一、17β-雌二醇对脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用（论文文献综述）
刘会会[1]（2021）在《二仙含药血清通过雌激素受体抑制Ox-LDL诱导的冠状动脉平滑肌细胞增殖》文中提出目的:冠状动脉粥样硬化性心脏病,是动脉粥样硬化造成冠状动脉血管腔狭窄或阻塞,致冠状动脉血供相对或者绝对不足而引起的心肌缺血、缺氧改变,其机制极其复杂,平滑肌细胞异常增殖是其主要原因之一[1],其中氧化型低密度脂蛋白可以引起内皮损伤并释放多种炎性介质,促进单核细胞转化为巨噬细胞吞噬脂质形成脂质坏死核心,而增殖的平滑肌细胞包围脂质核心成为平滑肌纤维帽促进VSMC（血管平滑肌细胞）的增殖包裹脂质坏死核心,最终形成动脉粥样斑块堵塞血管腔造成心肌缺血、缺氧或坏死[3-5]。有研究认为[6-8],雌激素对动脉粥样斑块有干预作用,但因其致癌、致栓等风险使其运用受限。近年来研究发现[10],植物雌激素,诸如淫羊藿苷、黄芩苷等可以模拟雌激素作用,且副作用少,开发类似植物雌激素成为需求。本课题前期研究显示二仙入血成分中含有多种植物雌激素并且其可以激活GPER30（G蛋白偶联雌激素相关受体）及下游ERK1/2、AKT等信号通路减轻心肌再灌注损伤。基于此前期研究,本实验旨在细胞水平探究二仙含药血清对氧化型低密度脂蛋白诱导的冠状动脉平滑肌细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法:1.细胞培养:应用大鼠原代冠状动脉平滑肌细胞,置于完全培养基中培养,实验细胞为第4-6代细胞（均处于对数生长期）。2.实验步骤:首先给予不同浓度Ox-LDL进行诱导细胞,并行CCK-8筛选出最佳浓度为50mg/L Ox-LD;并筛选出10%二仙含药血清为最佳浓度;正式实验分组为9组:正常细胞组、模型组（Ox-LDL）、阳性对照组（17-β雌二醇）、阴性对照组（大鼠阴性血清）、二仙含药血清组、ICI182780组、G15组、二仙含药血清+ICI182780组、二仙含药血清+G15组,倒置显微镜下观察细胞形态,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术（Flou-3）测定钙离子浓度,荧光定量PCR检测细胞中GPER30、ERK1/2、AKT m RNA表达,ELISA、Western blot法测定GPER30、ERK1/2、AKT蛋白表达。结果:1.倒置显微镜观察二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞形态学影响与正常RCSMCs比较,在Ox-LDL的作用下RCSMCs细胞胞体增大,由梭形变为不规则形,而二仙含药血清干预后细胞胞体变小,加入ICI182780及G15后二仙含药血清这一作用减弱。2.CCK-8法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞增殖活性的影响与正常细胞比较,Ox-LDL明显促进细胞增殖,而二仙含药血清干预后抑制了Ox-LDL对细胞的促进作用,并且二仙含药血清的这一作用可以被ICI182780及G15阻断。3.流式细胞术检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞中钙离子水平的影响与模型组比较,二仙含药血清组明显降低了RCSMCs钙离子浓度;与二仙含药血清组比较,二仙含药血清+ICI182780组及二仙含药血清+G15组均阻断了二仙含药血清对平滑肌增殖的抑制作用。4.荧光PCR法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞GPER30、ERK1/2、AKT m RNA表达水平的影响与模型组比较,二仙含药血清组GPER30 m RNA表达明显升高,而对ERK1/2、AKT m RNA表达无明显影响;与二仙含药血清组比较,二仙含药血清+ICI182780组、二仙含药血清+G15组GPER30 m RNA表达明显减少,而ERK1/2、AKT m RNA表达分别未见明显变化;说明在基因水平上二仙含药血清促进了GPER30基因表达而对ERK1/2、AKT无明显作用,且二仙含药血清的这一作用可以被ICI182780及G15阻断。5.ELISA法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞GPER30、ERK1/2、AKT等蛋白表达的影响与模型组比较,二仙含药血清组GPER30蛋白表达水平明显升高,而ERK1/2、AKT蛋白表达水平明显降低;与二仙含药血清组比较,二仙含药血清+ICI182780组、二仙含药血清+G15组GPER30蛋白表达水平均明显下降,而ERK1/2、AKT蛋白表达水平均明显升高;说明在蛋白水平上二仙含药血清明显促进了GPER30蛋白表达而抑制ERK1/2、AKT蛋白表达,且二仙的这一作用可以被ICI182780及G15阻断。6.Western blot法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞GPER30、ERK1/2、AKT等蛋白表达的影响与模型组比较,二仙含药血清组GPER30蛋白表达水平明显升高,而ERK1/2、AKT蛋白表达水平明显降低;与二仙含药血清组比较,二仙含药血清+ICI182780组、二仙含药血清+G15组GPER30蛋白表达水平均明显下降,而ERK1/2、AKT蛋白表达水平均明显升高;说明在蛋白水平上二仙含药血清明显促进了GPER30蛋白表达而抑制ERK1/2、AKT蛋白表达,且二仙的这一作用可以被ICI182780及G15阻断。结论:二仙含药血清抑制由Ox-LDL诱导的平滑肌细胞增殖,其机制是多靶点、多通路,与GPER30和雌激素经典受体ER均有关联,同时二仙含药血清可以降低平滑肌细胞内钙离子水平促使平滑肌舒张。
王静静[2]（2021）在《黄体酮和17β-雌二醇对胰岛素抵抗的干预作用及机制研究》文中研究指明目的:胰岛素抵抗是2型糖尿病（Type 2 Diabetes Mellitus,T2DM）的主要发病原因。女性在绝经之后,雌激素缺乏会导致胰岛素抵抗,糖尿病发病率明显升高。激素替代疗法对糖尿病妇女血糖控制发挥了一定的作用,但当前治疗糖尿病的方法并不健全,且伴有毒副作用。因此,本研究旨在探讨黄体酮和17β-雌二醇对胰岛素抵抗HepG2细胞及高糖诱导凋亡的INS-1细胞的干预作用及机制,并观察黄体酮对胰岛素抵抗小鼠AMPK信号通路的影响。方法:采用MTT法分别检测10 nmol/L、100 nmol/L和1000 nmol/L的黄体酮和17β-雌二醇对HepG2细胞存活率的影响。q PCR检测黄体酮和17β-雌二醇对糖异生关键酶基因和脂肪合成基因相关转录因子的影响,如葡萄糖-6-磷酸酶（Glucose-6-phosphatase,G6Pase）、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（Phosphoenolpyruvate carboxykinase,PEPCK）、固醇调节元件结合蛋白基因（Sterol regulatory element-binding protein 1,SREBP-1）和硬脂酰辅酶A脱氢酶1（Stearoyl-Co A dehydrogenase 1,SCD-1）。同时,使用不同浓度胰岛素作用于HepG2细胞24 h,依据葡萄糖消耗量判断胰岛素抵抗模型是否建立成功。q PCR检测10 nmol/L、100 nmol/L和1000 nmol/L黄体酮和17β-雌二醇对胰岛素抵抗HepG2细胞糖异生关键酶G6Pase和PEPCK、葡萄糖转运蛋白（Glucose transporter protein,GLUT）、p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen-activated protein kinases,p38 MAPK）和Akt m RNA表达的影响。采用33 mmol/L葡萄糖诱导INS-1细胞凋亡,MTT法分别检测10 nmol/L、100 nmol/L和1000 nmol/L黄体酮和17β-雌二醇对INS-1细胞存活率的影响,ELISA检测黄体酮和17β-雌二醇对INS-1细胞胰岛素的分泌量。q PCR检测黄体酮和17β-雌二醇高糖作用48 h细胞胰岛素（Insulin,INS）、B淋巴细胞瘤-2基因（B-cell lymphoma-2,Bcl-2）、Bcl-2相关基因x（Bcl-2 Associated x,Bax）、c-Jun氨末端激酶（c-Jun NH2-terminal kinase,JNK）和Caspase3 m RNA表达水平的影响。Western Blot检测Bax和Bcl-2蛋白的表达。雌性昆明小鼠进行去势手术,持续4周进行高脂饲料喂养,同时腹腔注射链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）建立T2DM胰岛素抵抗模型,Western Blot法检测黄体酮和17β-雌二醇对肝脏组织中腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase,AMPK）胰岛素受体（Insulin receptor,IR）、细胞外调节激酶（Extracellullar regulating kinase,ERK）、葡萄糖转运蛋白4（Glucose transporter protein 4,GLUT4）表达水平的影响。