一、阿维菌素同系物和衍生物(综述)(论文文献综述)
卢枫[1](2021)在《甲维盐对松材线虫作用机理初探》文中认为甲维盐(emamectin benzoate,EB)是一种常用的十六元大环内酯化合物(16-membered macrolide lactones),它由阿维菌素衍生合成,杀虫活性比阿维菌素高出数个数量级,且对哺乳动物的毒性低,是目前应用最广泛的高效低毒广谱杀虫剂,也是树干注药防治松材线虫的主要药剂之一,但尚未有研究验证其对松材线虫作用机理。本论文克隆出编码松材线虫谷氨酸门控氯离子通道(glutamate-gated chloride channel,GluCl)和γ-氨基丁酸门控氯离子通道(γ-aminobutyric acid-gated chloride channel,GABACl)的基因,验证了这两个作用靶标与甲维盐及几种十六元大环内酯化合物的亲和作用。主要结果如下:1.通过生物测定明确了低剂量甲维盐对松材线虫的毒力作用。浓度为0.1 mg/L的甲维盐处理能够显着降低松材线虫雌虫平均产卵量(F=145.25,P<0.001)、抖动频率(F=141.97,P<0.001),且能抑制其发育进度(F=175.75,P<0.001),对后代性别比例则无显着影响(F=1.412,P=0.281),表明低剂量甲维盐对松材线虫的繁殖、发育、运动均有影响。2.通过转录组测序筛选0.1 mg/L甲维盐胁迫下松材线虫的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。处理12 h,各RNA-seq库间只有7个DEGs;处理24 h,共筛选出5741个DEGs,其中甲维盐与助剂对照处理24 h样品(EB24与ON24)对比结果中,共有758个基因上调表达,562个基因下调表达,它们的生物学功能分别与生活史、神经与运动系统、外源性物质代谢及致病性相关。通过qPCR验证转录组测序结果,果胶裂解酶(F=151.9,P<0.001)和β-1,4-内切葡聚糖酶(F=735.2,P<0.001)基因经甲维盐处理显着下调表达,谷氨酸门控氯离子通道(F=35.0,P<0.001)、γ-氨基丁酸β受体(F=15.8,P<0.001)、UDP葡萄糖醛酸转移酶(F=17.0,P<0.001)和ABC转运蛋白(F=23.1,P<0.001)基因则显着上调,相对表达水平变化趋势与转录组测序结果相符,证明了转录组数据准确可靠。生物信息学分析结果表明,筛选出的BxGluCl和BxGABACl基因均具备半胱氨酸环配体门控离子通道(cysteine-loop ligand-gated ion channel super family,cys-loop LGICs)超家族的典型结构特征;系统发育树构建结果表明,BxGluCl和BxGABACl与其他线虫的氯离子通道基因具备高度同源性。推断BxGluCl和BxGABACl具备氯离子通道蛋白功能,且能够完整表达。3.使用PCR扩增和重组质粒构建技术克隆目的基因,并通过qPCR分析松材线虫BxGluCl和BxGABACl在不同龄期的表达水平及化合物处理后的表达模式。PCR扩增得到电泳结果符合预期大小的目的条带,使用pGEM-T Easy载体构建重组质粒并导入大肠杆菌,提取得到质粒测序,序列与预期相符,克隆出的BxGluCl和BxGABACl片段长度分别为1386 bp和1446 bp。BxGluCl和BxGABACl均在卵期表达量较低,二龄至四龄(J2-J4)幼虫表达量较高,成虫期则达到最高表达水平。甲维盐处理12 h内,成虫体内BxGluCl(F=2.308,P=0.203)和BxGABACl(F=4.654,P=0.097)表达量均未发生显着变化,24 h后则均显着上升(F=8.248,P=0.019;F=8.436,P=0.018);对照药剂噻虫啉处理后48 h内BxGluCl和BxGABACl表达水平均不发生显着变化。4.使用RNAi技术明确了十六元大环内酯化合物对松材线虫的作用靶标。松材线虫成虫经合成的BxGluCl和BxGABACl的dsRNA(dsBxGluCl和dsBxGABACl)浸泡干扰24 h后,BxGluCl和BxGABACl沉默效率分别达54.93%和38.53%,RNAi沉默效率较高。使用不同剂量的甲维盐、天维菌素A、天维菌素B、阿维菌素B1a和噻虫啉进行生物测定,松材线虫经RNAi后,对4种十六元大环内酯化合物的敏感性均显着下降,对新型氯代烟碱杀虫剂噻虫啉的敏感性则无显着变化;松材线虫经BxGluCl和BxGABACl的混合dsRNA(dsMix)沉默后抖动频率亦显着降低(F=6.310,P=0.036)。说明甲维盐等十六元大环内酯化合物作用靶标为松材线虫的BxGluCl和BxGABACl蛋白。
陈慧萍,曹立冬,赵鹏跃,曹冲,李凤敏,徐博,黄启良[2](2021)在《阿维菌素缓控释载药体系的构建及应用研究进展》文中研究表明利用先进的功能材料和制备工艺,可以改善农药制剂的性能,提高农药稳定性,调控农药释放,提高农药利用率。阿维菌素作为一种广谱高效的抗生素类杀虫杀螨生物农药,广泛应用于农业、畜牧业和卫生等方面,但在紫外光和微生物作用下易分解,影响其药效的发挥。选择合适载体材料,优化制备工艺,既可以解决阿维菌素的稳定性问题,又可以提高其应用性能。本文综述了不同阿维菌素缓控释载药体系的构建及应用研究进展,从载体材料、制备工艺、释放特性、光稳定性以及其他性能等方面进行阐述,分析了目前研究中存在的问题及未来的研究方向。
