,故选用低剂量环磷酰胺构造卵巢功能不全的模型;（2）模型组大鼠的血清雌激素E2水平较对照组在化疗结束后3天有所下降,在化疗结束后2周明显下降;（3）模型组大鼠的血清AMH较对照组在化疗结束后2周明显下降,而FSH水平较对照组在化疗结束后2周明显上升;（4）模型组及对照组大鼠在化疗开始前均有规律的动情周期,化疗开始后1周,模型组约54%的大鼠出现异常的动情周期,化疗结束后1周模型组仍有46%的大鼠表现为异常的动情周期,而此过程对照组大鼠均有正常的动情周期;（5）环磷酰胺给药后卵巢组织损伤明显,卵巢纤维化明显,模型组较对照组窦前卵泡、窦卵泡明显减少,而闭锁卵泡显着增加。结论低剂量环磷酰胺经腹腔注射（D1 50mg/kg,D2-D15 8mg/kg）,可以建立稳定的环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的模型。第三部分 hAECs修复大鼠卵巢卵巢功能不全的有效性研究目的探究h AECs修复环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的有效性及对生育力的影响,并初步探究h AECs治疗的机制。方法选用PHK26荧光染料成功标记第1代h AECs,用于h AECs移植的体内追踪。将8-10周龄的SD大鼠纳入实验,将大鼠随机分为4组,以第1次腹腔注射环磷酰胺或生理盐水记为第1天（D1）。对照组（D1-15腹腔注射0.9%生理盐水,D16尾静脉注射PBS,双卵巢原位注射PBS）;模型组（D1-15腹腔注射环磷酰胺,D16尾静脉注射PBS,双卵巢原位注射PBS）;h AECs经尾静脉移植组（D1-15腹腔注射环磷酰胺,D16尾静脉注射h AECs,双卵巢原位注射PBS）;h AECs经卵巢原位移植组（D1-15腹腔注射环磷酰胺,D16尾静脉注射PBS,双卵巢原位注射h AECs）。（1）实验中观察大鼠一般状态,称取大鼠体重及卵巢重量;（2）卵巢组织冰冻切片后观察细胞移植后24小时及2周后PKH26标记的h AECs在卵巢中的存活与分布情况;（3）Elisa检测血清中AMH及FSH水平,分析h AECs移植对大鼠内分泌功能的影响;（4）阴道涂片检测大鼠动情周期改变,了解h AECs移植对下丘脑-垂体-性腺轴的完整性的作用;（5）HE染色观察卵巢组织学改变及卵泡计数,评估h AECs修复大鼠卵巢组织结构的效果;（6）免疫组化检测AMH、FSHR及Klotho蛋白在卵巢的分布及表达情况,初步探究h AECs移植修复卵巢损伤可能的机制;（7）大鼠合笼实验探究并记录大鼠胚胎的数量,评估h AECs移植对大鼠生育力的作用。结果（1）PKH26标记的h AECs可以向损伤的卵巢迁移,在细胞移植后24小时、2周均可以观察到红色荧光,移植的h AECs主要分布于卵巢间质区;（2）h AECs移植后可以在一定程度上提高损伤大鼠的体重及卵巢重量;（3）与模型组相比,h AECs移植可以升高损伤大鼠血清AMH水平,并降低血清FSH水平,改善卵巢功能不全大鼠的内分泌功能;（4）h AECs移植可降低损伤大鼠的异常动情周期,降低环磷酰胺所致的卵巢毒性作用;（5）h AECs移植使窦前卵泡、窦卵泡数量增加,闭锁卵泡数量减少,对卵巢组织有修复作用;（6）与模型组相比,h AECs移植可使卵巢组织AMH、FSHR及Klotho蛋白的表达水平上调;（7）h AECs尾静脉移植组、h AECs原位注射组及模型组大鼠的胚胎数量较对照组显着减少,尾静脉移植细胞组大鼠合笼后胚胎数较模型组明显增加,原位注射细胞组大鼠的胚胎数量较模型组略有增加。结论h AECs移植可以修复损伤的卵巢功能和结构,增加窦前及窦卵泡的数量,减少闭锁卵泡的数量;h AECs静脉移植可以显着改善受损大鼠的生育力功能;h AECs移植可以使卵巢组织AMH、FSHR及Klotho蛋白的表达水平上调,可能与抑制原始卵泡过度激活、促进生长卵泡发育、成熟及调节颗粒细胞的功能有关。第四部分 hAECs修复大鼠卵巢功能不全的机制研究目的h AECs修复大鼠卵巢功能不全的可能机制,希望为化疗引起的卵巢损伤的治疗提供相关理论基础,为临床上修复损伤的卵巢功能提供新的思路和策略。方法在已经证实h AECs在修复环磷酰胺所致大鼠卵巢损伤的可行性后,本实验选用RNA SEQ进行三组卵巢组织的测序,每组含3例卵巢组织。三组分别为h AECs尾静脉移植组、h AECs原位注射组及模型组,在h AECs移植后2周取卵巢组织进行测序及进一步验证。（1）卵巢组织的总RNA提取、逆转录、合成双链c DNA、扩增及测序,生物信息学分析h AECs治疗组与模型组的差异表达基因（differentially expressed genes,DEGs）,对差异表达基因的GO（Gene Ontology）及KEGG（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes）分析,了解差异基因的功能及可能涉及的通路;（2）RT-q PCR验证部分差异表达基因,进一步明确差异基因的表达水平;（3）免疫组化及Western Blot验证显着富集的类固醇激素合成通路的蛋白表达水平,从基因及蛋白表达水平探究h AECs治疗的潜在机制。结果（1）m RNA测序发现h AECs尾静脉移植组和模型组共有783个表达差异的基因,其中有619个上调的差异基因及164个下调的差异基因。而原位注射h AECs组与模型组之间有168个差异表达基因,其中116个上调的差异基因和52个下调的差异基因;（2）GO分析显示,h AECs尾静脉移植组与模型组的DEGs主要富集于离子通道活性和跨膜转运蛋白活性,而原位注射h AECs组与模型组的DEGs显着富集类固醇激素生物合成过程和类固醇激素代谢过程。KEGG分析显示,h AECs尾静脉移植组与模型组的DEGs在核糖体、蛋白消化和吸收通路、神经活动配体-受体相互作用通路及c AMP信号通路显着富集;而原位注射h AECs组与模型组的DEGs主要参与类固醇激素生物合成通路;（3）绘制维恩图发现尾静脉注射细胞组与原位注射细胞组相对于模型组共同差异表达的基因共有4个,包括2个上调和2个下调的基因。