结果:1.黄体酮和17β-雌二醇均能促进HepG2细胞的增殖,且100 nmol/L黄体酮对HepG2细胞增殖作用显着（P<0.05）。黄体酮和17β-雌二醇均能降低G6Pase、PEPCK、SCD1和SREBP-1 m RNA的表达（P<0.05）。2.1×10-7mol/L胰岛素作用于HepG2细胞24 h建立胰岛素抵抗HepG2细胞模型。q PCR结果显示,胰岛素抵抗HepG2细胞中G6Pase、PEPCK和p38 MAPK m RNA的表达显着升高（P<0.05）,Akt、GLUT2和GLUT4 m RNA的表达均显着降低（P<0.01）。与胰岛素抵抗HepG2细胞组相比,10 nmol/L、100 nmol/L和1000 nmol/L的黄体酮和17β-雌二醇干预后,均具有改善胰岛素抵抗作用。3.黄体酮和17β-雌二醇对INS-1细胞的增殖均无显着影响（P>0.05）。用33 mmol/L葡萄糖处理48 h,INS-1细胞的基础胰岛素分泌量（Basal insulin secretion,BIS）和葡萄糖刺激的胰岛素分泌量（Glucose-stimulated insulin secretion,GSIS）均显着降低（P<0.01）,且INS、GLUT2和Bcl-2 m RNA的表达均显着降低（P<0.001）,Bax、Caspase3和JNK m RNA及蛋白的表达均显着升高（P<0.05）。与高糖诱导组相比,高糖作用同时加入10 nmol/L、100 nmol/L和1000nmol/L的黄体酮和17β-雌二醇干预后,均能显着增加INS-1细胞的BIS和GSIS（P<0.01）,且INS和GLUT2及Bcl-2 m RNA的表达均显着升高（P<0.05）,Bax、Caspase3和JNK m RNA及蛋白的表达均显着下降（P<0.05）。4.高脂饲料喂养联合腹腔注射STZ诱导T2DM胰岛素抵抗模型。与高脂饮食组（Ovariectomy+High-fat diet group,OH）相比,STZ组p-AMPK/AMPK、IR及GLUT4蛋白的相对表达水平显着下调（P<0.01）,p-ERK/ERK的相对表达水平显着上调（P<0.001）。与STZ组相比,皮下注射0.1 mg/kg、2 mg/kg和8 mg/kg的黄体酮能够显着上调p-AMPK/AMPK、IR及GLUT4蛋白的相对表达水平（P<0.05）。0.1 mg/kg黄体酮作用时显着下调p-ERK/ERK的相对表达水平。结论:1.黄体酮和17β-雌二醇可通过抑制糖异生作用、激活PI3K/Akt信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗;2.黄体酮和17β-雌二醇可通过抑制JNK/Caspase3信号通路保护胰岛β细胞免受高糖诱导的凋亡;3.黄体酮可通过激活AMPK、抑制ERK信号通路改善T2DM小鼠胰岛素抵抗。
张孟媛[3]（2020）在《女性雌激素和环境因素对高血压影响的研究》文中研究说明目的:（1）研究女性高血压的影响因素;（2）分析雌二醇对女性高血压的直接影响和间接影响。为女性高血压的研究与防治提供依据。方法:查阅文献并结合专家建议,自制并完善“女性高血压情况调查表”。根据调查表内容,于2018年5月-2019年11月在湖南省某三甲医院收集确诊的高血压女性和非高血压女性分别作为病例组和对照组,进行病例对照研究。调查内容:一般情况（年龄、民族、月经周期）、生活习惯（运动频率、静坐时间、睡眠时间、肉摄入频率、蛋类摄入频率、豆制品摄入频率、乳制品摄入频率、蔬菜摄入频率、坚果摄入频率、饮茶情况、饮酒情况、饮咖啡情况、吸烟情况）、体格检查指标（血压、身高、体重）、实验室检测指标（雌二醇、TG、TC、LDL-C、HDL-C、BUA、Scr、BUN、Cys C、Hcy、hs-CRP）。两组以10岁一个年龄组进行年龄频数匹配。统计分析方法如下:（1）采用单因素t检验、秩和检验、卡方检验和多因素logistic回归模型分析女性高血压影响因素;（2）采用中介效应模型和路径分析模型分析验证雌二醇对女性高血压的直接影响和间接影响。以上分析均使用SPSS20.0或AMOS实现。结果:本次研究对象总人数为618人,其中病例组291人,对照组327人,两组之间年龄保持一致。（1）雌二醇水平处于二分位区间患高血压的风险是对照的0.443倍（95%CI:0.235,0.833）,雌二醇水平处于三分位区间患高血压的风险是对照的0.272倍（95%CI:0.147,0.502）,雌二醇水平处于四分位区间患高血压的风险是对照的0.299倍（95%CI:0.0.160,0.556）;每周1-3次的运动频率患高血压病风险是基本不锻炼的0.493倍（95%CI:0.300,0.813）;每天睡眠时间8小时以上患高血压病风险是睡眠不足6小时的0.402倍（95%CI:0.190,0.853）,每天睡眠时间6-8小时患高血压病风险是睡眠不足6小时的0.621倍（95%CI:0.394,0.976）;每周2-3天的豆制品摄入频率患高血压病风险是每周0-1天的0.362倍（95%CI:0.220,0.596）,每周4-5天的豆制品摄入频率患高血压病风险是每周0-1天的0.250倍（95%CI:0.105,0.593）。Cys C≥1.09mg/L患高血压病风险是CysC<0.51mg/L的3.058倍（95%CI:1.144,8.176）;Hcy≥15μmol/L患高血压患病风险是Hcy<10μmol/L的2.751倍（95%CI:1.349,5.610）;超重时高血压患病风险是对照组的1.975倍（95%CI:1.228,3.174）,肥胖时高血压患病风险是对照组的2.638倍（95%CI:1.179,5.903）;每天静坐时间大于7小时患高血压病风险是静坐时间小于3小时的10.034倍（95%CI:3.056,32.942）;每周4-5天的蛋类摄入频率患高血压病风险是每周0-1天的2.125倍（95%CI:1.038,4.346）,每周6-7天的蛋类摄入频率患高血压患病风险是每周0-1天的2.984倍（95%CI:1.448,6.151）。（2）雌二醇对女性高血压具有直接影响（P<0.05）;雌二醇通过影响Hcy间接影响女性高血压,间接效应为-0.053（P<0.05）;雌二醇通过影响肾功能间接影响女性高血压,间接效应为-0.027（P<0.05）。结论:（1）结果提示雌二醇水平高、运动频率高、睡眠时间长、豆制品摄入频率高是女性高血压的的保护因素,Cys C水平高、Hcy水平高、BMI高、静坐时间长、蛋类摄入频率高是女性高血压的危险因素。（2）结果提示雌二醇既是女性高血压的直接保护因素,也通过抑制Hcy或保护肾功能而成为女性高血压的间接保护因素。
张丹丹[4]（2020）在《雌二醇、同型半胱氨酸与高血压相关性及雌二醇对血管内皮保护作用机制研究》文中研究指明目的:了解女性高血压流行现状及影响因素;探讨血浆雌二醇、Hcy水平对高血压的影响;探讨雌二醇水平与血管内皮损伤的相关性,并初步研究雌二醇对Hcy损伤静脉内皮细胞的保护作用机制。方法:（1）随机抽取湖南省人民医院2017年10月至2018年12月住院的502例围绝经及绝经期女性患者作为研究对象。收集所有调查对象人口学资料、体格测量指标、血浆生化指标检测等数据。用EpiData软件建立数据库对问卷数据进行录入及校验,spss19.0软件对数据进行统计分析,了解成人女性高血压流行现状及影响因素,探索雌二醇、Hcy对高血压的影响。（2）选用人脐静脉内皮细胞（Umbilical vein endothelial cells,HUVECs）,用E2β和Hcy处理。用细胞计数检测细胞增殖情况、LDH漏出率评价细胞损伤情况、亚甲基蓝染色检测细胞内源性H2S的生成、蛋白免疫印迹法（western-blot）和RT-PCR法检测CBS,CSE的表达情况,进一步验证雌二醇发挥血管内皮保护作用机制。结果:（1）本研究调查对象总共为502人,全部为围绝经及绝经期女性,年龄（65.91±10.60）岁,年龄≤60岁222人占44.2%;已绝经414人占82.5%,未绝经88人占17.5%;HHcy血症178人占35.5%,高血压患者409人占81.5%。将研究对象按照是否为高血压患者分为两组进行统计分析。（2）女性高血压单因素分析显示:高血压与非高血压人群人口学特质、体格检查和血浆生化检测指标之间年龄、绝经、BMI之间的差异具有统计学意义（P<0.05）;其中教育程度、吸烟、饮酒之间的差异不具有统计学意义（P>0.05）。（3）女性血浆雌二醇、Hcy与血压相关性分析显示:在非高血压人群中,血浆雌二醇与SBP存在着负相关（r=-0.245,P=0.011）;Hcy与SBP、DBP存在着正相关（r=0.217,P=0.036;r=0.244,P=0.018）。在高血压人群中,这些相关均消失。（4）女性高血压影响因素的Logistic回归分析显示:雌二醇、年龄、绝经事件、BMI、HDL、HHcy血症是高血压的影响因素。此外,雌二醇与年龄,BMI,Hcy,HDL间存在交互作用影响高血压事件的发生。（5）Hcy处理HUVECs会降低细胞的增殖活性,引起细胞损伤;进一步加入E2β,细胞增殖存活恢复正常,减少Hcy对人细胞造成的损伤。（6）Hcy处理HUVECs会降低CBS、CSE蛋白及mRNA表达,E2β则促进CBS、CSE蛋白及mRNA表达及H2S生成,MST-3的蛋白及mRNA表达不受影响。（7）CHH与BCA处理抑制HUVECs中CBS和CSE的表达及内源性H2S生成。抑制CBS,CSE表达,导致E2β对Hcy所诱导损伤的保护作用消失。结论:（1）年龄、绝经事件、雌二醇、BMI、HDL、HHcy血症是高血压的影响因素。其中雌二醇是高血压的保护因素,Hcy是高血压的危险因素。（2）雌二醇通过上调CBS,CSE的表达从而促进内源性硫化氢的生成,对Hcy所造成的血管内皮损伤发挥保护作用。