林海蔚,韩慧霖,罗茵,马千里,张志祥[3](2020)在《阿维菌素B2a衍生物类皮雷菌素对草地贪夜蛾的室内毒力》文中研究表明【目的】测定不同浓度的类皮雷菌素对草地贪夜蛾的生物活性,为草地贪夜蛾的绿色防控提供参考依据。【方法】于室内用不同浓度(0、0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mg/L)类皮雷菌素药液浸泡过的玉米叶片分别喂食10头草地贪夜蛾2龄幼虫,3次重复;于处理前和处理后24、48 h测量幼虫的体重、体长等指标,观察记录幼虫的死亡情况,研究类皮雷菌素对草地贪夜蛾2龄幼虫生长的影响。【结果】在室内条件下,用不同浓度的类皮雷菌素药液浸泡过的玉米叶片喂食草地贪夜蛾2龄幼虫24和48 h后,2龄幼虫的死亡率随药液浓度的增大而上升,其中4.00 mg/L类皮雷菌素药液处理24 h后草地贪夜蛾2龄幼虫的体长增长率为-1.06%、体长增长抑制率为120.88%、平均取食叶面积为4.67 mm2、取食抑制率为39.13%,处理24和48 h后草地贪夜蛾2龄幼虫的体重增长抑制率分别为19.03%和56.07%。【结论】类皮雷菌素对草地贪夜蛾的体长、体重和取食量均有抑制作用,在草地贪夜蛾的防控中有广阔的应用前景。
王浩宇[4](2020)在《工业阿维链霉菌废渣的杀虫活性研究和杂质鉴定》文中研究表明多拉菌素(Doramectin)是一类新型大环内酯类抗寄生虫兽药,可安全高效驱杀牛、猪、羊等家畜体内和体表的寄生虫。目前,多拉菌素已经被研发和应用于市场二十余年,现在普遍应用于畜牧业生产。1975年,用于生产多拉菌素的阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)原始菌株被日本北里研究所从日本静冈县伊东市河奈的土壤中分离出来的。并在1976年由美国Merck公司将其鉴定,确定为链霉菌属里的一个新品种。阿维链霉菌在经过基因改造和生物合成后产生多拉菌素,这类菌素在动物体内的清除率更低、生物半衰期更长、生物利用率更高。因此多拉菌素成为目前生产的主要经济产物。在工业化生产中利用基因改造后的阿维链霉菌株可以提升多拉菌素的产量,但生产时附带合成的类似物杂质也给纯化带来难度,现代工厂粗放的分离提取工艺会使得多拉菌素的提取率不高。因此,对多拉菌素工业化生产排放的菌渣中残余的有效成分高效提取和开发利用十分必要。基于此,本实验采用工业化阿维链霉菌生产后的菌渣为研究对象,溶剂提取并测试杀虫活性,同时对多拉菌素纯度分析中相关的类似物杂质分离鉴定。该研究不但有望解决工业菌渣处理成本高的问题,同时变废为宝,为进一步开发生物农药打下基础。论文研究成果如下:1.以韭菜迟眼蕈蚊为研究对象,对多拉菌素的阿维链霉菌菌渣(简称多拉菌渣)提取物的乙酸乙酯萃取部分、石油醚萃取部分和正丁醇萃取部分进行了杀虫活性实验,比较各部分活性,确定多拉菌渣乙酸乙酯萃取部分杀虫活性较强。2.在多拉菌渣乙酸乙酯萃取部分分离得到5个与多拉菌素结构近似化合物。选择相对含量较多的YSYZ-DR2C(DR-IM3)进行结构鉴定,最终确定分子式为C49H72O14,和多拉菌素的差别只是在14位碳上缺少一个甲基。通过对比文献,查阅相关数据,确定YSYZ-DR2C为新化合物。
冯有玲[5](2019)在《基因工程菌Streptomyces avermitilis TM24次级代谢产物分离鉴定及杀虫杀螨活性研究》文中进行了进一步梳理聚酮类化合物是自然界中一类重要的具有生物活性和结构多样性的化合物。该类化合物由酰基辅酶A前体经聚酮合成酶(PKSs)生物合成。利用组合生物合成技术形成杂交PKSs被认为是开发新型聚酮化合物的一种很好的途径。本文对基因工程菌株Streptomyces avermitilis TM24的活性成分进行了初步研究,包括S.avermitilis TM24代谢产物的分离鉴定,以及所得化合物的杀螨和杀虫活性测定。1、基因工程菌株S.avermitilis TM24次级代谢产物的分离与鉴定。将30L基因工程菌株S.avermitilis TM24发酵液过滤、菌体经乙醇萃取、浓缩得到258 g浸膏。浸膏经硅胶柱层析(100-200目)、凝胶柱层析(Sephadex LH-20)、高效液相色谱法(C-18和C-3柱)等分离纯化得到12个化合物。利用核磁共振、高分辨质谱、红外、紫外等波谱分析方法对其进行结构鉴定,鉴定结果表明其中两个分别为天维菌素A和天维菌素B,其余10个为新化合物,命名为Tenvermectin F(1),Tenvermectin G(2),Tenvermectin H(3),Tenvermectin I(4),Tenvermectin K(5),Tenvermectin L(6),Tenvermectin Monosaccharide A(7),Tenvermectin Monosaccharide B(8),Tenvermectin Monosaccharide C(9),Tenvermectin Monosaccharide D(10)。2、化合物杀虫杀螨活性测定。以朱砂叶螨、松材线虫和小菜蛾为供试生物,测定化合物的杀虫和杀螨活性。天维菌素A、天维菌素B、米尔贝A4、化合物1-8对朱砂叶螨的致死中浓LC50为0.0043、0.0049、0.0210、0.0022、0.0172、0.0248、0.0297、0.0723、0.0193、0.0266、0.0776 mg/L,化合物9和10的LC50大于0.2000 mg/L;天维菌素A、天维菌素B、米尔贝A4、化合物1-9对松材线虫24 h的致死中浓LC50分别为3.45、2.17、4.04、28.60、17.11、12.23、19.92、4.56、38.56、4.30、20.19、8.34mg/L,化合物10的LC50大于100 mg/L;化合物1-10对小菜蛾的生物活性较低。3、比较化合物的杀虫杀螨活性和分子结构,天维菌素类化合物C-5、C-13、C-24、C-25位连接不同的基团对杀虫活性影响较大,天维菌素类化合物C-27位呋喃环缺失后杀虫活性降低。论文研究结果为基因工程菌开发提供了一定的理论基础和科学依据。