在进一步的q PCR验证中,2个上调差异基因IRF7（regulatory factor 7）与Mx1（Mx dynamin-like GTPase 1）表达与测序结果一致,即IRF7与Mx1在尾静脉注射细胞组与原位注射细胞组的表达均显着增加,相对于模型组卵巢组织的表达。而另两个下调差异基因MFAP31（microfibril-associated glycoprotein 3-like）及CITED2（c AMP-responsive element-binding protein（CREBBP）/p300-interactingtrans-activator 2 with glutamic acid（E）and aspartic acid（D）-rich tai）在q PCR的验证中,三组无显着差异;（4）KEGG分析显示原位注射组与模型组间DEGs主要富集于类固醇激素生物合成通路,进一步q PCR发现,Msmo1、SQLE、NSDH1、FDFT1、TM7SF2在原位注射组显着上调,而其他三个基因DHCR24,CYP51,HSD17B7仍然高于模型组,这与测序结果比较一致;m RNA测序结果显示,与模型组相比,原位注射h AECs组中与合成雌激素和黄体酮的关键酶如Star、Cyp11a1、Cyp19a1和Hsd17b1的表达值（FPKM值）也升高。此外,我们还观察分析了3组中血管内皮生长因子受体1（Vascular endothelial growth factor receptor 1,VEGFR1）、VEGFR2和VEGFR3的表达。VEGFR1（原位注射h AECs组）和VEGFR2（静脉移植h AECs组）的表达分别较模型组显着升高（P<0.05）,而VEGFR3在3组间无差异;（5）免疫组化和western blotting分析发现,原位注射细胞组与模型组之间DEGs显着富集的类固醇激素生物合成通路的其中2个酶角鲨烯单加氧酶（Squalene monooxygenase,SQLE）和法尼基二磷酸法尼基转移酶1（Farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1,FDFT1）主要在卵巢黄体组织的颗粒细胞中表达,原位注射组的表达较模型组显着升高（P<0.01）。结论h AECs移植可能通过上调AMH表达,减少原始卵泡的过度激活;增加FSHR及KL蛋白表达,维持生长卵泡的发育及促进卵泡成熟;高通量测序结果显示h AECs移植对核糖体、蛋白消化、蛋白吸收、神经活性配体-受体相互作用、c AMP信号通路、甾体生物合成通路等均有影响,促进类固醇激素合成、卵泡发育和排卵;此外,h AECs移植还可通过上调促血管及抗炎因子IRF7、Mx1、VEGFR1及VEGFR2,促进血管生成,减少炎症等发挥修复作用。
教育部[9]（2020）在《教育部关于印发普通高中课程方案和语文等学科课程标准（2017年版2020年修订）的通知》文中研究表明教材[2020]3号各省、自治区、直辖市教育厅（教委）,新疆生产建设兵团教育局:为深入贯彻党的十九届四中全会精神和全国教育大会精神,落实立德树人根本任务,完善中小学课程体系,我部组织对普通高中课程方案和语文等学科课程标准（2017年版）进行了修订。普通高中课程方案以及思想政治、语文、
焦智慧[10]（2020）在《ADSC-CM对小型猪腹腔镜肝IRI合并部分肝切除保护作用的研究》文中指出肝脏是哺乳动物最大的实质器官,具有加工储存营养物质、代谢药物毒物、分泌胆汁、合成蛋白质等重要功能。肝脏缺血再灌注损伤是外科手术中常见的一种临床综合征,20世纪90年代出现了腹腔镜的肝切除术,腹腔镜手术可以最大程度的减少腹壁神经和肌肉的损伤,减少出血、术后疼痛和粘连,加快手术恢复。尽管采用微创外科手术,在肝切除、肝移植、出血性休克等临床手术中仍不可避免的出现肝脏缺血再灌注损伤,严重会导致肝炎以及术后肝功能的衰竭。对于晚期肝功能不全的有效治疗办法是原位肝移植,但也面临着器官短缺,费用昂贵、免疫排斥和移植并发症等问题,因此,寻找能够减轻肝脏缺血再灌注损伤以及提高肝脏再生能力的安全有效的治疗办法是目前肝脏外科亟待解决的问题之一。脂肪间充质干细胞（ADSCs）能够自我更新、具有多向分化能力、来源丰富、取材损伤小,是目前细胞疗法理想的种子细胞。ADSCs主要依靠分化和旁分泌发挥作用,旁分泌指干细胞释放的多种生物因子在微环境里通过细胞基质在局部以及临近组织对靶细胞发挥的生物学作用。随着对旁分泌机制的深入研究,发现ADSCs分泌的多种细胞因子具有促进血管生成,抑制炎症反应,调节免疫应答,修复组织再生等多种生物学功能。ADSCs在体外培养的过程中,会将细胞因子等生物活性物质分泌到培养液中,这种含有细胞分泌物的培养液为脂肪间充质干细胞的条件培养液（ADSC-CM）。尽管ADSCs在临床上对许多疾病有治疗效果,但ADSCs具有免疫原性,对植入ADSCs的不可控分化仍是重要的安全隐患。因此,使用ADSC-CM的无细胞疗法成为绕过细胞疗法局限性的一种再生医学治疗方法。目前有关肝脏缺血再灌注损伤的动物模型以啮齿类动物为主,而从比较医学角度,小型猪与人的同源性好,体积大小以及器官大小与人更为接近,因此也作为研究缺血再灌注损伤理想的实验动物,所获得的研究数据更有价值,易于临床转化。而ADSC-CM在大型实验动物的研究较少,特别是肝脏领域尚未见报道,所以本研究旨在通过建立小型猪肝脏缺血再灌注合并部分切除模型,探究ADSC-CM治疗肝脏缺血再灌注合并部分切除损伤的疗效,为比较医学开展肝病治疗,拓宽ADSC-CM移植领域提供研究依据。本研究使用30头小型猪,其中6头用于脂肪组织的获取。采用胶原酶消化法分离培养ADSCs,使用诱导培养基和特定染色鉴定ADSCs成脂、成骨、成肝分化能力,应用细胞流式鉴定ADSCs表面特异性抗原。ADSCs饥饿培养48 h获得ADSC-CM,经3 kda超滤管离心浓缩ADSC-CM用于后续实验。