一、氨基酸的合成及其在食品中的应用(论文文献综述)
蔡转章[1](2021)在《豆粕源抗氧化肽对急性酒精性肝损伤的预防作用及机制研究》文中指出本研究隶属于吉林省教育厅科学技术研究项目(JJKH20211129KJ)。近年来,随着酒精消费水平的持续增加,我国的酒精性肝病发病率亦呈逐年上升趋势,已严重危害到国人的生命与健康。利用食源性抗氧化活性物质干预调节由酒精摄入引起的机体氧化应激状态,是缓解和改善酒精性肝损伤的重要途径。豆粕中富含大豆优质蛋白,经水解获得的豆粕源抗氧化肽(Soybean meal-derived antioxidant peptides,SAPs)具有预防酒精性肝损伤的潜力,但目前并未见相关研究报道。本文以SAPs为研究对象,首先通过单因素和响应面实验优化了超声辅助酶解制备工艺参数,然后利用超滤技术进行分离纯化,同时筛选出抗氧化活性最优的组分进行序列鉴定,并对鉴定所得肽进行抗氧化活性表征。最后通过构建小鼠模型,从氧化应激、脂质代谢及炎症因子的角度探究了SAPs对急性酒精性肝损伤的预防作用效果,并借助转录组学技术阐明其预防作用机制。本研究能够提高大豆产业附加值,并对开发安全有效的食源性保肝护肝功能肽产品具有重要意义。全文的主要研究内容及结果如下:(1)以豆粕为原料,进行了SAPs的制备、分离纯化、序列鉴定及抗氧化活性表征的研究。结果表明:采用超声辅助酶解法制备SAPs的最佳工艺条件为酶解p H 8、底物浓度9%、加酶量6665.39 U/g、温度50℃、酶解时间4 h、超声时间9 min、超声功率300 W。分离纯化后得到分子量<1k Da的组分(SAPs5)抗氧化活性最优。将SAPs5组分进行序列鉴定,共得到10条肽序列,分别是YLFKD、IWNLN、GTYW、CLA、KVW、LRC、SLW、VYV、WLQ和YYK。通过固相合成上述肽,然后进行抗氧化活性表征,得到4肽序列GTYW活性最佳,这可能与肽链中存在的酪氨酸和色氨酸密切相关。(2)将实验小鼠分成空白组(CK)、模型组(M)、对照组(GSH)和SAPs组(SAPs5和GTYW),通过预先给予ICR小鼠SAPs(SAPs5和GTYW)干预,然后构建急性酒精性肝损伤模型,从氧化应激、脂质代谢及炎症因子的角度探究其预防作用效果。结果表明:与M组相比,SAPs组的血清AST/ALT、TC和TG含量,以及肝脏CYP2E1、IL-6、IL-1β与TNF-α含量均有显着性降低(p<0.05)。虽然在SAPs组中,肝脏MDA含量有所下降,且肝脏GSH含量、T-SOD和CAT活力也有不同程度的升高,但与M组相比并无显着性差异(p>0.05)。在病理切片中,SAPs组的肝细胞及肝索结构相较于M组更加清晰与完整,而肾脏细胞及其结构基本没变化。综上所述,SAPs可通过提高机体抗氧化能力、减少脂质蓄积以及炎症因子释放量,达到保肝护肝的作用效果。(3)为明确SAPs(SAPs5和GTYW)干预调节急性酒精性肝损伤的作用机制,基于Illumina hiseq测序平台进行转录组学研究。结果表明:提取所得各实验小鼠的肝脏组织RNA纯度与质量较高(OD 260/280≥1.95,OD 260/230≥2.14,浓度≥1000 ng/μL,RIN值≥7.00),经过RNA-seq测序,测序数据的质控以及比对结果良好(测序碱基的平均错误率<0.03%,Q20>97%,Q30>91%,Total mapped>90%)。