向华平[6](2018)在《阿维菌素B2衍生物有机合成研究进展》文中进行了进一步梳理本文综述了近年来国内外已发表的有机合成阿维菌素B2衍生物的相关研究资料;旨在引起广大科研工作者的兴趣来更深一步开发阿维菌素B2的相关衍生物;并在此基础上提出了利用阿维菌素B2来合成多种衍生物的设想且进行了展望。
刘文静[7](2018)在《海绵内生菌活性物质的分离纯化与结构解析》文中指出近几十年来,由于陆地微生物资源被大量的开发利用。海洋又因其高压、高盐、寡营养等环境条件,从而使得从海洋生物中提取到的活性物质具有更强更多的生物活性。从海洋生物中分离出不同的化合物就意味着产生着一种有希望的天然产物。本文通过活性筛选(包括除草、杀虫、抗菌、抗肿瘤),发现海绵内生菌NH1403菌株的发酵液对稗草和马齿苋具有较好的除草活性。对人的肝癌细胞(HepG2)具有较好的抗肿瘤活性。在该实验中通过对抗肿瘤活性进行追踪,分离出该菌株产生抗肿瘤活性的代谢产物。通过萃取、薄层层析、高效液相色谱分析等技术方法进行分析和制备,最终得知三个活性物质即A1、B1和B2均具有抗肿瘤细胞的活性。因为发酵液具有较好的除草活性,因此进一步验证了这三个化合物是否具有除草活性测试。结果发现,化合物A1和B2对稗草和马齿苋种子的发芽具有抑制活性。由于化合物B1和B2的量较少,不足以进行结构解析,因此只对化合物A1进行了结构解析。通过高分辨质谱分析,得到A1化合物的相对分子质量为402。再将该纯品进行1H-NMR、13C-NMR、DEPT90、DEPT135、1H-1HCOSY、HMBC、HSQC 核磁共振分析,得到其分子式为C24H38O5,并解出其结构。通过HPLC建立了可用于检测化合物A1在发酵和分离纯化过程中含量的定量分析方法。通过对NH1403菌株的形态特征的观察、生理生化实验的现象和16SrDNA基因序列的测试及进一步的建立生长发育树,确定了该NH1403菌株属于芽孢杆菌属。
万玥,陆皞然[8](2017)在《基于阿维菌素结构衍生的专利技术综述》文中研究表明阿维菌素是广谱、高效、低毒、环保的抗生素生物农药。本文通过统计、分析阿维菌素结构衍生的相关专利,从中获取了国内外申请量趋势、专利分布情况和重要的申请人信息,分析了专利中的主要技术发展过程,分类概括了阿维菌素类化合物结构改造的方法。
陈振[9](2016)在《阿维菌素衍生物设计、合成及杀虫活性研究》文中认为阿维菌素作为一类重要的十六元大环内酯抗生素,因具有活性高、活性谱广、选择性强和低毒安全等特点,已成为一种广泛应用于农、林和养殖业的高效生物源杀虫、杀螨剂。但随着长期及不合理使用,害虫抗性的提高,阿维菌素用药量的不断增加,同时因其自身理化性质的不稳定,使得阿维菌素合理的结构改造非常必要。本论文在阿维菌素C4"位和C4’位进行了衍生物合成,得到化合物54个,并以朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus)、小菜蛾(Plutella xylostella)、松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)为供试生物,对得到的化合物活性进行了系统测定。1、将阿维菌素C4"位羟基和单糖阿维菌素C4’位羟基经氧化,C4’’=NH2同步还原反应合成4’’-epi-NH2阿维菌素B1a(5)和4’-epi-NH2阿维菌素B1a(5)活性先导化合物。根据类同合成法和亚结构连接法原理,合成了阿维菌素磺酰胺系列衍生物34个,α-氨基酸介导的乙酰胺基阿维菌素系列衍生物18个,并通过液-质联用(LC-MS)和核磁共振氢谱(1H NMR)等方法进行结构表征和确认;采用浸叶饲喂法、浸渍法、浸叶法分别对小菜蛾、松材线虫、朱砂叶螨进行室内活性测定。2、阿维菌素磺酰胺系列衍生物对松材线虫表现出了良好的杀虫活性,对朱砂叶螨、小菜蛾表现出中等和偏差的生物活性。4’-甲基磺酰胺阿维菌素对松材线虫活性LC50为0.58mg/L,与阿维菌素活性相当,4’-乙基磺酰胺阿维菌素对松材线虫活性LC50为0.77 mg/L,仅次于4’-甲基磺酰胺阿维菌素。磺酰胺系列衍生物表现出相似的构效关系,在阿维菌素磺酰胺6a6q和单糖阿维菌素磺酰胺12a12q两系列化合物中,烷基链和杂环取代基团化合物活性明显优于其他化合物,烷基链增大不利于活性提高,当R1为固定基团苯基时,其上不同取代基R2变化与活性紧密相关,但无明显规律,苯环上含甲基、乙基、异丙基等给电子基团活性明显高于苯环上未取代和含其他吸电子基团(卤素、硝基)化合物,但当苯环上含甲氧基时,杀虫活性明显提高。3、阿维菌素乙酰氨基酸系列衍生物杀虫、杀螨活性明显高于单糖系列阿维菌素乙酰氨基酸衍生物24倍,阿维菌素C4"-NH2引入N-乙酰甘氨酸表现出良好的杀线虫活性,对线虫活性LC50为0.78 mg/L,与阿维菌素活性相当。氨基酸侧链增大,活性逐渐下降。说明取代基链长度和取代基体积大小影响化合物与阿维菌素受体-谷氨酸门控的氯离子通道结合,当目标化合物取向柔性、构型与体积平衡时,才能达到较好的杀螨活性。本论文的研究工作为进一步设计合成新的具有较高杀虫活性的阿维菌素类衍生物提供了一定的理论依据和实验依据。