宋苏静[5]（2020）在《雌二醇在酸诱导的大鼠关节软骨细胞凋亡中的作用及可能机制》文中提出类风湿性关节炎（RA）是一种以滑膜炎症,软骨侵蚀和关节破坏为主要特征的慢性免疫性综合征,目前RA的治疗取得较大进步,通过一线非甾体抗炎药联合抗风湿药控制病情,虽然炎症部分已得到成功控制,但仍不能阻止RA的病情进展,疗效也还不尽人意,因此积极寻找保护软骨免受破坏和关节免受损伤的药物成为广大国内外学者的共同期待。流行病学统计发现雌激素的缺乏和代谢与类风湿性关节炎的发生和发展紧密相关。雌激素保护关节软骨损伤,在摘除卵巢的RA大鼠中,雌二醇替代疗法能够缓解局部炎症和膝关节软骨损伤。但雌二醇如何影响RA的发病进程和其发挥保护作用的机制并不清楚;酸敏感离子通道,是一类阳离子通道,在酸诱导的软骨细胞的损伤中扮演着重要的角色。前期本课题组的大量研究发现降低ASIC1a的表达和活性能明显削弱酸诱导的软骨细胞的损伤。本实验的主要目的是通过体外实验去探索雌二醇在酸诱导的大鼠关节软骨细胞损伤的作用和阐明雌二醇对ASIC1a活性和蛋白表达的影响及其可能机制;本文雌二醇均指17β-雌二醇;本课题主要包括以下:1.雌二醇对酸诱导的大鼠关节软骨损伤的作用体外实验中探索雌二醇在正常状况下对大鼠关节软骨细胞增长率的影响及在酸诱导病理条件下对软骨细胞生存率,细胞形态学改变和线粒体膜电位的变化。将正常大鼠关节软骨细胞分为正常组,500,1000,2000n M雌二醇组,雌二醇处理48小时后,MTT检测雌二醇对大鼠关节软骨细胞的存活率没有统计学意义;进一步探索雌二醇对酸诱导的大鼠关节软骨细胞存活率的影响,将原代细胞按以下分组:（1）正常组,p H6.0,p H6.0+500/1000/2000n M雌二醇组,雌二醇刺激48h后,p H6.0酸化培养基环境下处理3h,使用MTT来探索细胞的存活量;（2）正常组,p H6.0,p H6.0+雌二醇,p H6.0+ICI,p H6.0+ICI+雌二醇,雌激素受体（ERs）阻断剂ICI,雌二醇预处理后,p H6.0环境下刺激3h,细胞存活量通过MTT法来检测;（3）正常组,p H6.0,p H6.0+雌二醇,p H6.0+Pc TX1,p H6.0+Pc TX1+雌二醇组;ASIC1a特异性阻断剂Pc TX1和雌二醇预处理后,p H6.0环境下刺激3h后,MTT检测了细胞生存率。在p H6.0的条件下,雌二醇能够明显缓解酸诱导的软骨细胞的生存率;ICI187280,作为ERs阻断剂,它的预处理反转了雌二醇介导的保护作用,这初步的说明了雌二醇能够降低酸诱导的软骨细胞损伤;分别使用雌二醇,Pc TX1预处理软骨细胞后,MTT检测到两者发挥相似的酸诱导的保护作用,但联合雌二醇及Pc TX1孵育后,雌二醇并不能进一步增加Pc TX1的保护作用,这说明了ASIC1a的激活可能参与雌二醇介导的软骨保护作用;再进一步的采用细胞形态学分析和罗丹明123（Rhodamine123）染色分析了雌二醇对酸介导的软骨保护,结果发现雌二醇能够明显改善酸化导致的软骨细胞形态的皱缩和线粒体完整性的破坏。总之,这些功能的检测均表明了雌二醇降低酸诱导的软骨损伤。2.雌二醇在大鼠关节软骨细胞中对ASIC1a蛋白表达和活性的影响采用不同浓度雌二醇处理大鼠关节软骨细胞72h后,Western blotting和Q-PCR分别检测ASIC1a蛋白和基因转录,并且确定了雌二醇降低ASIC1a蛋白表达的最佳浓度,以1000n M雌二醇分别刺激软骨细胞24,48,72h后,Western blotting和Q-PCR检验ASIC1a的蛋白和基因转录,以最佳浓度1000n M孵育72h后,免疫荧光法和激光共聚焦技术分别探索了雌二醇对ASIC1a蛋白表达和活性的影响。以上结果共同确定了雌二醇能够降低ASIC1a的蛋白表达和活性,而对ASIC1a的基因转录并没有影响。3.雌二醇降低ASIC1a的蛋白表达的机制联合蛋白合成酶抑制剂CHX和雌二醇联合孵育软骨细胞一定时间后,ASIC1a的蛋白表达较CHX组,明显降低,这初步的说明了雌二醇促进ASIC1a的蛋白降解;进一步的使用蛋白酶体抑制剂MG-312,钙蛋白酶抑制剂ALLN后,对雌二醇介导的ASIC1a的蛋白降低并没有影响,而使用溶酶体CQ和自噬抑制剂3-MA阻断自噬溶酶体途径后,能够明显翻转雌二醇诱导的ASIC1a蛋白降解,这进一步的说明了雌二醇通过自噬溶酶体途径促进ASIC1a的蛋白降解;同时,结果也表明了雌二醇增加了Beclin-1和LC3-Ⅱ的蛋白表达,而CQ预处理后,雌二醇显着增加了Beclin-1和LC3-Ⅱ的表达;免疫荧光也证明了雌二醇激活LC3的这一现象;这些结果说明了雌二醇激活自噬并且自噬溶酶体途径参与雌二醇介导的ASIC1a的蛋白降解过程;4.雌激素受体在雌二醇介导的ASIC1a蛋白降低中的作用将原代软骨细胞分为正常组,雌二醇,雌激素受体（ERs）阻断剂ICI,ICI+雌二醇组,Western blot检测ASIC1a的蛋白表达,结果表明了雌二醇对ASIC1a的降低作用被ICI阻断;采用雌激素受体ERα,ERβ,GPR30的特异性阻断剂MPP,PHTPP,G15预处理,雌二醇进一步的孵育,结果表明只有ERα阻断剂MPP产生了更显着的逆转作用。此外,si RNA沉默ERα后,显着提高了雌二醇介导的ASIC1a蛋白降低。这些结果表明,ERα而不是ERβ或GPR30参与雌二醇诱导的ASIC1a蛋白降解。5.雌二醇对酸化条件下大鼠关节软骨细胞凋亡的作用将正常离体软骨细胞分为Control,p H6.0,p H6.0+雌二醇组,p H6.0+Pc TX1组,四组经过一定的预处理后,流式细胞术和Hoechst染色分别检测了酸诱导的软骨细胞的凋亡率和细胞核的改变,为了进一步评估雌二醇对软骨细胞凋亡的影响,采用雌二醇预处理后,Western blot结果显示雌二醇能够降低酸诱导的Caspase-9和PARP的高表达,ERs阻滞剂1μM ICI预处理后反转了雌二醇这一作用;结果说明了雌二醇能够降低酸介导的软骨细胞的凋亡;ASIC1a的激活可能参与细胞的凋亡。我们发现Pc TX1,一种ASIC1a的特异性抑制剂,对细胞凋亡具有较好的抑制作用,表明ASIC1a激活与酸诱导的软骨细胞凋亡有关。为了进一步证实雌激素介导的保护作用与ASIC1a诱导的软骨细胞凋亡之间的关系,与Pc TX1相比,将Pc TX1和雌二醇联合共孵育后,Western blot结果显示雌二醇并不能进一步的增加Pc TX1降低ASIC1a,Caspase-9及PARP的水平,这些数据表明雌二醇通过ASIC1a通道的表达抑制酸诱导的软骨细胞凋亡。综上所述,这些结果表明雌二醇降低了ASIC1a水平,并负责酸介导的软骨细胞保护。初步实验结果表明雌二醇预处理后能够缓解大鼠关节软骨损伤,抑制凋亡和改善线粒体功能;进一步的研究发现,雌二醇通过自噬溶酶体途径降低ASIC1a蛋白表达,从而削弱酸诱导的大鼠关节软骨细胞损伤,并通过与雌激素受体ERα结合诱发ASIC1a蛋白降解。总之,这些结果表明雌二醇通过下调ASIC1a蛋白表达来减弱关节破坏,表明了雌二醇靶向ASIC1a有望成为治疗RA的有效靶点。
殷乐章[6]（2019）在《伪原薯蓣皂苷对OVX诱导的apoE-/-小鼠心脏功能损伤的保护作用》文中研究指明目的:探讨伪原薯蓣皂苷（PPD）对双侧卵巢切除（OVX）诱导的载脂蛋白E基因敲除(apoE-/-)小鼠心脏功能损伤的保护作用。方法:（1）选取8周龄,SPF级,雌性,apoE-/-C57BL/6J小鼠,OVX前进行为期一周（第0周）的稳定,稳定期间给予正常饮食和水,小鼠自由进食。在第1周将小鼠随机分为假手术组（Sham组）、OVX模型组（OVX组）、OVX后给予高剂量PPD组（OVX+PPD 1组）、OVX后给予中剂量PPD组（OVX+PPD 2组）、OVX后给予低剂量PPD组（OVX+PPD 3组）和OVX后给予17β-雌二醇（E2）组（OVX+E2组）,每组8只。PPD溶解于DMSO制成储备液,存放与冰箱-20℃备用。三溴乙醇（8 ml/kg）麻醉后取卧位固定,酒精擦拭消毒,在背部肋缘下中线左右两侧1 cm处,纵向切口1 cm,找到被脂肪组织包绕的红褐色卵巢,结扎子宫角后予以双侧卵巢切除,缝合伤口。Sham组除不切除卵巢和结扎子宫角外其余步骤均与OVX组相同。之后给予高胆固醇饮食（1.25%胆固醇）,为期12周。在最后4周,隔天给予:（1）Sham组:腹腔注射（i.p.）含0.1%DMSO的生理盐水;（2）OVX组:腹腔注射（i.p.）含0.1%DMSO的生理盐水;（3）OVX+PPD1组:腹腔注射（i.p.）4 mg/kg的PPD;（4）OVX+PPD2组:腹腔注射（i.p.）2 mg/kg的PPD;（5）OVX+PPD3组:腹腔注射（i.p.）1 mg/kg的PPD;（6）OVX+E2组:肌肉注射（i.m.）0.5 mg/kg的E2。第13周停止给药。