另外24头小型猪随机分为四组:模型组（IRI）,DMEM对照组（DMEM）,脂肪间充质干细胞组（ADSCs）,脂肪间充质干细胞条件培养基组（CM）,每组6头。四组实验动物均通过腹腔镜手术建立肝脏缺血再灌注合并部分肝切除模型,IRI组通过肝实质注射生理盐水,DMEM组注射基础培养基,ADSCs组注射脂肪间充质干细胞,数量为1×106/kg,CM组按照1×106/kg细胞数提取等量干细胞分泌的条件培养液,注射浓缩的ADSC-CM进行干预。分别在术前、术后1 d、3 d、7 d采集血液样本及肝组织样本用于相关指标的检测。通过HE染色观察病理组织学变化,透射电镜观察超微结构的变化,血常规检测外周血的炎性细胞变化,试剂盒检测抗氧化酶以及细胞凋亡酶活性,TUNEL染色检测凋亡细胞的阳性率,ELISA法检测血清中炎症相关因子、再生相关因子以及ADSC-CM成分,q RT-PCR法检测炎症、凋亡以及再生相关基因水平变化,Western Blot法检测肝组织中凋亡以及再生相关蛋白水平的变化,免疫组化染色检测凋亡相关蛋白以及再生相关蛋白水平的变化。本研究结果如下:（1）病理组织学与超微结构变化:术后各组肝小叶结构被破坏,肝索排列紊乱,肝细胞空泡变性明显,炎性细胞浸润,相比于IRI组和DMEM组,ADSCs或ADSC-CM干预明显减少空泡变性和炎性细胞浸润;术后IRI组和DMEM组肝细胞内质网严重扩张,细胞核膜皱缩,染色质边集化,ADSCs或ADSC-CM干预改善了内质网扩张及肝细胞核膜皱缩的程度。（2）肝脏功能变化:术后各组ALT、AST、LDH、ALP和T-BIL均升高,TP呈降低趋势,相比于IRI组和DMEM组,ADSCs或ADSC-CM干预明显降低了ALT、AST、LDH、ALP和T-BIL的升高程度,缓解了TP的降低程度,促进肝脏功能的恢复。（3）氧化应激指标变化:术后各组肝组织抗氧化酶CAT、GSH-Px和SOD活性显着降低,MPO酶活性和MDA含量显着升高,相比于IRI组和DMEM组,ADSCs或ADSC-CM干预显着增强了抗氧化酶的活性,降低MPO酶活性,并能减少氧化产物MDA的水平,从而减少术后的氧化应激反应,且两个干预组的上述氧化应激指标均无显着性差异。（4）炎症指标变化:术后外周血中炎性细胞WBC、NE、LY含量迅速升高,ADSCs或ADSC-CM干预减少了外周血中的炎性细胞的数量;IRI组和DMEM组血清中的炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10含量呈升高趋势,ADSCs或ADSC-CM干预降低促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的水平,同时增强抑炎因子IL-10的表达;肝组织中炎症因子基因水平的表达与血清结果一致,ADSCs和ADSC-CM通过抑制促炎因子的过度释放以及增强抑炎因子的表达显着改善了术后的炎症反应,且两个干预组之间没有显着性差异。（5）凋亡指标变化:术后各组P53、Bax、Fas、Fasl基因和蛋白水平均显着升高,Bcl-2表达水平降低,相比于IRI组和DMEM组,ADSCs或ADSC-CM干预抑制了凋亡相关指标P53、Bax,、Fas、Fasl的表达,提高抗凋亡Bcl-2的表达水平;ADSCs组和CM组显着降低TUNEL阳性细胞率及Caspase酶活性,减少术后肝细胞凋亡,且两组之间没有显着性差异。（6）再生指标变化:相比于IRI组和DMEM组,ADSCs或ADSC-CM干预显着提高血清中血管生成相关因子VEGF、ANG-1、ANG-2的表达,增强组织中肝脏再生相关基因HGF、Cyclin D1的表达,抑制肝再生终止基因TGF-β的表达,提高Ki67的阳性细胞数及细胞增殖PCNA蛋白的表达,且ADSCs组和CM组之间没有显着性差异。（7）ADSC-CM成分检测:通过ELISA法检测到小型猪ADSC-CM中含有促进血管生成的VEGF、ANG-1、ANG-2、b-FGF,调节炎症反应与肝脏再生的TNF-α、IL-1β、IL-6。综上所述,经肝实质移植ADSCs和ADSC-CM均能够改善肝脏缺血再灌注合并部分肝切除的病理组织学损伤及超微结构变化,减轻过度炎症反应及氧化应激反应,减少细胞凋亡,促进肝脏再生。本试验成功应用ADSCs和ADSC-CM干预肝脏缺血再灌注合并部分切除后的肝损伤,证明ADSCs和ADSC-CM抗氧化、抗炎、抗凋亡和促进肝再生的作用,且二者干预效果无显着差异,推测ADSCs发挥作用的机制很可能是通过分泌细胞因子的旁分泌途径。
二、摄像辅助医疗注射（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、摄像辅助医疗注射（论文提纲范文）
（1）基于高速摄像的栓塞胶同轴输注技术离体研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景及意义 |
| 1.2 血管介入栓塞注射技术研究现状 |
| 1.2.1 注射过程的注射动力学研究 |
| 1.2.2 栓塞胶聚合反应的研究 |
| 1.2.3 高速摄像技术在栓塞胶同轴注射过程研究中的应用 |
| 1.3 本文主要研究内容与创新点 |
| 1.4 本文组织结构 |
| 2 栓塞胶同轴注射离体实验装置的设计与搭建 |
| 2.1 同轴注射离体实验装置设计 |
| 2.2 离体实验装置的搭建与参数设置 |
| 2.3 实验试剂的选择与制备 |
| 2.3.1 忽略栓塞胶聚合反应预实验的两不相溶试剂选择 |
| 2.3.2 栓塞胶-碘油混合物的选择与制备 |
| 2.3.3 血液模拟液的选择与制备 |
| 2.4 实验步骤及数据分析 |
| 2.4.1 不相溶液体同轴注射过程的实验步骤与数据分析 |
| 2.4.2 栓塞胶注射过程的实验步骤与数据分析 |
| 2.5 本章小结 |
| 3 栓塞胶浓度及注射速率影响栓塞胶注射过程研究 |
| 3.1 离散相注射速率对同轴注射过程液滴生成的影响 |