马清清[10](2015)在《蝇类体内谷氨酸受体与阿维菌素类药物相互作用的理论研究》文中指出阿维菌素类药物具有高效和低毒性,因此被广泛应用于农业杀虫。但随着此类药物的滥用,潜在的危害逐一显现。如昆虫抗药性逐渐增强导致阿维菌素类药物药效逐渐降低,因此快速设计高效的阿维菌素类的新型衍生物成为科学家们的奋斗目标。新型药物设计必须基于明确的药物作用机理,农业害虫体内的谷氨酸受体通常被认定为阿维菌素类药物的靶蛋白。本文旨在分子水平揭示阿维菌素类药物与蝇类谷氨酸受体相互作用的机制,从而为新型阿维菌素衍生物设计奠定理论基础。该研究以蛋白数据库中秀丽隐杆线虫3RHW为模板同源模建了五种果蝇的α型谷氨酸受体(F、B、C、D、A)和一种家蝇或铜绿蝇a型谷氨酸受体,并通过拉氏图及主链和侧链图对上述七种受体进行了评估,由拉氏图可知:所有的谷氨酸受体在合理区域分布的氨基酸残基比值都高于标准要求90%,而主、侧链评估结果显示所得受体的结构与解析蛋白结构相近。这说明此次构建的受体蛋白结构合理,可用于接下来的分子对接实验。然后本研究利用Sybyll.1软件中的Surflex-Dock模块分别与阿维菌素,伊维菌素,道拉菌素和米尔被霉菌素进行分子对接研究。结果显示:(1)四种药物与果蝇体内五种α型谷氨酸受体的毒性大小顺序为:阿维菌素:F>C>B>D>A,伊维菌素:C>F>B>D>A,道拉菌素:F>C>B>D>A,米尔倍霉菌素:D>C>F>B>A:(2)四种药物与果蝇、家蝇和铜绿蝇毒性的结果:四种药物对果蝇、家蝇和铜绿蝇的毒性大小一致,均为阿维菌素>道拉菌素>伊维菌素>米尔倍霉菌素,而且四种药物对于果蝇、家蝇与铜绿蝇来说,都是与阿维菌素的亲和力最强。其中果蝇体内的α谷氨酸受体与阿维菌素作用的自由能为-7.618Kcalmol-1,与道拉菌素为-7.427 Kcal mol-1,与伊维菌素为-6.311 Kcal mol-1,与米尔被霉菌素-5.883 Kcal mol-1,这与四种药物中,阿维菌素在果蝇体内的毒性最高的实验结论相吻合;家蝇体内的α谷氨酸受体与阿维菌素作用的自由能为-6.738Kcal mol-1、与道拉菌素为-5.363 Kcal mol-1、与伊维菌素为-4.356 Kcal mol-1、与米尔被霉菌素为-3.867 Kcal mol-1、铜绿蝇体内的α谷氨酸受体与阿维菌素作用的自由能为-5.459 Kcal mol-1,与道拉菌素为-4.138 Kcal mol-1,与伊维菌素为-3.852 Kcal mol-1,与米尔被霉菌素为-3.389Kal mol-1。(3)果蝇、家蝇和铜绿蝇与四种药物相互作用强弱顺序均是:果蝇>家蝇>铜绿蝇。简而言之,同一药物对不同虫体内同一亚组组成的谷氨酸受体毒性大小不同,并且同一药物对同一种昆虫体内同一亚组不同亚型组成的谷氨酸受体毒性大小不同。
二、阿维菌素同系物和衍生物(综述)(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、阿维菌素同系物和衍生物(综述)(论文提纲范文)
(1)甲维盐对松材线虫作用机理初探(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
引言 |
1 文献综述 |
1.1 甲维盐研发与应用进展 |
1.1.1 甲维盐的研发进程 |
1.1.2 甲维盐在害虫防治中的应用 |
1.2 甲维盐及同类化合物作用机理研究进展 |
1.2.1 十六元大环内酯化合物对氯离子通道作用 |
1.2.2 十六元大环内酯化合物对其他基因作用 |
1.3 松材线虫及线虫氯离子通道研究进展 |
1.3.1 松材线虫研究进展 |
1.3.1.1 松材线虫病的危害与防治 |
1.3.1.2 松材线虫基础生物学研究进展 |
1.3.2 线虫氯离子通道研究进展 |
1.3.2.1 氯离子通道的结构特征与生理功能 |
1.3.2.2 谷氨酸门控氯离子通道研究进展 |
1.3.2.3 γ-氨基丁酸门控氯离子通道研究进展 |
1.4 甲维盐对线虫作用研究方法概述 |
1.4.1 转录组测序技术 |
1.4.2 RNA干扰技术 |
1.5 论文研究思路与框架 |
2 低剂量甲维盐对松材线虫毒力作用研究 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 供试松材线虫 |
2.1.2 供试试剂 |
2.1.3 主要仪器与设备 |
2.1.4 培养基与溶液配制 |
2.1.5 各龄期松材线虫的培养与分离 |
2.1.6 生物测定方法 |
2.1.6.1 雌虫产卵量的测定 |
2.1.6.2 发育进度的测定 |
2.1.6.3 线虫抖动频率的测定 |
2.1.6.4 后代性别比例的测定 |
2.1.7 数据处理与分析 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 雌虫产卵量变化 |
2.2.2 发育进度变化 |
2.2.3 线虫抖动频率变化 |
2.2.4 后代性别比例变化 |
2.3 小结 |
3 甲维盐胁迫下松材线虫差异表达基因筛选 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 供试松材线虫 |
3.1.2 供试试剂 |