通过差异分析,以M作为参照,GSH、SAPs5和GTYW分别上调基因696、1076和1285,下调基因677、661与1012。经过功能分析,得到SAPs干预后的差异基因主要富集在与炎症、氧化应激及脂质代谢相关的反应过程及代谢通路中。通过SAPs的干预,可显着上调基因Acsl1、Aqp8、Aox1、Gclc和Srebf1,下调Cxcl1、Il1r1和Lbp基因(p<0.05),发挥促进脂质代谢、减少炎症因子释放、缓解氧化应激损伤的作用。
赵珠莲[2](2021)在《真菌联合乳酸菌发酵豆渣改性工艺优化及应用研究》文中进行了进一步梳理豆渣富含膳食纤维、蛋白质、脂类等成分,具有多种生理功能,包括抗氧化、预防心血管疾病等。但由于湿豆渣含水量高,易腐败变质;口感粗糙、有豆腥味;还有少量抗营养因子。因此,豆渣须经适当预处理,才能有效地被利用。为此,本研究拟以豆渣食品化学特性、膳食纤维等为响应值,在真菌发酵改性豆渣的基础上,结合乳酸菌联合发酵,探索提升豆渣食品化学特性、改善膳食纤维组成的技术路线,为豆渣在食品中的应用提供支持。主要研究结果如下:1.真菌联合乳酸菌发酵豆渣改性实验结果采用米曲霉(M)发酵豆渣,以豆渣粒径、食品化学特性及膳食纤维变化等指标为响应值,进行优化实验,确定米曲霉发酵改性豆渣条件为:含水量60%,接种量2%,发酵温度32℃,发酵时间2 d,所制备发酵豆渣的膳食纤维(total dietary fiber,TDF)含量为70.18±0.41g/100g,粒径为1.33±0.09mm。采用雅致放射毛霉(Y)发酵豆渣,以豆渣粒径、食品化学特性及膳食纤维变化等指标为响应值,进行优化实验,确定雅致放射毛霉发酵改性豆渣条件为:含水量80%,接种量3%,发酵温度30℃,发酵时间3.5 d,所制备发酵豆渣的TDF含量为76.99±1.41 g/100g,粒径为1.36±0.11mm。采用米曲霉联合保加利亚乳杆菌(MB)发酵豆渣,以豆渣粒径、食品化学特性及滋味品质变化等指标为响应值,进行优化实验,确定米曲霉联合保加利亚乳杆菌发酵改性豆渣条件为:含水量50%,接种量2%,发酵温度45℃,发酵时间4 d,所制备发酵豆渣的可溶性总糖含量为26.66±0.52%,粒径为9.18±1.12mm。采用米曲霉联合植物乳杆菌(MZ)发酵豆渣,以豆渣粒径、食品化学特性及滋味品质变化等指标为响应值,进行优化实验,确定米曲霉联合植物乳杆菌发酵改性豆渣条件为:含水量50%,接种量2.5%,发酵温度35℃,发酵时间3 d,所制备发酵豆渣的可溶性总糖含量为25.66±0.52%,粒径为2.84±0.07mm。采用雅致放射毛霉联合保加利亚乳杆菌(YB)发酵豆渣,以豆渣粒径、食品化学特性及滋味品质变化等指标为响应值进行优化实验,确定雅致放射毛霉联合保加利亚乳杆菌发酵改性豆渣条件为:含水量50%,接种量2.5%,发酵温度40℃,发酵时间4 d,所制备发酵豆渣的可溶性总糖含量为26.78±0.52%,粒径为3.44±0.12mm。采用雅致放射毛霉联合植物乳杆菌(YZ)发酵豆渣,以豆渣粒径、食品化学特性及滋味品质变化等指标为响应值进行优化实验,确定雅致放射毛霉联合植物乳杆菌发酵改性豆渣条件为:含水量60%,接种量2.5%,发酵温度35℃,发酵时间2 d,所制备发酵豆渣的可溶性总糖含量为24.46±0.12%,粒径为3.01±0.11mm。