（2）小鼠心脏取血,制备血浆,酶标仪波长510 nm处测定吸光度值,测定血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）含量。（3）结合TC、TG检测结果,以2 mg/kg为PPD最佳给药剂量,进行后续实验。小鼠麻醉后,右前肢连接负极（-）,左后肢连接正极（+）,开启生物信号采集系统监测,用心电记录Ⅱ导联心电图,检测时间持续30 min（截取部分）,获得P-R间期、QRS间期、R波及心率的数据。（4）小鼠麻醉后,用电动理发器进行整个胸腹部剃毛,为了保证毛发除尽,使用脱毛膏二次涂抹剃毛。胸腹部皮肤酒精擦拭消毒后,固定于超高分辨率小动物超声仪,选择RMV7078探头进行超声心动监测。探头切迹朝向小鼠头部位置,逆时针旋转30°至45°,获得心脏胸骨旁长轴切面EKV,存成动画形式,进行描记测量。检测左心室舒张期内径（LVIDd）、左心室收缩期内径（LVIDs）、舒张期间内室间隔（IVSd）、收缩期间内室间隔（IVSs）、舒张末期容积（EDV）、收缩末期容积（ESV）、舒张期后壁厚度（PWTd）、收缩期后壁厚度（PWTs）、射血分数（EF）、左室短轴缩短率（FS）。（5）进行开胸手术取出心脏,测量心脏湿重,拍摄心脏照片。（6）检测血浆中超低密度脂蛋白胆固醇/中间密度脂蛋白胆固醇（VLDL-C/IDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）浓度。酶标仪波长450nm处测定VLDL-C/IDL-C吸光度值,546 nm处测定LDL-C、HDL-C吸光度值。（7）实时定量RT-PCR法检测心房利钠因子（ANF）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）的mRNA表达水平。使用Trizol试剂分离总RNA,PrimeScript?RT Master Mix试剂盒合成cDNA。之后进行实时聚合酶链反应。使用荧光定量PCR分析软件Applied Biosystems Primer Express Software（version 2.0）进行分析。结果:（1）不同剂量PPD和E2给药4周后血脂浓度结果显示,与Sham组相比,OVX组小鼠血浆中TC浓度并没有显着差异,TG含量增加,增加45.57%（P<0.05）。给予不同剂量PPD后,OVX+PPD1组与OVX组相比TC浓度显着降低（P<0.05）,TG浓度无显着性降低;OVX+PPD2组与OVX组相比TC浓度显着降低,降低了26.94%（P<0.05）,TG浓度显着降低,降低了69.12%（P<0.05）;OVX+PPD3组与OVX组相比TC、TG浓度均无显着性降低。PPD（2 mg/kg）作用与E2类似。（2）超声心动图数据显示,与Sham组相比,OVX组小鼠的LVIDd、LVIDs、IVSd、IVSs分别升高了6.67%、4.31%、5.19%、17.24%;与OVX组相比,OVX+PPD组小鼠LVIDd和LVIDs分别降低了10.25%和16.12%（P<0.05）,而IVSd和IVSs分别升高了9.88%和5.88%。与Sham组相比,OVX组小鼠EDV、ESV分增加11.11%和9.54%（P<0.05）;PPD则能抑制OVX对二者的影响,使其较OVX组小鼠分别降低19.99%和31.53%（P<0.05）。而对于PWTd、PWTs、EF、FS等指标OVX+PPD组分别较OVX组增加了15.87%、7.89%、6.09%、11.21%。（3）心电图检测结果显示,与Sham组相比,OVX组小鼠心率降低42.80%（P<0.05）,而PPD则能抑制OVX对心率的影响,心率增加了75.94%（P<0.05）;对于P-R间期和QRS间期,与Sham组相比,OVX组的P-R间期和QRS间期分别增高了14.52%和47.62%（P<0.05）,PPD则能抑制OVX对二者的影响,使P-R间期和QRS间期分别较OVX组降低了19.72%和41.94%（P<0.05）。（4）四组小鼠的心脏,称量湿重,用解剖显微镜观察并拍摄照片。与Sham组相比,OVX组小鼠的心脏重量显着增加（P<0.05）。给予PPD后,与OVX组相比,小鼠的心脏重量的增加有所逆转（P<0.05）。（5）小鼠血浆中载脂蛋白含量显示与Sham组相比,OVX组小鼠血浆中载脂蛋白（VLDL-C/IDL-C、LDL-C、HDL-C）浓度并没有显着差异。但给予PPD后,与OVX组相比血浆中VLDL-C/IDL-C浓度显着降低40.87%（P<0.05）,LDL-C和HDL-C浓度降低,分别降低4.56%和21.74,但并无显着性差异。（6）实时定量RT-PCR结果显示,与Sham组相比,OVX显着增加了apoE-/-雌鼠TNF-α、IL-1β、IL-6、ANF的mRNA水平（P<0.05）;而给予PPD后这种升高作用明显降低,与OVX组相比,TNF-α、IL-1β、IL-6、ANF的mRNA表达水平分别降低了54.43%、51.29%、21.05%、34.98%（P<0.05）。结论:（1）使用1、2、4 mg/kg的PPD,对OVX引起的血脂含量的紊乱起到了不同程度的逆转作用,由于中剂量（2 mg/kg）PPD效果最为显着,与E2作用效果最相似,因此我们确定2 mg/kg PPD为最佳给药剂量,以进行接下来的研究。（2）由超声心动及心电图数据可知,建模后长期高胆固醇饮食导致小鼠心脏压力超负荷,心脏的结构和功能出现异常,造成了小鼠代偿性心肌肥厚。而给予PPD后小鼠心率和心脏兴奋的紊乱得到了改善,心房开始兴奋到心室开始兴奋所需的时间和两个心室兴奋传播过程的电位变化时间缩短,心脏壁厚度和内室间隔明显减小,心肌收缩能力增强,心脏每搏输出血量增多,与给予E2也显示出类似的效果。由此证明PPD能有效缓解OVX后胆固醇饮食诱导的心脏功能的损伤。（3）小鼠OVX对VLDL-C/IDL-C、LDL-C、HDL-C的影响并不具有显着性差异,虽然PPD和E2都能显着下调VLDL-C/IDL-C,但也无法明确的解释其是如何调控血浆载脂蛋白以达到心脏保护作用的。因此,PPD对心脏损伤的缓解作用可能无法用血浆载脂蛋白来解释。（4）OVX后炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β及心肌细胞肥大标志物ANF的mRNA表达水平异常升高,而PPD则能有效的降低其mRNA表达水平,作用与E2相似,考虑PPD通过消炎作用逆转OVX的心脏损伤作用。总之,PPD对OVX诱导的apoE-/-小鼠心脏功能损伤具有保护作用。
杨迪[7]（2019）在《高糖环境下17β-雌二醇抑制大鼠髓核细胞凋亡和促进胞外基质合成的作用及初步机制探讨》文中研究说明椎间盘退变（intervertebral disc degeneration,IVDD）性疾病在临床上发病率高,是导致成人劳动力受限的主要原因,给社会造成巨大的经济负担。糖尿病（diabetes mellitus,DM）患者与非DM患者相比IVDD患病率显着升高,椎间盘内的高糖环境通过氧化应激（oxidative stress,OS）损伤引起髓核细胞（nucleus pulposus cells,NPCs）数目减少、细胞外基质（extracellular matrix,ECM）合成降解代谢紊乱是引起IVDD的因素之一。近年研究发现雌激素不但可以刺激胰岛素分泌改善胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）而且部分抑制NPCs凋亡,但是迄今尚未见关于17β-雌二醇（17β-estradiol,17β-E2）与高糖诱导NPCs凋亡相关方面的报道,因此,本实验首先通过胰酶联合Ⅱ型胶原酶体外分离培养并鉴定大鼠原代NPCs;再者探讨17β-E2对高糖环境下大鼠NPCs凋亡及ECM合成代谢的影响并揭示其可能的机制,另外明确雌激素受体β（estrogen receptor β,ERβ）在其中的介导作用。第一部分 原代大鼠髓核细胞的体外分离培养及鉴定目的:原代大鼠NPCs体外分离培养及鉴定。方法:通过胰酶联合Ⅱ型胶原酶体外分离大鼠原代NPCs并传代;通过聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增产物电泳检测NPCs标志物基因碳酸酐酶12（carbonic anhydrase 12,CA12）、叉头框F1（forkhead box F1,FOXF1）、多效生长因子（pleiotrophin,PTN）,免疫细胞化学染色聚集蛋白聚糖（aggrecan,AGG）和Ⅱ型胶原（collagen Ⅱ,Col Ⅱ）及性别决定区Y高迁移率族蛋白盒9（Sry-type HMG box 9,SOX9）来鉴定大鼠原代NPCs。结果:成功分离培养、鉴定原代大鼠NPCs并传代。结论:通过细胞形态学、新型标志物基因、胞外基质标志蛋白及SOX9成功鉴定了NPCs。第二部分17β-雌二醇对高糖环境下的大鼠髓核细胞凋亡及胞外基质合成的影响目的:离体试验中探讨17β-E2对高糖环境下大鼠NPCs凋亡及ECM合成代谢的影响,并探讨ERβ在其中的介导作用。