3.1.3 主要仪器与设备 |
3.1.4 培养基与溶液配制 |
3.1.5 各龄期松材线虫的培养与分离 |
3.1.6 药物处理 |
3.1.7 松材线虫总RNA提取 |
3.1.8 松材线虫转录组测序 |
3.1.9 转录组测序结果分析 |
3.1.9.1 转录组测序质量分析 |
3.1.9.2 差异表达基因定义与筛选 |
3.1.9.3 差异表达基因功能分类 |
3.1.10 转录组数据qPCR验证 |
3.1.10.1 差异表达基因选择 |
3.1.10.2 引物设计 |
3.1.10.3 药剂处理 |
3.1.10.4 cDNA第一链合成 |
3.1.10.5 qPCR扩增体系与反应 |
3.1.11 数据处理与分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 松材线虫总RNA提取结果 |
3.2.2 转录组测序质量分析 |
3.2.3 甲维盐胁迫差异表达基因分析 |
3.2.4 差异表达基因定量验证 |
3.3 小结 |
4 BxGluCl与BxGABACl的克隆与序列分析 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 供试松材线虫 |
4.1.2 供试质粒与菌株 |
4.1.3 供试试剂 |
4.1.4 主要仪器与设备 |
4.1.5 培养基与溶液配制 |
4.1.6 目的基因的筛选 |
4.1.7 目的基因的克隆 |
4.1.7.1 第一链cDNA反转录 |
4.1.7.2 引物设计 |
4.1.7.3 PCR扩增目的片段 |
4.1.7.4 凝胶回收目的片段 |
4.1.7.5 重组质粒的构建 |
4.1.7.6 重组质粒导入大肠杆菌 |
4.1.7.7 质粒提取与测序分析 |
4.1.8 目的基因序列生物信息学分析 |
4.1.9 氨基酸序列比对和系统发育树构建 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 目的基因克隆结果 |
4.2.1.1 目的基因筛选与全长PCR扩增结果 |
4.2.1.2 重组质粒菌液PCR扩增结果 |
4.2.2 目的基因序列分析 |
4.2.2.1 BxGluCl基因序列分析 |
4.2.3.2 BxGABACl基因序列分析 |
4.2.3 目的基因生物信息学分析 |
4.2.3.1 信号肽 |
4.2.3.2 跨膜域 |
4.2.3.3 二级结构 |
4.2.3.4 三维模型 |
4.2.4 序列比对和系统发育树构建结果 |
4.3 小结 |
5 BxGluCl与BxGABACl的功能验证 |
5.1 材料与方法 |
5.1.1 供试松材线虫 |
5.1.2 供试试剂 |
5.1.3 主要仪器与设备 |
5.1.4 主要溶液与储备液配制 |
5.1.5 目的片段扩增 |
5.1.5.1 引物设计 |
5.1.5.2 PCR扩增目的片段 |
5.1.6 RNA干扰 |
5.1.6.1 dsRNA合成 |
5.1.6.2 RNAi浸泡试验 |
5.1.7 不同化合物对松材线虫毒力测定 |
5.1.8 qPCR试验 |
5.1.8.1 各龄期目的基因表达水平验证 |
5.1.8.2 化合物处理后目的基因表达模式分析 |
5.1.8.3 沉默效率qPCR测定 |
5.1.9 目的基因功能验证 |
5.1.10 数据处理与分析 |
5.2 结果与分析 |
5.2.1 PCR扩增结果 |
5.2.2 dsRNA合成结果 |
5.2.3 各龄期BxGluCl和BxGABACl表达水平比较 |
5.2.4 化合物处理后BxGluCl和BxGABACl表达模式 |
5.2.5 RNAi沉默效率 |
5.2.6 生物测定结果 |
5.2.6.1 不同化合物LC_(50)与LC_(80)的测定结果 |
5.2.6.2 沉默后对化合物敏感性变化结果 |
5.2.6.3 沉默后抖动频率变化结果 |
5.3 小结 |
6 讨论 |
6.1 低剂量甲维盐可抑制松材线虫繁殖、发育、运动功能 |
6.2 BxGluCl和BxGABACl为十六元大环内酯化合物作用靶标 |
6.3 甲维盐与松材线虫氯离子通道存在最佳结合时间 |
7 结论与展望 |
7.1 结论 |
7.2 展望 |
参考文献 |
个人简介 |
致谢 |
(3)阿维菌素B2a衍生物类皮雷菌素对草地贪夜蛾的室内毒力(论文提纲范文)
0 引言 |
1 材料与方法 |
1.1 试验材料 |
1.1.1 供试昆虫 |
1.1.2 供试植物 |
1.1.3 试验药剂 |
1.2 试验方法 |
1.2.1 试验设计 |
1.2.2 试验方法 |
1.2.3 调查方法 |
1.3 统计分析 |
2 结果与分析 |
2.1 类皮雷菌素对草地贪夜蛾2龄幼虫的毒杀活性 |
2.2 类皮雷菌素对草地贪夜蛾2龄幼虫体长的影响 |
2.3 类皮雷菌素对草地贪夜蛾2龄幼虫体重的影响 |
2.4 类皮雷菌素对草地贪夜蛾2龄幼虫取食量的影响 |
3 讨论 |
4 结论 |
(4)工业阿维链霉菌废渣的杀虫活性研究和杂质鉴定(论文提纲范文)
中文摘要 |
abstract |
第1章 文献综述 |
1.1 阿维链霉菌概述 |
1.1.1 阿维链霉菌简介 |
1.1.2 阿维链霉菌的原始活性代谢产物 |
1.1.3 阿维链霉菌的基因工程研究 |
1.1.4 阿维链霉菌的其他药物简介 |
1.2 多拉菌素概述 |
1.2.1 多拉菌素简介 |
1.2.2 多拉菌素的理化性质 |
1.2.3 多拉菌素的作用机理 |