2.生物发酵改性豆渣对食品化学特性的影响以前述6种生物发酵改性豆渣(M,Y,MB,MZ,YB,YZ)为实验材料,比较分析其粒径、食品化学特性及功能特性,结果如下:一般营养组成:真菌发酵豆渣后,蛋白质含量显着提高,粗脂肪、灰分含量也有所提高。其中,蛋白质含量提高了5.72%~7.79%,豆渣中粗脂肪含量增长了4.15%~7.67%,灰分提高了13.98%~20.19%。而联合乳酸菌发酵后,蛋白质含量降低了3.70%~12.16%;粗脂肪含量降低了1.57%~14.02%;灰分无明显变化。食品化学特性:发酵改性可显着降低豆渣粒径,降低了45.29%~92.07%,其中,M降低最多,其次是Y。改性豆渣水溶性和持油力均明显提升,其中真菌联合乳酸菌发酵改性豆渣持水性提高了105.86%~60.86%,以MB联合菌种发酵效果最好,其次是YB;持油力提高了14.29%~37.57%。在膨胀性方面,真菌发酵改性豆渣膨胀性有一定程度提升,M和Y分别增高了12.51%和15.56%;而真菌联合乳酸菌发酵豆渣的膨胀性显着降低,降低了69.31%~56.91%,以MB和MZ降低较多。在持水力方面,真菌发酵豆渣持水力有一定程度提升,M和Y分别增高了24.23%和46.53%,以Y发酵处理较好。而真菌联合乳酸菌发酵豆渣持水力显着降低,降低了30.05%~1.13%,以MB和YB降低较多。功能特性:发酵改性豆渣胆固醇吸附力和亚硝酸盐清除能力均有不同程度增强。在胆固醇的吸附能力方面,以MB吸附胆固醇能力最好,其次是YB,真菌发酵豆渣Y高于M。在亚硝酸钠清除能力方面,发酵豆渣Y和YB的清除力最强。发酵改性对豆渣阳离子交换能力的影响不大。3.发酵改性豆渣应用于面条制品初步研究以前述发酵改性豆渣食品化学特性及功能特性分析结果,选取水溶性和吸附特性较好的MB和YB发酵改性豆渣应用于面条制品,与添加未发酵豆渣制备面条(X)相比,添加改性豆渣制备面条MB、YB的吸水率、断条率和延伸率降低,烹煮损失率增高。发酵改性豆渣制备面条的感官品质总体优于未发酵豆渣制备面条。发酵改性豆渣制备面条的硬度、黏着性、弹性、咀嚼性等均高于未发酵豆渣制备面条。改性豆渣在加工食品中的应用还需要进一步深入研究。
张舒晴[3](2020)在《蒸汽爆破对牛骨理化特性的影响及液化工艺优化研究》文中研究指明中国是畜禽养殖、生产及消费大国,由于长久以来的观念问题及对畜禽骨营养价值的认识不足,造成了除去可直接食用的部分(如排骨、腔骨)外,剩余的绝大部分骨头利用率较低、加工技术适应性不高及产业化困难等问题,进而带来了巨大的骨骼资源浪费及环境污染等方面的问题。目前,以蒸汽爆破作为植物性原料处理方式的报道已经很多,而将其应用于动物骨骼的加工及处理方式还鲜有报道。采用蒸汽爆破液化牛骨技术,既简化了工艺流程又降低了能耗,同时,还能利用畜禽养殖场和屠宰场的畜禽粪便与落叶等废弃物资源,经厌氧发酵所产沼气对蒸汽发生器进行供能,充分利用废弃物资源的同时还大幅度降低了碳排放。