| 3.1.1 离散相注射速率对生成液滴的形态影响 |
| 3.1.2 离散相注射速率对生成液滴的时间影响 |
| 3.1.3 离散相注射速率对生成液滴的尺寸影响 |
| 3.1.4 讨论 |
| 3.2 栓塞胶注射速率对栓塞胶注射过程的影响 |
| 3.2.1 栓塞胶注射速率对生成胶滴的形态影响 |
| 3.2.2 栓塞胶注射速率对生成胶滴的时间影响 |
| 3.2.3 栓塞胶注射速率对生成胶滴的尺寸影响 |
| 3.2.4 讨论 |
| 3.3 栓塞胶浓度对栓塞胶注射过程的影响 |
| 3.3.1 栓塞胶浓度对生成胶滴的形态影响 |
| 3.3.2 栓塞胶浓度对生成胶滴的时间影响 |
| 3.3.3 栓塞胶浓度对生成胶滴的尺寸影响 |
| 3.3.4 讨论 |
| 3.4 本章小结 |
| 4 血液模拟液成分及流动速率影响栓塞胶注射过程研究 |
| 4.1 血液模拟液流动速率对栓塞胶注射过程的影响 |
| 4.1.1 血液模拟液流动速率对生成胶滴的形态影响 |
| 4.1.2 血液模拟液流动速率对生成胶滴的时间影响 |
| 4.1.3 血液模拟液流动速率对生成胶滴的尺寸影响 |
| 4.1.4 讨论 |
| 4.2 血液模拟液成分对栓塞胶注射过程的影响 |
| 4.2.1 血液模拟液成分对生成胶滴的形态影响 |
| 4.2.2 血液模拟液成分对生成胶滴的时间影响 |
| 4.2.3 血液模拟液成分对生成胶滴的尺寸影响 |
| 4.2.4 讨论 |
| 4.3 本章小结 |
| 总结与展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（2）西安地区现代综合医院核医学科建筑设计研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 1 绪论 |
| 1.1 研究背景 |
| 1.1.1 人类相关疾病发病率的增加 |
| 1.1.2 医学影像的发展 |
| 1.1.3 核医学科简介 |
| 1.1.4 所属研究课题 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.2.1 核医学科国外研究现状 |
| 1.2.2 核医学科国内研究现状 |
| 1.3 研究内容 |
| 1.3.1 相关概念的界定 |
| 1.3.2 研究内容 |
| 1.4 研究目的及意义 |
| 1.5 研究方法及框架 |
| 1.5.1 研究方法 |
| 1.5.2 研究框架 |
| 1.6 本章小结 |
| 2 核医学科概述 |
| 2.1 影像核医学 |
| 2.1.1 核医学 |
| 2.1.2 影像核医学的概述 |
| 2.2 核医学科 |
| 2.2.1 核医学科的主要设备 |
| 2.2.2 核医学科的主要业务 |
| 2.2.3 核医学科检查相关流程简介 |
| 2.3 核医学科设置条件和设备配置条件 |
| 2.3.1 医疗机构设置条件 |
| 2.3.2 核医学科设备配置条件 |
| 2.4 本章小结 |
| 3 西安地区核医学科案例调研 |
| 3.1 西安地区现代综合医院及核医学科调研现状 |
| 3.1.1 西安地区现代综合医院现状 |
| 3.1.2 核医学科现状 |
| 3.1.3 调研案例分析选取 |
| 3.2 西安长安医院 |
| 3.2.1 概况 |
| 3.2.2 功能分区和房间组成 |
| 3.2.3 流线分析 |
| 3.2.4 人性化设计 |
| 3.2.5 总结 |
| 3.3 西安高新医院 |
| 3.3.1 概况 |
| 3.3.2 功能分区和房间组成 |
| 3.3.3 流线分析 |
| 3.3.4 人性化设计 |
| 3.3.5 总结 |
| 3.4 西安国际医学中心 |
| 3.4.1 概况 |
| 3.4.2 功能分区和房间组成 |
| 3.4.3 流线分析 |
| 3.4.4 人性化设计 |
| 3.4.5 总结 |
| 3.5 调研分析总结 |
| 3.5.1 改扩建核医学科 |
| 3.5.2 新建核医学科 |
| 3.6 本章小结 |
| 4 综合医院核医学科建筑空间设计研究 |
| 4.1 核医学科的场所选址 |
| 4.1.1 场所要求 |
| 4.1.2 与其他科室关系 |
| 4.2 核医学科的布局方式 |
| 4.2.1 分散式 |
| 4.2.2 集中式 |
| 4.2.3 独立式 |
| 4.2.4 附属式 |
| 4.2.5 地上式 |
| 4.2.6 地下式 |
| 4.3 核医学科的规模要求 |
| 4.4 核医学科的主要功能房间组成 |
| 4.4.1 SPECT-CT机房 |
| 4.4.2 PET-CT机房 |
| 4.4.3 PET-MRI机房 |
| 4.4.4 回旋加速器核药物制备区 |
| 4.4.5 核素病房 |
| 4.4.6 其他功能房间 |
| 4.5 核医学科的流线组织 |
| 4.5.1 流线设计 |
| 4.5.2 常见空间组合方式 |
| 4.6 核医学科的人性化设计 |
| 4.6.1 功能空间人性化设计 |
| 4.6.2 无障碍人性化设计 |
| 4.6.3 病房人性化设计 |
| 4.7 本章小结 |
| 5 核医学科相关专业设计研究 |
| 5.1 核医学科的辐射防护设计 |
| 5.1.1 辐射防护材料的选择 |
| 5.1.2 常用防护器材 |
| 5.1.3 辐射防护施工工艺 |
| 5.2 核医学科的空调通风设计 |
| 5.2.1 空调系统设计 |
| 5.2.2 通风系统设计 |
| 5.2.3 控制系统设计 |
| 5.3 核医学科的排水设计 |
| 5.3.1 排水设计 |
| 5.3.2 衰变池设计 |
| 5.4 核医学科的电气设计 |
| 5.5 本章小结 |
| 6 结论与展望 |
| 6.1 结论 |
| 6.1.1 研究成果 |
| 6.1.2 西安地区核医学科发展趋势 |
| 6.1.3 西安地区核医学科优化策略 |
| 6.2 展望 |