1.2.4 多拉菌素的应用与发展 |
1.3 基因改造后阿维链霉菌生产多拉菌素的工业化发展概况 |
1.3.1 阿维链霉菌菌种的优化 |
1.3.2 阿维链霉菌发酵的优化 |
1.3.3 阿维链霉菌提取的优化 |
1.4 论文设计思想 |
第2章 阿维链霉菌菌渣的化学成分粗提及活性部位筛选 |
2.1 实验材料 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 阿维链霉菌菌渣的粗提取 |
2.2.2 提取物萃取 |
2.2.3 萃取液杀虫活性测定 |
(一)对韭菜迟眼蕈蚊的触杀活性测定方法 |
(二)对韭菜迟眼蕈蚊的胃毒活性测定方法 |
(三)对韭菜迟眼蕈蚊的拒食活性测定方法 |
2.3 结果与分析 |
1.触杀活性分析 |
(一)多拉菌渣乙酸乙酯部分对韭菜迟眼蕈蚊的触杀活性 |
(二)多拉菌渣石油醚部分对韭菜迟眼蕈蚊的触杀活性 |
(三)多拉菌渣正丁醇部分对韭菜迟眼蕈蚊的触杀活性 |
2.胃毒活性分析 |
(一)多拉菌渣乙酸乙酯部分对韭菜迟眼蕈蚊的胃毒活性 |
(二)多拉菌渣石油醚部分对韭菜迟眼蕈蚊的胃毒活性 |
(三)多拉菌渣正丁醇部分对韭菜迟眼蕈蚊的胃毒活性 |
3.拒食活性分析 |
2.4 讨论 |
第3章 阿维链霉菌菌渣次生代谢物分离纯化 |
3.1 实验材料 |
3.1.1 实验仪器 |
3.1.2 实验试剂 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 实验方法简介 |
3.2.2 实验过程 |
3.3 化合物单体结构鉴定 |
第4章 结论与展望 |
4.1 讨论 |
4.2 展望 |
参考文献 |
附图 |
作者简介 |
致谢 |
(5)基因工程菌Streptomyces avermitilis TM24次级代谢产物分离鉴定及杀虫杀螨活性研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
1 文献综述 |
1.1 组合生物合成研究概述 |
1.2 聚酮类化合物 |
1.2.1 聚酮类化合物生物合成的特点 |
1.2.2 聚酮生物合成酶的特点 |
1.2.2.1 Ⅰ型PKS |
1.2.2.2 Ⅱ型PKS |
1.2.2.3 Ⅲ型PKS |
1.3 聚酮合酶组合生物合成研究进展 |
1.3.1 阿维菌素 |
1.3.2 米尔贝霉素及其衍生物 |
1.4 天维菌素研究概述 |
1.4.1 天维菌素产生菌 |
1.4.2 天维菌素的活性 |
1.5 基因工程菌Streptomyces avermitilis TM |
1.6 本论文的研究意义及研究内容 |
1.6.1 论文的提出和研究意义 |
1.6.2 论文的主要研究内容 |
2 基因工程菌S.avermitilis TM24 次级代谢产物分离鉴定 |
2.1 实验材料 |
2.1.1 实验菌株 |
2.1.2 实验仪器及主要试剂 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 发酵菌株 |
2.2.2 培养基及培养条件 |
2.2.3 次级代谢产物的提取 |
2.2.4 次级代谢产物的分离纯化 |
2.3 结果与分析 |
2.3.1 新化合物1 的结构鉴定 |
2.3.2 新化合物2 的结构鉴定 |
2.3.3 新化合物3 的结构鉴定 |
2.3.4 新化合物4 的结构鉴定 |
2.3.5 新化合物5 的结构鉴定 |
2.3.6 新化合物6 的结构鉴定 |
2.3.7 新化合物7 的结构鉴定 |
2.3.8 新化合物8 的结构鉴定 |
2.3.9 新化合物9 的结构鉴定 |
2.3.10 新化合物10 的结构鉴定 |
2.4 讨论 |
3 化合物杀虫杀螨活性测定 |
3.1 实验方法 |
3.1.1 朱砂叶螨活性测定 |
3.1.2 松材线虫活性测定 |
3.1.3 小菜蛾活性测定 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 对朱砂叶螨的活性 |
3.2.2 对松材线虫的活性 |
3.2.3 对小菜蛾的活性 |
3.3 讨论 |
4 结论 |
参考文献 |
附录 |
个人简介 |
致谢 |
(6)阿维菌素B2衍生物有机合成研究进展(论文提纲范文)
1. 国外试验室对阿维菌素B2结构改造的相关研究 |
2. 国内对阿维菌素B2结构改造的相关研究 |
3. 结语与展望 |
(7)海绵内生菌活性物质的分离纯化与结构解析(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第1章 综述 |
1.1 天然产物类除草剂 |
1.1.1 生物碱 |
1.1.2 香豆素类 |
1.1.3 三酮类 |
1.1.4 萜烯类 |
1.1.5 醌类 |
1.1.6 脂肪酸 |
1.1.7 植物精油 |
1.2 天然产物类杀虫剂 |
1.2.1 多杀菌素 |
1.2.2 阿维菌素 |
1.2.3 印楝素 |
1.2.4 大蒜素 |
1.2.5 鱼藤酮 |
1.2.6 除虫菊素 |
1.3 天然产物类抗菌剂 |
1.3.1 新奥霉素 |
1.3.2 丰加霉素 |
1.3.3 灰黄霉素 |
1.3.4 春雷霉素 |
1.4 天然产物类抗肿瘤药物 |
1.4.1 长春碱和长春新碱 |
1.4.2 青蒿素 |
1.4.3 紫杉醇 |
1.4.4 鬼臼毒素 |
1.4.5 芹菜素 |
1.5 提取天然产物的常用方法 |