本课题以牛股骨骨干为原料,对其液化技术进行了研究:根据热力计算结果,设计沼气蒸汽发生器,并与爆破装置进行耦合匹配,搭建了牛骨液化工艺实验台;在该实验台上完成了牛骨液化的相关实验,研究了蒸汽爆破对牛骨理化特性的影响机制,并对牛骨液化工艺及脱脂工艺进行了优化;通过蒸汽爆破法制备了超微牛骨汤粉及生物羟基磷灰石并进行表征,研究了其理化特性及消化特性,以期为牛骨的高值化全利用提供理论依据及工艺条件参考;对牛骨蒸汽爆破工艺进行了技术经济评价以及成本核算,并与高温蒸煮工艺进行了对比。主要研究结果与结论如下:1.根据瞬时弹射式爆破装置的特点,将牛骨蒸汽爆破过程划分为了三个阶段:升压(渗透)阶段、维持压力(蒸煮)阶段以及泄压(爆破)阶段,建立了各个阶段的能量传递模型与传质模型。牛骨蒸汽爆破过程过程中的有效能耗占比64.72%,无效能耗占比35.28%;其中加热骨料所需热量占比46.38%,为有效能耗。在能量传递模型的基础上,对牛骨蒸汽爆破传质规律进行了分析,阐明了牛骨蒸汽爆破过程中存在的传质现象,分析了各阶段的水分变化情况;验证实验显示所建模型拟合度较好,结果可靠,可用于牛骨蒸汽爆破过程的传热量与水分变化的相关计算。2.根据牛骨蒸汽爆破机理对牛骨的液化工艺进行了优化,并采用原子吸收分光光度计和电感耦合等离子体发射光谱法等对产物进行了表征。结果表明:牛骨液中矿物质含量随着液化率的增大而显着增加(P<0.05),而蛋白质与脂肪等有机相的含量则逐渐减少。钙离子的溶解度随着牛骨液化率的增大而增大,且效果显着(P<0.05);牛骨液化的最佳工艺条件为:压力维持2.2 MPa(217.3℃),保压874 s,此时的液化率为84.63%。蒸汽爆破技术中的两个参数(压力与保压时间)对牛骨液化率的影响都极其显着,但交互作用并不明显。蒸汽爆破技术可强力破坏牛骨结构,使有机物有效析出并溶于水中,从而达到液化的效果。3.根据牛骨蒸汽爆破机理对牛骨的去脂机制进行了研究,并以实现牛骨去脂最大化为目标,对牛骨去脂技术参数进行了优化,并使用激光粒径分析仪、电子扫描显微镜和傅里叶红外光谱法对产物进行表征。结果表明:牛骨硬度随着汽爆参数的增大而显着下降(P<0.05),因此,增大压力及延长保压时间更有利于牛骨的软化及碎化。蒸汽爆破后的牛骨渣随着汽爆参数的增大,其粒径分布逐渐集中,平均粒度逐渐减小。随着压力的增大与保压时间的增长,牛骨的红外吸收光谱愈发趋近于羟基磷灰石晶体的红外光谱图。牛骨中的有机相含量,蛋白质和脂肪等,随着蒸汽爆破压力和保压时间的增长而显着下降(P<0.05),因此牛骨中的矿物质含量显着提高(P<0.05)。蒸汽爆破技术中的两个参数(压力与保压时间)对牛骨去脂的影响都极其显着,但交互作用并不明显,其最佳工艺条件为:压力维持2.4 MPa(221.9℃),保压785 s,此时的脂肪含量为0.075%。蒸汽爆破可用于牛骨脱脂,效果明显。4.使用激光粒径分析仪、电子扫描显微镜和电感耦合等离子体发射光谱法等,对采用蒸汽爆破法制备的超微牛骨汤粉进行了表征,并对其理化特性及消化特性进行了研究,结果表明:超微牛骨汤粉颗粒形状较为规则,呈正态分布,平均粒径为7.52μm,远小于蒸汽爆破法制备的牛骨汤粉粒径;超微牛骨汤粉中人体必须的氨基酸含量为54.21 mg/g,占总氨基酸含量的28.36%;持水力在水浴50 min后可达1.36%;蛋白质溶解度和消化率相对较高,分别可达89.23%及55.14%;其钙离子的释放率也相对较高,可达62.64 mg/g。蒸汽爆破法制备的超微骨粉理化特性及消化特性极佳,易于被人体吸收,且制备工艺简单,具有极大的推广意义。