| 6.2.1 AI技术对未来医学影像的影响 |
| 6.2.2 5G时代对未来医学影像的影响 |
| 参考文献 |
| 附录一 核医学科设备配置条件 |
| 附录二 核医学科空间调研表及调查问卷 |
| 附录三 图表目录 |
| 附录四 攻读硕士学位期间研究成果 |
| 致谢 |
（3）维生素D对骨结核微环境中破骨细胞生成的影响及其机制研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 1,25(OH)_2D_3抑制破骨细胞的分化与功能 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 结论 |
| 第三章 1,25(OH)_2D_3抑制骨结核导致的破骨细胞异常激活 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 结论 |
| 第四章 1,25(OH)_2D_3通过VDR抑制IκBα/NFκB信号通路抑制破骨细胞异常激活 |
| 4.1 材料与方法 |
| 4.2 结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 结论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 维生素D对结核中免疫微环境的影响 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间发表的论文 |
| 致谢 |
（4）从CXCR4/NF-κB/GSDMD探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略词 |
| 综述一 心肌梗死合并焦虑与CXC趋化因子的相关性研究 |
| 1 心肌梗死合并焦虑流行病学 |
| 2 CXC趋化因子在心肌梗死中的表达及作用 |
| 2.1 趋化因子结构、表达及作用 |
| 2.2 趋化因子受体结构、表达及作用 |
| 2.3 CXC趋化因子在心肌梗死中的表达及作用 |
| 3 CXCL12/CXCR4生物轴介导心肌梗死后炎症 |
| 3.1 CXCL12结构、表达及作用 |
| 3.2 CXCR4结构、表达及作用 |
| 3.3 CXCL12/CXCR4在心肌梗死中的表达及作用 |
| 4 炎症机制与心肌梗死合并焦虑疾病 |
| 5 心肌梗死合并焦虑的临床治疗 |
| 6 小结 |
| 参考文献 |
| 综述二 柴胡加龙骨牡蛎汤古方今用及药理机制研究 |
| 1 柴胡加龙骨牡蛎汤方证分析 |
| 2 柴胡加龙骨牡蛎汤近现代应用 |
| 3 柴胡加龙骨牡蛎汤单药及复方现代药理研究 |
| 4 柴胡加龙骨牡蛎汤的效用机制研究 |
| 5 小结 |
| 参考文献 |
| 研究一 药物治疗对冠心病伴焦虑状态患者炎症因子影响的Meta分析 |
| 前言 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 文献检索 |
| 1.2 纳入标准 |
| 1.3 排除标准 |
| 1.4 诊断标准 |
| 1.5 资料提取 |
| 1.6 统计分析 |
| 2 纳入研究质量评价及基本特征 |
| 2.1 文献检索结果 |
| 2.2 纳入文献研究质量评价 |
| 2.3 纳入研究的基本信息情况 |
| 3 Meta分析结果 |
| 3.1 外周血中Hs-CRP因子表达 |
| 3.2 外周血中IL-6因子表达 |
| 3.3 外周血中IL-8因子表达 |
| 3.4 外周血中IL-17因子表达 |
| 3.5 外周血中TNF-α因子表达 |
| 3.6 纳入研究中不同组别HAMA量表评分情况 |
| 3.7 纳入研究中不同组别HAMD量表评分情况 |
| 3.8 纳入研究中不同组别SDS量表评分情况 |
| 3.9 各项研究发表偏倚风险评价情况 |
| 3.10 各项研究不良反应发生情况 |
| 4 纳入研究证据质量评价 |
| 5 结论 |
| 5.1 主要研究结论 |
| 5.2 本研究的不足 |
| 5.3 研究的临床意义及展望 |
| 参考文献 |
| 研究二 柴胡加龙骨牡蛎汤调控CXCR4/NF-KB/GSDMD炎症通路抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究 |
| 实验一: 慢性不可预知性空瓶刺激对心肌梗死大鼠CXCL12/CXCR4生物轴的影响 |
| 前言 |
| 1 材料、设备及方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验耗材 |
| 1.3 模型制备 |
| 1.4 分组 |
| 1.5 检测手段及方法 |
| 2 统计学方法 |
| 3 实验结果 |
| 3.1 心肌梗死大鼠心电图出现异常Q波 |
| 3.2 慢性应激刺激下心肌梗死大鼠产生焦虑样行为改变 |
| 3.3 慢性应激刺激下心肌梗死大鼠骨髓中CXCL12的含量下降 |
| 3.4 慢性应激刺激下心肌梗死大鼠CXCR4表达亢进 |
| 3.5 CXCL12/CXCR4生物轴失衡加重炎症反应 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验二: 柴胡加龙骨牡蛎汤调控CXCR4/NF-κB/GSDMD炎症通路抑制心肌梗死合并焦虑炎症机制 |
| 前言 |
| 1 材料、设备及方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验耗材 |
| 1.3 模型制备 |
| 1.4 给药方式及分组 |
| 1.5 检测手段及方法 |
| 2 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制CXCR4/NF-κB/GSDMD通路炎症反应 |
| 3.2 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制纤维化,改善心脏功能 |