方法:原代NPCs传代,取第2代NPCs随机分为四组:高糖组（HG组,培养基中含有0.2 M葡萄糖）、高糖+17E2组（HG+17E2组,培养基中含有0.2 M葡萄糖+10-7M 17β-E2）、高糖+17E2+ERB041 组（HG+17E2+ERB041 组,培养基中含有0.2 M 葡萄糖+10-7M 17β-E2+10 的 ERB041）、高糖+17E2+PHTPP 组（HG+17E2+PHTPP组,培养基中含有0.2 M葡萄糖+10-7M 17β-E2+1μM的PHTPP）;干预72小时后,采用1)Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡;2)实时荧光定量PCR（real-time polymerase chain reaction,RT-PCR）检测凋亡相关因子（Bcl-2、Bax、Caspase-3）的基因表达;3)Western blot 检测凋亡相关蛋白（Cleaved caspase-3、Cleaved PARP）细胞中的表达;4)RT-PCR检测ECM Col Ⅱ和AGG基因表达;5)免疫细胞化学染色检测ECM Col Ⅱ及AGG的蛋白表达。结果:高糖状态下大鼠NPCs凋亡率增加,ECM Col Ⅱ及AGG合成代谢减少;17β-E2干预后可以减少高糖状态下的大鼠NPCs的凋亡率,下调促凋亡因子（Bax、Caspase-3）基因表达,上调抗凋亡因子（Bcl-2）基因表达,降低凋亡相关蛋白（Cleaved caspase-3、Cleaved PARP）在细胞中的表达;增加ECM Col Ⅱ及AGG基因表达及蛋白表达;联合使用ER β受体激动剂ERB041及17β-E2较单用17β-E2进一步减少了高糖状态下NPCs凋亡率,下调促凋亡因子（Bax、Caspase-3）基因表达,上调抗凋亡因子（Bcl-2）基因表达,降低凋亡相关蛋白（Cleaved caspase-3、Cleaved PARP）在细胞中的表达;进一步增加了 ECM Col Ⅱ及AGG的合成代谢,联合使用ERβ受体抑制剂PHTPP及17β-E2较单用17β-E2增加了高糖状态下NPCs凋亡率,上调了促凋亡因子（Bax、Caspase-3）基因表达,下调了抗凋亡因子（Bcl-2）基因表达,增加了凋亡相关蛋白（Cleaved caspase-3、Cleaved PARP）在细胞中的表达;减弱了 ECM Col Ⅱ及AGG的合成代谢。结论:高糖状态下大鼠NPCs凋亡增加,ECM Col Ⅱ及AGG合成代谢减弱;17β-E2可通过ER β介导降低高糖状态下的大鼠NPCs的凋亡率,增加ECM Col Ⅱ及AGG的合成代谢。第三部分17β-雌二醇通过雌激素受体β介导抑制高糖状态下大鼠髓核细胞内氧化应激损伤目的:观察17β-E2对高糖环境下大鼠NPCs内活性氧（reactive oxygen species,ROS）的影响,并明确其与ER β的相关性。方法:取第2代NPCs随机分为四组:高糖组（HG组,培养基中含有0.2 M葡萄糖）、高糖+17E2组（HG+17E2组,培养基中含有0.2 M葡萄糖+10-7M 17β-E2）、高糖+17E2+ERB041组（HG+17E2+ERB041组,培养基中含有0.2 M葡萄糖+10-7 M 17β-E2+10 μM 的 ERB041）、高糖+17E2+PHTPP 组（HG+17E2+PHTPP 组,培养基中含有0.2 M葡萄糖+10-7M 17β-E2+1 μM的PHTPP）;干预72小时后,采用DCFH-DA法检测各组细胞内ROS水平。结果:各组细胞内ROS检测结果提示:HG+17E2组细胞内ROS水平低于HG组（P<0.05）,HG+17E2+ERB041 组细胞内 ROS 水平低于 HG+17E2 组（P<0.05）,HG+17E2+PHTPP 组细胞内 ROS 水平高于 HG+17E2组（P<0.05）。结论:17β-E2可降低高糖状态下大鼠NPCs内ROS水平,ER β介导这一过程发生。
刘雅梦[8]（2018）在《17β-雌二醇对小鼠胸腺上皮细胞增殖影响的转录组学与蛋白组学分析》文中提出胸腺是产生T淋巴细胞的中枢免疫器官,在机体免疫中占有非常重要的地位。胸腺细胞和胸腺上皮细胞（TECs）是构成胸腺实质的两种主要细胞类型。特别是TECs,其构成胸腺细胞发育所必须的独特的三维网状胸腺微环境,维持T细胞的分化成熟。研究表明,胸腺随着年龄的增长而逐渐退化与TECs网状微环境的破坏有密切关系。另外,包括雌激素在内的甾体激素是促进胸腺退化的关键因素。TECs是雌激素重要的靶作用位点,因为TECs上富含雌激素受体α（ERα）,但关于雌激素作用于TECs的机制还未研究透彻。因此,研究雌激素对TECs的相关作用机制对揭示胸腺退化萎缩具有重要的意义。本文以小鼠胸腺上皮细胞株MTEC1为研究对象,采用CCK-8、荧光染色、流式细胞术、实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹等实验方法及转录组测序和iTRAQ定量蛋白组学技术并对数据进行GO、KEGG、String等生物信息学分析,探讨17β-雌二醇对MTEC1细胞增殖活力、细胞周期、细胞凋亡、转录组表达谱及蛋白质表达谱等影响及机制研究,得到如下结果:（1）17β-雌二醇以剂量依赖的方式影响MTEC1细胞,包括改变细胞形态,抑制细胞增殖,诱导细胞周期阻滞于G2/M期,以及导致细胞凋亡。（2）17β-雌二醇可引起MTEC1细胞的mRNA表达谱变化,特别引起细胞周期、细胞凋亡基因发生显着性变化,其可能通过p53信号通路调控细胞增殖抑制与细胞凋亡。（3）17β-雌二醇可导致MTEC1细胞的蛋白质表达谱发生变化,包括GRP78、PDI、Calr等内质网应激相关蛋白在内的61个上调差异表达蛋白和10个下调差异表达蛋白。这些差异表达蛋白主要涉及到细胞增殖、细胞凋亡、免疫反应等细胞生理过程。推测内质网应激通路介导17β-雌二醇诱导MTEC1发生细胞凋亡。结论:17β-雌二醇可引起MTEC1细胞的基因组和蛋白组表达变化,改变细胞内环境稳态,主要通过p53信号通路和内质网应激通路参与调控细胞增殖活力并诱导细胞凋亡。
宋亚琼,赵平[9]（2010）在《雌激素与神经保护的研究进展》文中研究表明近年研究表明,雌激素是神经系统中一种重要的信号分子,在促进神经生长发育、可塑性、神经递质的合成乃至神经元的存活、髓鞘和轴突再生过程中起着重要作用。特别是雌激素在中风、老年性痴呆、帕金森病等中枢神经系统退行性疾病以及脊髓、坐骨神经损伤、急性脑出血、脑缺血、神经外伤等方面备受关注。但是关于雌激素在神经干细胞移植术、视神经损伤疾病中作用的报道还很少。我们就雌激素对神经的保护作用做一综述。
郝群[10]（2004）在《补肾宁心方合并DHEA对去势雌兔动脉粥样硬化的防治作用》文中研究说明背景:妇女进入围绝经期,由于体内雌激素的锐减,心血管功能发生明显变化,特别是动脉粥样硬化症（atherosclerosis,AS）的发病率逐渐接近男性。虽然部分临床及基础研究结果显示雌激素对于绝经后妇女的心血管功能具有一定的保护作用,然而根据2002年WHI一项激素替代疗法（HRT）试验的中期试验结果,已不再将心血管病的预防作为HRT的适应证。因此开发我国国粹—中药可能成为治疗围绝经期病症的有效途径。近年来, 脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）引起了医学界的广泛注意,尤其是其抗衰老作用越来越引起人们的重视。适当补充DHEA对于延缓衰老,改善与衰老相关的疾病,如改善心血管和免疫功能,变得尤为重要。目的:本实验通过建立去势雌兔动脉粥样硬化模型,探讨雌激素、DHEA以及补肾宁心中药复方对去势雌兔动脉粥样硬化的形成、体内其他器官如肝脏、子宫以及免疫功能的影响。同时建立血管内皮细胞体外损伤模型,进一步研究雌激素、DHEA以及补肾宁心中药血清对血管内皮细胞损伤的保护作用;以及雌激素、DHEA和补肾宁心方中药血清对内皮-单核细胞之间相互作用的影响及其作用机制,拟为中西医结合防治女性绝经后动脉粥样硬化提供实验依据。方法:利用动物实验、原代细胞培养、流式细胞仪、扫描和透射电镜、酶联免疫吸附法、免疫组织化学及半定量的逆转录-聚合酶链反应等多种方法对雌激素、DHEA以及补肾宁心中药复方对去势雌兔动脉粥样硬化形成、体内其他器官如肝脏、子宫和免疫功能的影响以及对血管内皮细胞损伤的保护作用、对内皮-单核细胞之间相互作用的影响进行了体内与体外的研究。结果:（1 ）与未用药的去势对照组相比,雌激素可降低去势雌兔血清甘油三酯（TG）水平,但对血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）无明显影响。DHEA和补肾宁心中药复方对去势雌兔血脂无明显影响。（2）雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA干预后动物的<WP=7>主动脉粥样硬化斑块面积与内膜面积比值,内膜中膜厚度比、面积比显着低于未用药的去势对照组;雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA均能显着减轻主动脉病理损害,降低血管内皮细胞血管细胞粘附分子（VCAM-1）的表达。（3）与未用药的去势对照组相比,雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA均可显着升高血清NO水平。（4）动物去势后血清雌二醇水平明显下降;苯甲酸雌二醇可显着升高去势雌兔血清雌二醇水平;补肾宁心方无影响,而DHEA可略微升高去势雌兔血清雌二醇水平。苯甲酸雌二醇显着下调血管内皮细胞雌激素受体的表达,补肾宁心中药复方或（和）DHEA可上调雌激素受体表达水平。（5）经雌激素作用后,去势雌兔子宫内膜增生明显,而DHEA以及补肾宁心中药复方对子宫内膜无明显影响。