1.5.1 辅助提取技术 |
1.5.2 萃取技术 |
1.5.3 色谱技术 |
1.5.4 膜分离技术 |
1.5.5 半仿生提取技术 |
1.7 本课题研究的内容、目的与意义 |
第2章 海绵内生菌NH1403菌株的获得 |
2.1 实验材料与方法 |
2.1.1 主要实验器材 |
2.1.2 主要实验药品和试剂 |
2.1.3 试验培养基 |
2.1.4 海洋微生物的分离 |
2.1.5 NH1403菌株发酵液的处理和保存 |
2.1.6 NH1403菌株发酵液的活性测试 |
2.2 实验结果与讨论 |
2.2.1 除草活性测试结果 |
2.2.2 杀虫活性测试结果 |
2.2.3 抗菌活性测试结果 |
2.2.4 抗肿瘤活性测试结果 |
2.3 本章小结 |
第3章 NH1403菌株发酵条件的优化 |
3.1 实验材料与方法 |
3.1.1 主要实验仪器 |
3.1.2 实验药品与试剂 |
3.1.3 实验用菌株 |
3.1.4 NH1403菌株发酵天数的确定 |
3.1.5 活性物质在胞内还是胞外的分布情况 |
3.1.6 NH1403活性产物的酸碱稳定性探索 |
3.1.7 NH1403活性产物的热稳定性探索 |
3.2 实验结果与讨论 |
3.2.1 NH1403菌株发酵天数的确定 |
3.2.2 NH1403菌株的活性物质在胞内和胞外的分布情况 |
3.2.3 NH1403菌株活性物质的酸碱稳定性 |
3.2.4 NH1403菌株活性物质的热稳定性 |
3.3 本章小结 |
第4章 NH1403活性物质的分离纯化 |
4.1 实验材料与方法 |
4.1.1 主要实验器材 |
4.1.2 主要实验药品和试剂 |
4.1.3 实验用菌株 |
4.2 NH1403发酵代谢产物的粗品制取 |
4.2.1 NH1403菌株的发酵培养与发酵液的预处理 |
4.3 硅胶薄层层析的条件探索 |
4.4 高效液相色谱法的条件探索 |
4.5 活性组分的高效液相制备及纯度分析 |
4.6 化合物A1,B1和B2抗肿瘤测试方法 |
4.6.1 溶液的配制 |
4.7 除草活性测试步骤 |
4.8 NH1403代谢产物纯品的活性测试结果 |
4.8.1 NH1403代谢产物纯品的抗肿瘤活性测试结果 |
4.8.2 NH1403代谢产物纯品的除草活性测试结果 |
4.9 本章小结 |
第5章 NH1403活性产物结构解析 |
5.1 实验仪器 |
5.2 NH1403的结构解析 |
5.3 本章小结 |
第6章 菌株NH1403的菌种鉴定 |
6.1 实验材料与方法 |
6.1.1 菌种 |
6.1.2 主要实验仪器 |
6.1.3 药品与试剂 |
6.2 实验方法 |
6.2.1 菌株个体形态及培养特征试验 |
6.2.2 菌株生理生化特征实验 |
6.2.3 16SrDNA的提取、测序及系统发育树的建立 |
6.3 实验结果与讨论 |
6.3.1 NH1403菌株的菌落生长特征 |
6.3.2 NH1403菌株的生理生化现象 |
6.3.3 NH1403菌株的16SrDNA测序结果 |
6.3.4 NH1403菌株的系统发育树的建立与分析 |
6.4 本章小结 |
第7章 NH1403菌株活性代谢产物A1分析方法的研究 |
7.1 活性物质A1分析方法的研究 |
7.1.1 实验仪器与材料 |
7.1.2 高效液相色谱分析的条件 |
7.1.3 A1化合物标准曲线的绘制 |
7.1.4 活性组分A1发酵效价的计算与评估 |
7.2 本章小结 |
第8章 结论与展望 |
8.1 结论 |
8.2 展望 |
参考文献 |
致谢 |
附录 |
在读发表期间发表论文情况 |
附件 |
(8)基于阿维菌素结构衍生的专利技术综述(论文提纲范文)
一、引述 |
二、阿维菌素类化合物的专利整体情况 |
1. 专利申请量趋势分析 |
2. 专利申请分布 |
三、阿维菌素结构衍生相关专利技术分析 |
1. 对C13位置上的结构改造 |
2. 对C4’和C4’’位置上的结构改造 |
3. 对C4位置上的结构改造 |
4. 对C22-C23位置上的结构改造 |
5. 对C25位置上的结构改造 |
6. 对C5位置上的结构改造 |
7. 其它结构改造方式 |
(9)阿维菌素衍生物设计、合成及杀虫活性研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 文献综述 |
1.1 阿维菌素概述 |
1.1.1 阿维菌素发展历程 |
1.1.2 阿维菌素的结构及理化性质 |
1.1.3 阿维菌素作用机制 |
1.2 阿维菌素衍生物研究 |
1.2.1 已商品化阿维菌素类衍生物 |
1.2.2 阿维菌素结构改造研究进展 |
1.2.3 阿维菌素类衍生物构效关系研究 |
1.3 阿维菌素应用现状 |
1.3.1 阿维菌素在农业、林业害虫中的应用 |
1.3.2 阿维菌素在畜牧业上的应用 |
1.4 论文提出及研究思路 |
第二章 阿维菌素磺酰胺衍生物的合成及杀虫活性研究 |
2.1 仪器与试剂 |
2.2 合成部分 |
2.2.1 4''-epi-NH_2阿维菌素B1a(5)的合成方法 |
2.2.2 4'-epi-NH_2阿维菌素B1a(11)的合成方法 |
2.2.3 阿维菌素磺酰胺 6a-e和单糖阿维菌素磺酰胺 12a-e的合成方法 |
2.2.4 阿维菌素磺酰胺 6f-q和单糖阿维菌素磺酰胺 12f-q的合成方法 |
2.2.5 合成步骤 |
2.3 阿维菌素衍生物结构表征 |
2.4 生物活性测试 |