5.采用X射线衍射、傅里叶红外光谱法及电感耦合等离子体发射光谱法等,对蒸汽爆破法制备的生物活性羟基磷灰石进行了表征,并将其与高温蒸煮法制备的羟基磷灰石及商业样品羟基磷灰石的理化性质进行比较。结果表明,蒸汽爆破后的样品则呈现破碎状且其破碎的趋势深入内部;X射线衍射分析的结果显示蒸汽爆破法制备的生物活性羟基磷灰石在三种样品中结晶度最高;傅里叶红外光谱图显示蒸汽爆破法制备的羟基磷灰石为A&B型碳酸羟基磷灰石。骨源生物活性羟基磷灰石的生物相容性远高于化学合成的羟基磷灰石,并且含有的丰富微量元素,因此,蒸汽爆破法制备的生物活性羟基磷灰石用作生物材料很有发展前景与研究价值。6.建立了牛骨蒸汽爆破工艺的技术经济评价模型,并与传统高温蒸煮工艺进行了对比,分析了两种不同的牛骨加工工艺的能量流动分布,计算了两者的经济指标,在此基础上对牛骨蒸汽爆破工艺进行了影响加工成本的敏感性分析,系统地对两种工艺方式进行了分析和评价。结果显示,蒸汽爆破工艺的技术和经济指标全部优于传统高温蒸煮工艺,具有产品质量高,能耗小,加工时间短等优势;牛骨蒸汽爆破工艺的成本估算结果低于高温蒸煮工艺,主要原因是其工艺流程简单且能耗低,且副产品剩余价值高;牛骨蒸汽爆破工艺采用沼气燃烧器供能,与畜禽养殖屠宰场的生产相结合,提高了废弃物的资源化利用率。因此,牛骨蒸汽爆破液化工艺优于高温蒸煮工艺。
刘倩[4](2020)在《无铝胭脂虫红色素呈色效果的改善途径研究》文中研究表明胭脂虫红酸作为天然的蒽醌色素,色泽鲜艳,具有较好的光热稳定性,在食品、药品和化妆品染色方面有较大的应用潜力。然而,胭脂虫红酸的呈色对环境(如pH值和金属离子等)的敏感性,限制了其在食品中的应用。商业中常用呈色较为稳定的胭脂虫红铝色淀进行染色,但铝色淀分子中铝元素的存在导致其在食品中应用的安全性受到质疑。目前,国内外对于胭脂虫红酸颜色变化原因的研究很少,仅有的少量文献还有一些矛盾之处,难以支持胭脂虫红无铝色素的开发以及在食品中的应用。基于此,本文以无铝胭脂虫红色素的开发为目标,首先探讨胭脂虫红酸及其铝色淀在不同食品基质中的呈色效果,重点阐明食品中不同组分对胭脂虫红酸及其铝色淀呈色效果的影响,明晰铝色淀呈色稳定的机制。并以此为基础,借鉴铝色淀稳定机制,利用螯合金属离子、保护和改善胭脂虫红酸及其所处环境两个途径,研究两性化合物和金属螯合剂对胭脂虫红酸呈色效应的改善,以及蛋白质-多酚复合物体系负载胭脂虫红酸后对其呈色的改善,以推动胭脂虫红酸在食品中广泛应用。首先,研究了胭脂虫红酸和胭脂虫红铝色淀在不同食材(鱼糜、鱼柳、猪肉糜、鸡肉糜、牛奶、稀奶油和豆浆)中的染色情况。结果表明,胭脂虫红酸对不同食材的染色差异较大:鱼糜和鱼柳呈紫色,猪肉糜、鸡肉糜和豆浆呈暗红色,牛奶和稀奶油呈灰绿色。相比之下,胭脂虫红铝色淀呈色较为稳定,除鱼糜和猪肉糜外,其余食材均为粉色。为了探讨食材中可能造成胭脂虫红色素呈色不稳定的因素,研究了常见食品蛋白质(肌原纤维蛋白(myofibrillar protein,MFP)、乳清分离蛋白(whey protein isolate,WPI)、大豆分离蛋白(soy protein isolate,SPI)和酪蛋白)、金属离子(Fe3+、Fe2+、Ca2+和Cu2+)和食品添加剂(亚硝酸钠、抗坏血酸和红曲红)对两种色素呈色的影响。