（6）与去势对照组相比,雌激素、补肾宁心中药复方以及DHEA均可减轻肝脏的脂肪沉积。（7）补肾宁心方,尤其是DHEA对去势雌兔的免疫功能有促进作用,且使脾脏免疫活性细胞在mRNA转录水平,由Th2型（IL-10） 向Th1型（IL-2）偏移;而雌激素无此作用。（8）建立血管内皮细胞损伤模型,氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）显着抑制内皮细胞合成NO、促进丙二醛生成并促进内皮细胞凋亡;显着升高内皮细胞条件培养基中MCP-1含量,同时ox-LDL显着增强单核U937细胞与内皮细胞之间的相互粘附,明显促进内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1以及E-选择素的表达,且在内皮细胞条件培养基作用下单核U937细胞CCR2、LFA-1以及VLA-4mRNA水平明显升高。如在试验体系中加入雌激素、DHEA或灌服补肾宁心方的动物血清, 则内皮细胞NO合成增多、丙二醛生成减少,内皮细胞的凋亡率下降;同时内皮细胞条件培养基中MCP-1含量下降,单核U937细胞与内皮细胞粘附率明显下降,内皮细胞表面ICAM-1、VCAM-1或E-选择素的表达下调;且在条件培养基作用下单核U937细胞CCR2、LFA-1以及VLA-4mRNA水平明显下调。结论:（1）补肾宁心中药复方以及脱氢表雄酮均可减轻动脉粥样硬化早期病理改变,预防和减少动脉粥样硬化的形成。（2）脱氢表雄酮以及补肾宁心方含药血清具有抑制炎症的作用,通过抑制内皮细胞分泌MCP-1,降低内皮细胞表面粘附分子ICAM-1、VCAM-1的表达从而下调单核细胞相应受体CCR2、LFA-1以及VLA-4的表达,阻止内皮细胞对单核细<WP=8>胞的趋化以及之间的相互粘附,保护内皮细胞,延缓动脉粥样硬化的发生发展。（3）补肾宁心中药复方尤其是DHEA对去势雌兔的免疫功能有促进作用,且使脾脏免疫活性细胞的细胞因子转录由Th2 向Th1偏移。DHEA与补肾宁心中药复方合并使用,对血管内皮细胞损伤的具有保护作用,对防治围绝经期妇女动脉粥样硬化症的发生与发展具有积极意义。
二、17β-雌二醇对脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、17β-雌二醇对脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用（论文提纲范文）
（1）二仙含药血清通过雌激素受体抑制Ox-LDL诱导的冠状动脉平滑肌细胞增殖（论文提纲范文）
| 英文缩写 |
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 统计学方法 |
| 第三章 结果 |
| 1 倒置显微镜观察二仙含药血清对 Ox-LDL 诱导的平滑肌细胞形态学影响 |
| 2 CCK-8 法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞增殖活性的影响 |
| 3 流式细胞术检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞中钙离子水平的影响 |
| 4 荧光PCR法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞GPER30、ERK1/2、AKT mRNA表达水平的影响 |
| 5 ELISA法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞GPER30、ERK1/2、AKT等蛋白表达的影响 |
| 6 Western blot法检测二仙含药血清对Ox-LDL诱导的平滑肌细胞GPER30、ERK1/2、AKT等蛋白表达的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述:二仙及其代谢产物治疗冠状动脉疾病相关性研究 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 研究生期间科研成果 |
（2）黄体酮和17β-雌二醇对胰岛素抵抗的干预作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 糖尿病 |
| 1.2 胰岛素抵抗的发生机制 |
| 1.2.1 葡萄糖转运体GLUTs与胰岛素抵抗 |
| 1.2.2 MAPK与胰岛素抵抗 |
| 1.2.3 Akt与胰岛素抵抗 |
| 1.3 胰岛β细胞与糖尿病 |
| 1.3.1 胰岛β细胞的增殖减少 |
| 1.3.2 胰岛β细胞的凋亡 |
| 1.3.3 胰岛β细胞功能受损 |
| 1.4 黄体酮与胰岛素抵抗 |
| 1.5 雌激素与胰岛素抵抗的关系 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 细胞株和实验动物 |
| 2.1.2 仪器及药品 |
| 2.1.3 实验相关试剂配制方法 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 细胞培养 |
| 2.2.2 细胞复苏与传代培养 |
| 2.2.3 细胞的冻存 |
| 2.2.4 胰岛素抵抗模型的建立 |
| 2.2.5 葡萄糖含量测定 |
| 2.2.6 MTT实验 |
| 2.2.7 油酸诱导细胞脂肪变性及油红染色 |
| 2.2.8 葡萄糖刺激胰岛素分泌实验 |
| 2.2.9 ELISA实验 |
| 2.2.10 BCA法测定总蛋白浓度 |
| 2.2.11 RT-qPCR实验 |
| 2.2.12 Western Blot实验 |
| 2.2.13 2 型糖尿病胰岛素抵抗小鼠模型的建立 |
| 2.2.14 统计学数据分析 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 黄体酮和17β-雌二醇对HepG2细胞胰岛素抵抗作用的影响 |
| 3.1.1 HepG2 细胞形态学观察 |
| 3.1.2 黄体酮和17β-雌二醇对HepG2细胞存活率的影响 |
| 3.1.3 黄体酮和 17β-雌二醇对HepG2细胞G6Pase和 PEPCK mRNA表达的影响 |
| 3.1.4 黄体酮和 17β-雌二醇对HepG2细胞SCD-1和SREBP-1 mRNA表达的影响 |
| 3.1.5 黄体酮和17β-雌二醇对HepG2细胞内脂质堆积的影响 |
| 3.1.6 胰岛素对HepG2 细胞存活率的影响及胰岛素抵抗细胞模型的建立 |
| 3.1.7 黄体酮和17β-雌二醇对胰岛素抵抗HepG2细胞G6Pase和 PEPCK mRNA表达的影响 |
| 3.1.8 黄体酮和雌二醇对胰岛素抵抗HepG2细胞p38 MAPK和 Akt mRNA表达的影响 |
| 3.1.9 黄体酮和17β-雌二醇对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖转运蛋白mRNA表达的影响 |
| 3.2 黄体酮和17β-雌二醇对高糖作用下INS-1细胞的保护作用及胰岛素分泌的影响 |
| 3.2.1 INS-1细胞形态学观察 |
| 3.2.2 黄体酮和17β-雌二醇对INS-1细胞增殖的影响 |
| 3.2.3 黄体酮和17β-雌二醇对INS-1细胞胰岛素分泌作用的影响 |
| 3.2.4 黄体酮和17β-雌二醇对高糖作用下INS-1细胞胰岛素分泌作用的影响 |
| 3.2.5 黄体酮和17β-雌二醇对高糖作用下INS-1细胞GLUT2和INS mRNA表达的影响 |
| 3.2.6 黄体酮和17β-雌二醇对高糖作用下INS-1细胞Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响 |
| 3.2.7 黄体酮和17β-雌二醇对高糖作用下INS-1细胞Bax和Bcl-2蛋白相对表达水平的影响 |
| 3.2.8 黄体酮和17β-雌二醇对高糖作用下INS-1细胞Caspase3和JNK mRNA表达的影响 |
| 3.3 黄体酮对2 型糖尿病小鼠肝脏组织中AMPK信号通路的影响 |
| 3.3.1 黄体酮对2型糖尿病小鼠肝脏组织中p-AMPK/AMPK相对表达水平的影响 |
| 3.3.2 黄体酮对2型糖尿病小鼠肝脏组织中p-ERK/ERK相对表达水平的影响 |
| 3.3.3 黄体酮对2型糖尿病小鼠肝脏组织中胰岛素受体(IR)蛋白相对表达水平的影响 |
| 3.3.4 黄体酮对2型糖尿病小鼠肝脏组织中GLUT4蛋白相对表达水平的影响 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 黄体酮和17β-雌二醇对糖异生的抑制作用 |
| 4.2 黄体酮和17β-雌二醇对葡萄糖转运的调节作用 |
| 4.3 黄体酮和17β-雌二醇对高糖作用下INS-1细胞的干预作用 |
| 4.3.1 黄体酮和17β-雌二醇通过保护胰岛β细胞功能免受高糖损伤 |
| 4.3.2 黄体酮和17β-雌二醇通过抑制JNK/Caspase3 信号通路保护INS-1细胞免受高糖诱导的凋亡 |
| 4.3.3 黄体酮和17β-雌二醇上调胰岛β细胞胰岛素合成与分泌功能相关基因 |
| 4.4 黄体酮对2 型糖尿病小鼠肝脏组织中AMPK信号通路的影响 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 缩略词表 |