| 3.3 柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌细胞的损伤 |
| 3.4 柴胡加龙骨牡蛎汤降低外周血中IL-1β、IL-18的表达水平 |
| 3.5 柴胡加龙骨牡蛎汤调节海马区5-HT、DA合成,缓解焦虑 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 实验三: 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠皮层及海马炎症部分机制 |
| 前言 |
| 1 材料、设备及方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 主要实验耗材 |
| 1.3 模型制备 |
| 1.4 给药方式及分组 |
| 1.5 检测手段及方法 |
| 2 统计学方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 柴胡加龙骨牡蛎汤抑制海马区炎症蛋白表达 |
| 3.2 柴胡加龙骨牡蛎汤降低皮层区炎症蛋白表达水平 |
| 3.3 柴胡加龙骨牡蛎汤改善海马区神经损伤 |
| 3.4 柴胡加龙骨牡蛎汤缓解心肌梗死合并焦虑大鼠焦虑样行为 |
| 3.5 柴胡加龙骨牡蛎汤改善心肌梗死合并焦虑大鼠心脏功能 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 不足与展望 |
| 致谢 |
| 在读期间研究成果 |
（5）脑深部电刺激前岛叶在药物成瘾中的治疗作用及机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 符号说明 |
| 第一部分:持续高频脑深部电刺激双侧前岛叶对大鼠吗啡条件性位置偏爱戒断后复发和消退的影响 |
| 前言 |
| 药物成瘾概述及现状 |
| 药物成瘾的危害 |
| 药物成瘾的阶段 |
| 药物成瘾的相关理论及神经回路 |
| 岛叶与药物成瘾 |
| 药物成瘾的治疗 |
| 脑深部电刺激与药物成瘾 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验药物和试剂 |
| 1.3 主要药物和试剂配制 |
| 1.4 实验仪器及设备 |
| 1.5 条件性位置偏爱(Conditioned place preference,CPP)装置 |
| 1.6 Smart3.0视频跟踪系统 |
| 1.7 Smart3.0 CPP操作程序 |
| 1.8 条件性位置偏爱方案 |
| 1.9 实验分组及设计 |
| 1.10 脑深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)装置和刺激方案 |
| 1.11 脑深部电刺激装置植入手术 |
| 1.12 旷场实验 |
| 1.13 新物体识别实验 |
| 1.14 电极位置的组织学验证 |
| 1.15 实时定量PCR(Real Time Quantitative PCR,RT-qPCR) |
| 1.16 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 DBS电极位置验证 |
| 2.2 前岛叶持续高频DBS抑制了戒断阶段吗啡条件性位置偏爱(CPP)的复发 |
| 2.3 持续的HF-DBS加速了吗啡诱-CPP的消退并防止了点燃诱导的复发 |
| 2.4 前岛叶持续高频DBS不影响运动活动、焦虑样行为和新物体识别 |
| 3 讨论 |
| 第二部分:脑深部电刺激吗啡成瘾大鼠前岛叶的蛋白质组学分析及差异差蛋白在药物成瘾中的作用 |
| 前言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验试剂 |
| 1.3 主要药物配制 |
| 1.4 仪器设备 |
| 1.5 动物分组 |
| 1.6 脑深部电刺激(deep brain stimulation,DBS)装置和手术植入 |
| 1.7 建立吗啡CPP模型 |
| 1.8 iTRAQ蛋白质组分析 |
| 1.9 用PRM对iTRAQ数据对选定的蛋白质进行验证 |
| 1.10 组织学和数据分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 组织学验证电极位置 |
| 2.2 吗啡引起条件性位置偏爱形成且慢性持续高频DBS阻止了吗啡-偏爱的复发 |
| 2.3 基于iTRAQ鉴定的蛋白质 |
| 2.4 生物信息学分析 |
| 2.5 在AI中与HF-DBS干预吗啡成瘾有关的关键蛋白的发现 |
| 2.6 DEPs蛋白-蛋白相互作用分析 |
| 2.7 PRM验证差异蛋白DEPs |
| 3 讨论 |
| 3.1 Eif4e2与药物成瘾 |
| 3.2 Gnal与药物成瘾 |
| 3.3 GLT-1与药物成瘾 |
| 3.4 Taco1与吗啡成瘾 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述 岛叶:治疗药物成瘾的神经调控靶区 |
| 1 药物成瘾定义、危害、治疗及机制 |
| 1.1 药物成瘾定义 |
| 1.2 药物成瘾危害 |
| 1.3 药物成瘾治疗 |
| 1.4 药物成瘾的神经生物机制 |
| 2 岛叶解剖 |
| 2.1 岛叶结构连接成瘾脑区 |
| 3 内感受在成瘾中的作用,岛叶与内感受 |
| 3.1 岛叶与药物成瘾的相关研究 |
| 4 岛叶是治疗药物成瘾的神经调控靶区 |
| 4.1 TMS与药物成瘾,TMS岛叶治疗药物成瘾 |
| 4.2 t DCS与药物成瘾,t DCS岛叶治疗药物成瘾 |
| 4.3 DBS与药物成瘾,DBS岛叶治疗药物成瘾 |
| 5 结论 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 |