结果表明,5.38mg/m L MFP、1%WPI、1%SPI和1%酪蛋白可通过提高溶液pH值,使胭脂虫红酸溶液分别变为酒红色、酒红色、酒红色和橘黄色;而胭脂虫红铝色淀呈粉色,不受蛋白影响。1 mmol/L Fe3+、1 mmol/L Fe2+、100 mmol/L Ca2+和1 mmol/L Cu2+均可与胭脂虫红酸螯合使其分别呈黑色、棕色、棕色和紫色。Fe3+、Fe2+和Cu2+可改变胭脂虫红铝色淀的颜色;而Ca2+对胭脂虫红铝色淀的颜色无影响。0.01%亚硝酸钠在酸性环境中可将胭脂虫红酸氧化,使其变为黄色,胭脂虫红铝色淀也受此氧化作用而变色;而0.01%-1%抗坏血酸和0.01%-0.1%红曲红对胭脂虫红酸和胭脂虫红铝色淀的分子结构无影响。上述结果说明,物料pH、金属离子和损害结构的氧化剂等可以显着影响胭脂虫红酸的呈色,通过体系中加入两性分子、螯合金属离子或者保护胭脂虫红酸结构并改善其所处环境,可能可以改善食品体系中胭脂虫红酸呈色。为了改善胭脂虫红酸在含铁含钙食品体系(如肉制品和奶制品)中的呈色效果,使其在食品中呈现明亮的红色调,基于加入两性分子和螯合金属离子途径以改善胭脂虫红酸呈色效应,研究了Al3+、Zn2+、甘氨酸、谷氨酸、谷胱甘肽、酪蛋白磷酸肽、WPI和乙二胺四乙酸(ethylenediaminetetraacetic acid,EDTA)对含铁含钙溶液中胭脂虫红酸呈色的影响。结果表明,Al3+对含1 mmol/L Fe3+胭脂虫红酸溶液的颜色无明显改善,但可使胭脂虫红酸不受100 mmol/L Ca2+的影响,说明Fe3+、Al3+和Ca2+与胭脂虫红酸螯合能力的大小为:Fe3+>Al3+>Ca2+。Zn2+可与胭脂虫红酸螯合,使其呈现紫色,Zn2+对含1mmol/L Fe3+和含100 mmol/L Ca2+胭脂虫红酸溶液的颜色无明显改善,说明Fe3+、Zn2+和Ca2+与胭脂虫红酸螯合能力的大小为:Fe3+>Zn2+>Ca2+。谷氨酸和谷胱甘肽对Ca2+有一定的螯合作用,可使含100 mmol/L Ca2+的胭脂虫红酸水溶液呈橘黄色,不再呈棕色。EDTA对Fe3+和Ca2+具有较强的螯合作用,可使胭脂虫红酸溶液的颜色不受1 mmol/L Fe3+和100 mmol/L Ca2+的影响。上述研究证实,偏酸性的两性化合物和金属螯合剂对胭脂虫红酸在含铁含钙溶液中的呈色有一定的改善作用,平衡pH值以及螯合Fe3+和Ca2+是有效途径。根据上述结果,基于开发无铝胭脂虫红色素的目标,从保护胭脂虫红酸结构并改善其所处环境途径以改善胭脂虫红酸呈色的角度出发,制备获得5种WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物(不含金属离子复合物、含KCl复合物、含CaCl2复合物、含MgCl2复合物和含ZnCl2复合物),测试了其色价以及光热稳定性,对其在含铁含钙溶液中的呈色情况及作用力进行了研究,并考察了其在肉糜和奶油中的染色情况。结果表明,制备所得复合物在光照、4°C、25°C、37°C和60°C的条件下放置14 d后,复合物颜色无显着变化;在80°C放置14 d后,复合物颜色明显变暗。5种复合物的色价为10.25,约为胭脂虫红酸色价的1/17。