2.4.1 阿维菌素磺酰胺系列衍生物对松材线虫活性 |
2.4.2 阿维菌素磺酰胺系列衍生物对朱砂叶螨活性 |
2.4.3 阿维菌素磺酰胺系列衍生物对小菜蛾活性 |
2.5 结果与讨论 |
2.5.1 4'' 和 4'-epi-NH2-阿维菌素及磺酰胺合成 |
2.5.2 构效关系 |
第三章 阿维菌素乙酰胺基氨基酸衍生物合成及活性研究 |
3.1 仪器与试剂 |
3.2 合成部分 |
3.2.1 4''-epi-NH25OTBDMS阿维菌素B1a(4)和 4'-epi-NH_2-5OTBDMS阿维菌素B1a(10)的合成 |
3.2.2 4''和 4'位取代乙酰胺基氨基酸阿维菌素衍生物合成 |
3.2.3 4''位取代对甲苯磺酰胺基氨基酸阿维菌素衍生物合成 |
3.2.4 4''位取代苯硫脲氨基酸阿维菌素衍生物合成 |
3.2.5 合成步骤 |
3.3 阿维菌素衍生物结构表征 |
3.4 生物活性测试 |
3.4.1 阿维菌素氨基酸系列衍生物活性测定 |
3.4.2 结果与分析 |
3.5 结果与讨论 |
3.5.1 4'' 和 4'-epi-NH_2-阿维菌素及阿维菌素氨基酸衍生物合成 |
3.5.2 构效关系 |
第四章 结论与展望 |
4.1 结论 |
4.2 展望 |
参考文献 |
附录 |
个人简介 |
致谢 |
(10)蝇类体内谷氨酸受体与阿维菌素类药物相互作用的理论研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
1 绪论 |
1.1 研究背景 |
1.2 研究内容 |
1.3 研究意义 |
1.4 阿维菌素类药物在蝇类体内的作用机理 |
1.5 阿维菌素及其衍生物的分子结构 |
1.6 蝇类体内的谷氨酸受体 |
1.7 同源模建 |
1.8 分子对接 |
2 果蝇体内谷氨酸受体与阿维菌素及其衍生物的作用 |
2.1 引言 |
2.2 实验部分 |
2.2.1 果蝇体内5种α亚型谷氨酸受体的同源模拟及蛋白结构优化 |
2.2.1.1 单亚组的同源模拟 |
2.2.1.2 单亚组的组装 |
2.2.1.3 果蝇体内5种α亚型谷氨酸受体的结构优化 |
2.2.2 果蝇体内5种α亚型谷氨酸受体的活性位点 |
2.2.3 果蝇体内5种α亚型谷氨酸受体与阿维菌素类药物进行分子对接 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 果蝇体内5种α亚型谷氨酸受体的同源模拟及蛋白结构优化 |
2.3.2 果蝇体内5种α亚型谷氨酸受体与阿维菌素类药物的分子对接 |
2.4 小结 |
3 家蝇体内谷氨酸受体与阿维菌素及其衍生物的作用 |
3.1 引言 |
3.2 实验部分 |
3.2.1 家蝇体内α谷氨酸受体的同源模拟及蛋白结构优化 |
3.2.1.1 单亚组的同源模拟 |
3.2.1.2 单亚组的组装 |
3.2.1.3 家蝇体内α谷氨酸受体的结构优化 |
3.2.2 家蝇体内α谷氨酸受体的活性位点 |
3.2.3 家蝇体内α谷氨酸受体与阿维菌素类药物进行分子对接 |
3.3 结果与讨论 |
3.3.1 家蝇体内α谷氨酸受体的同源模拟及蛋白结构优化 |
3.3.2 家蝇体内α谷氨酸受体与阿维菌素类药物的分子对接 |
3.4 小结 |
4 铜绿蝇体内谷氨酸受体与阿维菌素及其衍生物的作用 |
4.1 引言 |
4.2 实验部分 |
4.2.1 铜绿蝇体内α谷氨酸受体的同源模拟及蛋白结构优化 |
4.2.1.1 单亚组的同源模拟 |
4.2.1.2 单亚组的组装 |
4.2.1.3 铜绿蝇体内α谷氨酸受体的结构优化 |
4.2.2 铜绿蝇体内α谷氨酸受体的活性位点 |
4.2.3 铜绿蝇体内α谷氨酸受体与阿维菌素类药物进行分子对接 |
4.3 结果与讨论 |
4.3.1 铜绿蝇体内α谷氨酸受体的同源模拟及蛋白结构优化 |
4.3.2 铜绿蝇体内α谷氨酸受体与阿维菌素类药物的分子对接 |
4.4 小结 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 |
四、阿维菌素同系物和衍生物(综述)(论文参考文献)
- [1]甲维盐对松材线虫作用机理初探[D]. 卢枫. 浙江农林大学, 2021(02)
- [2]阿维菌素缓控释载药体系的构建及应用研究进展[J]. 陈慧萍,曹立冬,赵鹏跃,曹冲,李凤敏,徐博,黄启良. 农药学学报, 2021(01)
- [3]阿维菌素B2a衍生物类皮雷菌素对草地贪夜蛾的室内毒力[J]. 林海蔚,韩慧霖,罗茵,马千里,张志祥. 南方农业学报, 2020(06)
- [4]工业阿维链霉菌废渣的杀虫活性研究和杂质鉴定[D]. 王浩宇. 吉林大学, 2020(08)
- [5]基因工程菌Streptomyces avermitilis TM24次级代谢产物分离鉴定及杀虫杀螨活性研究[D]. 冯有玲. 浙江农林大学, 2019
- [6]阿维菌素B2衍生物有机合成研究进展[J]. 向华平. 当代化工研究, 2018(07)
- [7]海绵内生菌活性物质的分离纯化与结构解析[D]. 刘文静. 华东理工大学, 2018(01)
- [8]基于阿维菌素结构衍生的专利技术综述[J]. 万玥,陆皞然. 中国发明与专利, 2017(05)
- [9]阿维菌素衍生物设计、合成及杀虫活性研究[D]. 陈振. 浙江农林大学, 2016(05)
- [10]蝇类体内谷氨酸受体与阿维菌素类药物相互作用的理论研究[D]. 马清清. 青岛科技大学, 2015(06)