| 个人简介 |
| 开题、中期及学位论文答辩委员组成 |
（6）光控抑制A2AR的工具构建及A2AR在冲动行为中作用的初步研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| Abstract |
| 摘要 |
| 第一章 前言 |
| 第二章 AntiA_(2A)R的构建和功能验证 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.2 实验结果 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 第三章 光激活型A_(2A)R封闭肽的构建和功能验证 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.2 实验结果 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 第四章 杏仁核区A_(2A)R活化导致冲动行为发生机制初探 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.2 实验结果 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 A_(2A)R研究工具应用进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 光遗传学在G蛋白偶联受体调控中的运用 |
| 参考文献 |
| 博士研究生期间成果 |
| 致谢 |
（7）拉曼光谱在胚胎质量及发育潜能评估中的应用价值（论文提纲范文）
| 英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分 拉曼光谱与胚胎质量的相关性研究 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 PCA 可视化结果 |
| 3.2 PCA 聚类分析结果 |
| 3.3 卷积神经网络模型(Convolutional Neural Network,CNN)预测结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 拉曼光谱在预测胚胎发育潜能中的应用 |
| 1 前言 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.2 方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 PCA 可视化结果 |
| 3.2 PCA 聚类分析结果 |
| 3.3 CNN 模型预测结果 |
| 3.4 个体分析结果 |
| 4 讨论 |
| 5 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 综述 胚胎质量评估方法研究进展 |
| 参考文献 |
（8）人羊膜上皮细胞修复大鼠卵巢功能不全的实验研究（论文提纲范文）
| 英汉缩略语名词对照 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第1章 hAECs的分离、培养、鉴定与生物学特性分析 |
| 1 实验材料 |
| 2 方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第2章 环磷酰胺诱导大鼠卵巢损伤模型的建立 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第3章 hAECs修复大鼠卵巢功能不全的体内实验 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第4章 hAECs修复大鼠卵巢功能不全的机制研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第5章 结论 |
| 第6章 综述 |
| 1 综述一化学治疗引起卵巢功能损伤的机制与治疗措施 |
| 2 综述二羊膜上皮细胞的研究进展 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（10）ADSC-CM对小型猪腹腔镜肝IRI合并部分肝切除保护作用的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| 英文摘要 |
| 1 前言 |
| 1.1 腹腔镜微创技术简介 |
| 1.1.1 腹腔镜微创技术的发展简介 |
| 1.1.2 腹腔镜肝切除术的发展应用 |
| 1.1.3 腹腔镜微创技术的客观评价 |
| 1.1.4 腹腔镜微创技术的发展方向 |
| 1.2 肝脏缺血再灌注损伤 |
| 1.2.1 肝脏缺血再灌注损伤的发生机制 |
| 1.2.2 肝脏缺血再灌注损伤的预防治疗 |
| 1.2.3 探究肝脏缺血再灌注损伤的实验动物模型 |
| 1.3 间充质干细胞概述 |
| 1.3.1 干细胞的生物学特性与分类 |
| 1.3.2 间充质干细胞的由来与定义 |
| 1.3.3 间充质干细胞生物学功能 |
| 1.3.4 间充质干细胞作用机制 |
| 1.3.5 干细胞临床应用的安全性 |
| 1.4 间充质干细胞条件培养基 |
| 1.4.1 间充质干细胞的旁分泌作用 |
| 1.4.2 间充质干细胞条件培养基的治疗作用 |
| 1.4.3 脂肪间充质干细胞条件培养基 |
| 1.4.4 脂肪间充质干细胞条件培养基的临床应用 |
| 1.5 目的与意义 |
| 2 材料和方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 试验动物 |
| 2.1.2 试验器材 |
| 2.1.3 试验药品及试剂 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 小型猪脂肪间充质干细胞的分离培养 |