| 硕士期间撰写和参与发表的文章 |
| 参与课题 |
| 致谢 |
（3）女性雌激素和环境因素对高血压影响的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 主要英文缩略词表 |
| 1.前言 |
| 1.1 选题背景 |
| 1.2 高血压的相关研究 |
| 1.3 女性雌激素的相关研究 |
| 1.4 本课题研究目的及意义 |
| 2.研究对象与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.1.1 对象来源 |
| 2.1.2 纳入和排除标准 |
| 2.1.3 样本量估算 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 调查表制定 |
| 2.2.2 资料收集 |
| 2.2.3 资料处理 |
| 2.2.4 中介效应及路径分析 |
| 2.2.5 统计分析 |
| 2.3 质量控制 |
| 2.4 技术路线图 |
| 3.结果 |
| 3.1 研究对象特征描述 |
| 3.1.1 研究对象一般情况及生活习惯 |
| 3.1.2 研究对象的实验室指标特征 |
| 3.2 女性高血压影响因素单因素分析 |
| 3.3 女性高血压影响因素的多因素回归分析 |
| 3.3.1 变量的共线性检验 |
| 3.3.2 多因素logistic回归分析 |
| 3.4 Hcy和 Cys C在雌二醇影响高血压中的中介作用 |
| 3.5 雌二醇对高血压影响的路径 |
| 3.6 稳健性检验 |
| 4.讨论 |
| 4.1 女性高血压影响因素 |
| 4.2 雌二醇对女性高血压的影响 |
| 4.2.1 雌二醇对女性高血压的直接影响 |
| 4.2.2 雌二醇对女性高血压的间接影响 |
| 4.3 稳健性检验 |
| 4.4 本研究的创新点与局限性 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间的研究成果 |
（4）雌二醇、同型半胱氨酸与高血压相关性及雌二醇对血管内皮保护作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 主要英文缩略词简表 |
| 第一部分 :雌二醇、同型半胱氨酸与高血压相关性研究 |
| 第1章 前言 |
| 第2章 研究对象与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.1.1 对象选择 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.2.1 人体测量和实验室检测 |
| 2.2.2 疾病定义 |
| 2.3 数据统计分析 |
| 2.4 质量控制 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 研究人群基本特征 |
| 3.2 女性高血压影响因素的单因素分析 |
| 3.3 女性高血压患者雌二醇水平情况分析 |
| 3.3.1 不同年龄及血压分组研究对象血浆雌二醇水平差异 |
| 3.3.2 不同HHcy及血压分组研究对象血浆雌二醇水平差异 |
| 3.4 血浆雌二醇、Hcy与血压之间的相关性 |
| 3.4.1 女性血浆雌二醇与血压之间的相关性 |
| 3.4.2 女性Hcy与血压之间的相关性 |
| 3.5 女性高血压影响因素多因素分析 |
| 3.5.1 女性高血压影响因素的多元Logistic回归分析 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 高血压事件的影响因素 |
| 4.2 E_2与Hcy与高血压事件之间的相关性 |
| 4.3 雌二醇对女性高血压的影响 |
| 4.4 研究的局限性 |
| 第5章 结论 |
| 第二部分 :雌二醇对血管内皮保护作用机制的研究 |
| 第1章 前言 |
| 第2章 研究对象与方法 |
| 2.1 研究设计 |
| 2.2 材料 |
| 2.2.1 试验细胞 |
| 2.2.2 药品及试剂 |
| 2.2.3 主要仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 细胞培养 |
| 2.3.2 实验分组和处理 |
| 2.3.3 细胞增殖与形态检测 |
| 2.3.4 LDH释放量的检测 |
| 2.3.5 Real-time PCR方法检测mRNA的表达水平 |
| 2.3.6 Western-Blot方法细胞中蛋白质的表达 |
| 2.3.7 抑制剂处理 |
| 2.3.8 亚甲基蓝显色法检测H2S含量 |
| 2.4 统计学方法 |
| 第3章 结果 |
| 3.1 HUVECs中17-β雌二醇减轻Hcy所致的损伤 |
| 3.2 17-β雌二醇刺激HUVECs CBS、CSE表达及H2S生成 |
| 3.3 CBS和 CSE调节HUVECs中 H2S的生成 |
| 3.4 E2β通过调节内源性H2S生成减轻Hcy的损伤 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 研究的局限性 |
| 第5章 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 1.流行病学调查量表 |
| 2.技术路线图 |
| 作者攻读学位期间的科研成果 |
| 致谢 |
（5）雌二醇在酸诱导的大鼠关节软骨细胞凋亡中的作用及可能机制（论文提纲范文）
| 中英文缩略词 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 1 前言 |
| 2 实验材料 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验试剂与相关试剂的调配 |
| 2.3 实验器材 |
| 3 实验方法 |
| 3.1 细胞的培养和处理 |
| 3.1.1 提取原代细胞前准备 |
| 3.1.2 原代细胞的提取过程 |
| 3.1.3 软骨细胞的处理 |
| 3.2 MTT检测法 |
| 3.3 线粒体膜电位检测(Rhodamine123 检测) |
| 3.4 激光共聚焦检测 |
| 3.5 免疫荧光法 |
| 3.6 干扰片段的转染 |
| 3.7 流式细胞术 |
| 3.8 实时定量PCR |
| 3.9 Hoechst染色 |
| 3.10 Western Blotting检测 |
| 3.10.1 总蛋白提取 |
| 3.10.2 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳 |
| 3.10.3 切胶与转膜 |
| 3.10.4 一抗孵育 |
| 3.10.5 二抗孵育与显影 |
| 3.11 统计分析 |
| 4 结果部分 |
| 4.1 雌二醇对大鼠关节软骨细胞的作用(体外) |
| 4.1.1 不同浓度雌二醇对正常软骨细胞生长的影响 |
| 4.1.2 雌二醇对酸化条件下软骨细胞生长的影响 |
| 4.1.3 雌二醇对酸化条件下软骨细胞形态的影响 |
| 4.1.4 雌二醇对酸化条件下的软骨细胞线粒体功能的作用 |
| 4.2 雌二醇对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道(ASIC1a)的表达和活性的影响 |
| 4.2.1 不同浓度雌二醇对ASIC1a蛋白表达的影响 |
| 4.2.2 不同时间点最佳浓度雌二醇对ASIC1a蛋白表达的影响 |
| 4.2.3 最佳浓度和时间雌二醇对ASIC1a蛋白表达的影响 |
| 4.2.4 雌二醇对软骨细胞ASIC1a基因表达的影响 |
| 4.2.5 雌二醇对软骨细胞ASIC1a活性的影响 |
| 4.3 雌二醇调节ASIC1a蛋白表达的机制 |
| 4.3.1 雌二醇降低ASIC1a蛋白表达的机制 |
| 4.3.2 自噬,溶酶体,钙蛋白酶,蛋白酶体抑制剂对ASIC1a蛋白降解的影响 |
| 4.3.3 自噬和自噬溶酶体途径在ASIC1a蛋白降解中的作用 |
| 4.4 阐明雌二醇受体在降解ASIC1a蛋白水平中的作用 |
| 4.4.1 雌二醇通过ERα受体来促进ASIC1a的蛋白降解 |
| 4.5 雌二醇对酸化条件下的大鼠关节软骨细胞凋亡的作用及机制 |
| 4.5.1 雌二醇对酸化条件下大鼠关节软骨细胞凋亡的影响 |
| 4.5.2 雌二醇对ASIC1a介导的关节软骨细胞凋亡的作用 |
| 5 讨论 |
| 6 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 个人简历 |
| 致谢 |
| 综述 雌激素在类风湿性关节炎中的作用及其机制探究 |
| 参考文献 |
（6）伪原薯蓣皂苷对OVX诱导的apoE-/-小鼠心脏功能损伤的保护作用（论文提纲范文）
| 提要 |
| abstract |
| 引言 |
| 综述 |