在含有Fe3+或Ca2+的碱性溶液中,5种复合物对胭脂虫红酸颜色有明显的改善作用。在pH 8.0的缓冲液中,Fe3+浓度为1 mmol/L时,5种复合物呈紫红色;Ca2+浓度为100 mmol/L时,添加有K+、Ca2+、Mg2+和Zn2+的4种复合物呈洋红色。添加脲、十二烷基硫酸钠和二硫苏糖醇后,复合物在碱性含铁含钙溶液中的颜色无明显改变,说明WPI、单宁酸、胭脂虫红酸和金属离子之间可能发生了共价相互作用。5种复合物在奶油中呈洋红色,相比于胭脂虫红酸,呈色明显改善。上述研究证实,保护胭脂虫红酸以及改善胭脂虫红酸环境可以有效改善复合物在含钙食品体系呈色效应;蛋白质-多酚-胭脂虫红酸复合物作为一种无铝色素,未来可在乳品体系中广泛应用。
秦晓杰[5](2020)在《肠炎沙门氏菌蛋清抗逆蛋白YbgC的挖掘及其功能分析》文中研究指明肠炎沙门氏菌(Salmonella enterica serovar Enteritidis)是引发食物中毒的重要致病菌,鸡蛋和蛋制品是其传播的主要载体。蛋清中的碱性环境、高黏着度以及抑菌蛋白质或肽等胁迫因子,可杀灭或抑制大多数细菌。然而,肠炎沙门氏菌却能够较好地抵抗蛋清的胁迫环境,在鸡蛋中存活并增殖,从而引发严重的食品安全问题。因此,阐明肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境的分子机制,可为蛋类食品中肠炎沙门氏菌控制理论和技术的建立提供新的思路和策略。国内外学者利用转座子突变、体内表达以及基因芯片等技术探究了肠炎沙门氏菌在蛋清中的存活机制,但这些研究主要集中在m RNA水平,蛋白质水平的相关研究尚未见报道。蛋白质是生物功能的执行者,蛋白质水平的表达变化是肠炎沙门氏菌应对外界压力的重要策略。因此,本论文以肠炎沙门氏菌蛋清抗逆菌株SJTUF 10978为研究对象,通过分析蛋清胁迫下肠炎沙门氏菌的蛋白质表达谱,筛选抗逆相关蛋白质;借助基因敲除技术对若干候选蛋白质进行功能鉴定,挖掘关键抗逆蛋白质;开展细胞壁膜特性分析,探索关键抗逆蛋白质的作用模式,较系统地揭示肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境的分子机制。主要研究内容和结果如下:1)肠炎沙门氏菌响应蛋清逆境的蛋白质组学分析。采用i TRAQ技术筛选蛋清胁迫下肠炎沙门氏菌差异表达的蛋白质,运用RT-q PCR技术验证蛋白质组学结果,通过生物信息学方法对差异蛋白质进行GO功能注释、KEGG通路富集、SRING互作网络分析以及表达模式聚类,进而构建肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境的调控网络。结果表明:a)肠炎沙门氏菌在50%、80%和100%蛋清胁迫下,分别有114、145和166个蛋白质表达显着上调,159、139和137个蛋白质表达显着下调;b)选取30个差异蛋白质进行RT-q PCR检测,它们在m RNA和蛋白质水平上的表达变化趋势基本一致,证明了蛋白质组学结果的可靠性;c)对差异蛋白质进行GO功能注释和KEGG通路富集,发现它们主要参与代谢过程和细胞过程等14种生物过程,涉及细胞膜和大分子复合物等10种细胞组成以及结合和分子转导等8种分子功能,并且显着富集在氨基酸合成、ABC转运系统、三羧酸循环、细菌趋化以及双组分调控系统等24个代谢途径中;d)肠炎沙门氏菌通过诱导压力应激、调控子、铁离子吸收、氨基酸合成、辅酶和维生素合成以及转运等相关蛋白质的表达,抑制能量代谢、运动与趋化以及毒力等相关蛋白质的表达来抵抗蛋清逆境。