| 2.2.2 改良后小型猪脂肪间充质干细胞的鉴定 |
| 2.2.3 改良后小型猪脂肪间充质干细胞的评估 |
| 2.2.4 小型猪脂肪间充质干细胞条件培养液的提取制备 |
| 2.2.5 小型猪腹腔镜下肝缺血再灌注合并部分切除模型的建立 |
| 2.2.6 腹腔镜建立肝缺血再灌注合并部分切除模型的安全性监测 |
| 2.2.7 小型猪ADSC-CM对血液常规指标的影响 |
| 2.2.8 小型猪ADSC-CM对肝组织形态学观察 |
| 2.2.9 小型猪ADSC-CM对肝脏酶谱的影响 |
| 2.2.10 小型猪ADSC-CM对肝脏氧化应激的影响 |
| 2.2.11 小型猪ADSC-CM对炎症反应的影响 |
| 2.2.12 小型猪ADSC-CM对肝细胞凋亡的影响 |
| 2.2.13 小型猪ADSC-CM对肝再生的影响 |
| 2.2.14 小型猪ADSC-CM成分检测 |
| 2.2.15 数据统计分析方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 小型猪脂肪间充质干细胞的分离培养和形态比较 |
| 3.2 小型猪脂肪间充质干细胞的鉴定 |
| 3.2.1 表面抗原的鉴定 |
| 3.2.2 成骨分化能力的鉴定 |
| 3.2.3 成脂分化能力的鉴定 |
| 3.2.4 成肝分化能力的鉴定 |
| 3.3 改良后小型猪脂肪间充质干细胞的评估 |
| 3.3.1 增殖能力的比较 |
| 3.3.2 迁移能力的比较 |
| 3.4 小型猪脂肪间充质干细胞条件培养液的提取制备 |
| 3.4.1 小型猪脂肪间充质干细胞条件培养液的提取 |
| 3.4.2 小型猪脂肪间充质干细胞条件培养液的浓缩 |
| 3.5 腹腔镜建立肝损伤模型安全性监测结果 |
| 3.6 血液常规指标检测结果 |
| 3.6.1 白细胞(WBC) |
| 3.6.2 中性粒细胞(NE) |
| 3.6.3 淋巴细胞(LY) |
| 3.7 肝组织形态学观察结果 |
| 3.7.1 肝脏病理结构观察结果 |
| 3.7.2 肝脏超微结构观察结果 |
| 3.8 术后肝脏酶谱检测结果 |
| 3.8.1 谷丙转氨酶(ALT) |
| 3.8.2 谷草转氨酶(AST) |
| 3.8.3 碱性磷酸酶(ALP) |
| 3.8.4 乳酸脱氢酶(LDH) |
| 3.8.5 总胆红素(TBIL) |
| 3.8.6 总蛋白(TP) |
| 3.9 肝组织氧化应激检测结果 |
| 3.9.1 丙二醛(MDA) |
| 3.9.2 超氧化物歧化酶(SOD) |
| 3.9.3 过氧化氢酶(CAT) |
| 3.9.4 谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) |
| 3.9.5 髓内过氧化物酶(MPO) |
| 3.10 炎症反应水平检测结果 |
| 3.10.1 血清炎症相关指标检测结果 |
| 3.10.2 肝脏组织炎症相关基因水平检测结果 |
| 3.11 肝细胞凋亡水平检测结果 |
| 3.11.1 肝脏组织凋亡相关酶活性检测结果 |
| 3.11.2 肝脏组织凋亡相关基因水平检测结果 |
| 3.11.3 肝脏组织凋亡相关蛋白水平检测结果 |
| 3.11.4 肝脏组织Fas和Fasl免疫组织化学染色结果 |
| 3.11.5 肝脏组织TUNEL染色结果 |
| 3.12 肝脏再生水平检测结果 |
| 3.12.1 血清再生相关指标检测结果 |
| 3.12.2 组织再生相关基因检测结果 |
| 3.12.3 组织再生相关蛋白检测结果 |
| 3.12.4 肝脏组织Ki67免疫组织化学染色结果 |
| 3.13 小型猪ADSC-CM成分分析结果 |
| 4 讨论 |
| 4.1 ADSCs培养方法的改良 |
| 4.2 ADSC-CM对肝脏缺血再灌注损伤的研究基础 |
| 4.3 ADSC-CM对小型猪肝脏功能的影响 |
| 4.4 ADSC-CM对小型猪氧化应激的影响 |
| 4.5 ADSC-CM对小型猪炎症反应的影响 |
| 4.6 ADSC-CM对小型猪细胞凋亡的影响 |
| 4.7 ADSC-CM对小型猪肝脏再生的影响 |
| 4.8 小型猪ADSC-CM成分分析的探讨 |
| 5 结论 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 |
四、摄像辅助医疗注射（论文参考文献）
- [1]基于高速摄像的栓塞胶同轴输注技术离体研究[D]. 王子安. 大连理工大学, 2021(01)
- [2]西安地区现代综合医院核医学科建筑设计研究[D]. 徐清月. 西安建筑科技大学, 2021(01)
- [3]维生素D对骨结核微环境中破骨细胞生成的影响及其机制研究[D]. 邓杰忠. 中国人民解放军陆军军医大学, 2021(02)
- [4]从CXCR4/NF-κB/GSDMD探讨柴胡加龙骨牡蛎汤抑制心肌梗死合并焦虑大鼠炎症机制研究[D]. 侯季秋. 北京中医药大学, 2021(01)
- [5]脑深部电刺激前岛叶在药物成瘾中的治疗作用及机制研究[D]. 常海刚. 宁夏医科大学, 2021
- [6]光控抑制A2AR的工具构建及A2AR在冲动行为中作用的初步研究[D]. 张卓航. 中国人民解放军陆军军医大学, 2020(07)
- [7]拉曼光谱在胚胎质量及发育潜能评估中的应用价值[D]. 黄静. 安徽医科大学, 2020(04)
- [8]人羊膜上皮细胞修复大鼠卵巢功能不全的实验研究[D]. 张玉林. 重庆医科大学, 2020(01)
- [9]教育部关于印发普通高中课程方案和语文等学科课程标准（2017年版2020年修订）的通知[J]. 教育部. 中华人民共和国教育部公报, 2020(06)
- [10]ADSC-CM对小型猪腹腔镜肝IRI合并部分肝切除保护作用的研究[D]. 焦智慧. 东北农业大学, 2020(04)