| 第一部分 不同给药浓度的PPD对 OVX后apoE~(-/-)小鼠血脂的影响 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.实验方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 中剂量的PPD对 OVX诱导的apoE~(-/-)小鼠心脏功能的影响 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.实验方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 中剂量组PPD对 OVX诱导的apoE~(-/-)小鼠心脏炎症因子及血浆载脂蛋白的影响 |
| 材料与方法 |
| 1.材料 |
| 2.实验方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 攻读学位期间所发表的学术论文目录 |
| 附件 |
（7）高糖环境下17β-雌二醇抑制大鼠髓核细胞凋亡和促进胞外基质合成的作用及初步机制探讨（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一部分 原代大鼠髓核细胞的体外分离培养及鉴定 |
| 引言 |
| 1. 实验材料和仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 结果 |
| 第一部分 讨论 |
| 第一部分 结论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 17β-雌二醇对高糖环境下的大鼠髓核细胞凋亡及胞外基质合成的影响 |
| 一、17β-雌二醇对高糖环境下的大鼠髓核细胞凋亡的影响 |
| 引言 |
| 1. 实验材料和仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 结果 |
| 二、17β-雌二醇对高糖环境下的大鼠髓核细胞胞外基质合成的影响 |
| 引言 |
| 1. 实验材料和仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 结果 |
| 第二部分 讨论 |
| 第二部分 结论 |
| 参考文献 |
| 第三部分 17β-雌二醇通过雌激素受体β抑制高糖状态下大鼠髓核细胞内氧化应激损伤 |
| 引言 |
| 1. 实验材料和仪器 |
| 2. 实验方法 |
| 3. 结果 |
| 第三部分 讨论 |
| 第三部分 结论 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 代谢综合征与椎间盘退变关系的研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 雌激素及其受体对椎间盘退变的影响 |
| 参考文献 |
| 英文缩写注释表 |
| 攻读博士学位期间公开发表的论文 |
| 致谢 |
（8）17β-雌二醇对小鼠胸腺上皮细胞增殖影响的转录组学与蛋白组学分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 英文缩略词表 |
| 1 引言 |
| 1.1 胸腺 |
| 1.2 胸腺上皮细胞(TECs)对胸腺退化的影响 |
| 1.3 雌激素 |
| 1.3.1 雌激素的作用机制 |
| 1.3.2 雌激素对免疫系统的影响 |
| 1.3.3 雌激素对胸腺退化的影响 |
| 1.4 细胞周期 |
| 1.5 细胞凋亡 |
| 1.5.1 细胞凋亡与形态学特征 |
| 1.5.2 细胞凋亡的作用机制 |
| 1.5.3 内质网应激介导的细胞凋亡通路 |
| 1.5.4 p53在细胞凋亡中的作用 |
| 1.6 转录组测序技术 |
| 1.7 基于iTRAQ定量蛋白组学技术 |
| 1.8 研究目的与意义 |
| 2 材料与方法 |
| 2.1 材料 |
| 2.1.1 细胞株 |
| 2.1.2 主要试剂材料 |
| 2.1.3 主要试剂配置 |
| 2.1.4 主要仪器 |
| 2.2 方法 |
| 2.2.1 MTEC1细胞复苏与培养 |
| 2.2.2 MTEC1细胞传代 |
| 2.2.3 CCK-8检测细胞活力 |
| 2.2.4 显微镜观察细胞增殖和形态变化 |
| 2.2.5 流式细胞术检测细胞周期 |
| 2.2.6 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 |
| 2.2.7 DAPI染色检测细胞核形态 |
| 2.2.8 转录组测序 |
| 2.2.9 实时荧光定量PCR |
| 2.2.10 iTRAQ蛋白组学测定 |
| 2.2.11 Western Blot检测相关蛋白表达水平 |
| 2.2.12 数据分析处理 |
| 3 结果与分析 |
| 3.1 17β-雌二醇对MTEC1细胞增殖的影响 |
| 3.1.1 17β-雌二醇影响细胞活力 |
| 3.1.2 17β-雌二醇影响细胞形态 |
| 3.2 17β-雌二醇对MTEC1细胞周期的影响 |
| 3.3 17β-雌二醇对MTEC1细胞凋亡的影响 |
| 3.3.1 17β-雌二醇导致细胞凋亡 |
| 3.3.2 17β-雌二醇导致细胞核异常 |
| 3.4 17β-雌二醇处理MTEC1细胞后高通量测序结果及分析 |
| 3.4.1 KEGG通路富集分析 |
| 3.4.2 String分析p53信号通路差异表达基因的互作关系 |
| 3.4.3 p53信号通路相关基因变化的验证 |
| 3.5 iTRAQ定量蛋白组学技术测定蛋白质表达谱及生物信息学分析 |
| 3.5.1 蛋白质组鉴定 |
| 3.5.2 差异蛋白质表达谱 |
| 3.5.3 差异蛋白质的GO功能注释分析 |
| 3.5.4 差异蛋白质的KEGG通路富集分析 |
| 3.6 内质网应激相关蛋白表达的验证 |
| 4 讨论 |
| 4.1 17β-雌二醇对MTEC1细胞增殖活力的影响 |
| 4.2 p53信号通路参与调控17β-雌二醇对MTEC1细胞的增殖抑制作用 |
| 4.3 内质网应激通路介导17β-雌二醇诱导MTEC1细胞发生凋亡 |
| 5 总结 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
（9）雌激素与神经保护的研究进展（论文提纲范文）
| 0引言 |
| 1雌激素受体在外周及中枢神经系统的分布 |
| 2雌激素对神经细胞的作用 |
| 2.1雌激素在神经生长发育中的作用 |
| 2.2雌激素的神经保护作用 |
| 3雌激素在外周神经再生中的作用 |
| 4雌激素在中枢神经疾病中的作用 |
| 4.1雌激素与帕金森病的关系 |
| 4.2雌激素与阿尔茨海默病的关系 |
| 4.3雌激素在急性中枢神经系统损伤中的作用 |
| 4.3.1雌激素对急性神经外伤的作用 |
| 4.3.2雌激素对急性脑缺血的作用 |
| 4.3.3雌激素对急性脑出血的作用 |
| 4.4雌激素在神经干细胞移植术中的应用 |
| 4.5雌激素在视网膜疾病中的研究 |
| 5展望 |
（10）补肾宁心方合并DHEA对去势雌兔动脉粥样硬化的防治作用（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 补肾宁心中药复方及DHEA对去势雌兔动脉粥样硬化形成的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第二部分 补肾宁心中药复方及DHEA对去势雌兔生殖内分泌-免疫功能的调节作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第三部分 DHEA及补肾宁心方含药血清对血管内皮细胞的作用 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 第四部分 DHEA及补肾宁心方含药血清对血管内皮细胞与单核细胞相互作用的影响 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 研究生阶段发表的文章 |
| 综述 |
四、17β-雌二醇对脂蛋白损伤血管内皮细胞的保护作用（论文参考文献）
- [1]二仙含药血清通过雌激素受体抑制Ox-LDL诱导的冠状动脉平滑肌细胞增殖[D]. 刘会会. 延安大学, 2021(09)
- [2]黄体酮和17β-雌二醇对胰岛素抵抗的干预作用及机制研究[D]. 王静静. 兰州大学, 2021(09)
- [3]女性雌激素和环境因素对高血压影响的研究[D]. 张孟媛. 湖南师范大学, 2020(01)
- [4]雌二醇、同型半胱氨酸与高血压相关性及雌二醇对血管内皮保护作用机制研究[D]. 张丹丹. 南华大学, 2020(01)
- [5]雌二醇在酸诱导的大鼠关节软骨细胞凋亡中的作用及可能机制[D]. 宋苏静. 安徽医科大学, 2020(02)
- [6]伪原薯蓣皂苷对OVX诱导的apoE-/-小鼠心脏功能损伤的保护作用[D]. 殷乐章. 山东中医药大学, 2019(02)
- [7]高糖环境下17β-雌二醇抑制大鼠髓核细胞凋亡和促进胞外基质合成的作用及初步机制探讨[D]. 杨迪. 苏州大学, 2019(04)
- [8]17β-雌二醇对小鼠胸腺上皮细胞增殖影响的转录组学与蛋白组学分析[D]. 刘雅梦. 华南农业大学, 2018(08)
- [9]雌激素与神经保护的研究进展[J]. 宋亚琼,赵平. 国际眼科杂志, 2010(03)
- [10]补肾宁心方合并DHEA对去势雌兔动脉粥样硬化的防治作用[D]. 郝群. 复旦大学, 2004(01)