2)肠炎沙门氏菌蛋清抗逆相关蛋白YbgC的挖掘。根据差异蛋白质的功能以及RT-q PCR验证结果,选择表达上调倍数较大或在通路中可能发挥重要作用的蛋白质(如压力应激相关硫酯酶YbgC、氮调控蛋白Gln K、铁离子吸收相关酯酶Fes和Iro D)作为抗逆候选蛋白质进行功能鉴定,从而挖掘关键抗逆蛋白质。结果表明:a)依据同源重组原理,利用克隆载体p MD19-T和蔗糖自杀质粒p RE112,成功构建了肠炎沙门氏菌的基因缺失突变株⊿ybg C、⊿gln K、⊿fes和⊿iro D;b)ybg C、gln K、fes和iro D四个基因的分别缺失对肠炎沙门氏菌在Luria-Bertani培养基中的生长速率均没有显着影响;c)ybg C基因的缺失显着降低了肠炎沙门氏菌在蛋清中的存活能力,而gln K、fes和iro D基因的分别缺失均没有显着影响肠炎沙门氏菌在蛋清中的存活能力;d)ybg C基因的回补使得肠炎沙门氏菌在蛋清中的存活能力达到野生型菌株的水平,表明YbgC在肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境中发挥着关键作用。3)YbgC在肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境中的作用解析。蛋清中的抑菌蛋白质或肽是其抑制细菌生长的主要因素,细胞膜是这些抑菌组分的主要作用靶点,所以推测YbgC可能响应了蛋清中某些(种)抑菌组分的胁迫,从而在肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境中发挥重要作用。因此,以肠炎沙门氏菌野生型菌株、突变株⊿ybg C和回补株⊿ybg C-C为研究对象,通过分析它们在蛋清主要抑菌组分中的存活能力、细胞膜脂肪酸组成以及细胞膜渗透性、完整性和流动性等特性,解析YbgC在肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境中的作用机制。结果表明:a)ybg C基因的缺失显着降低了肠炎沙门氏菌在溶菌酶中的存活能力,但并不影响其在卵转铁蛋白、抗生物素蛋白、卵白蛋白以及卵类黏蛋白等组分中的存活能力;b)在溶菌酶胁迫下,⊿ybg C的细胞形态发生了明显变化,大量细胞由杆状变成了球状,并伴有细胞破裂现象,而野生型菌株和⊿ybg C-C的细胞形态并未改变,仍保持完整;c)在溶菌酶胁迫组中,相对于野生型菌株和⊿ybg C-C,⊿ybg C的细胞外膜渗透性显着增强,但这三株菌在未胁迫组中的外膜渗透性没有显着差异;d)在溶菌酶胁迫下,⊿ybg C脂肪酸C14:0和C17:0 cyclo含量显着降低,而iso-C15:03-OH、C18:1ω7c和C19:0 cycloω8c含量显着增加,且⊿ybg C中不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸的比率显着高于野生型菌株和⊿ybg C-C;e)ybg C基因的缺失导致细胞膜脂质合成相关基因在溶菌酶胁迫下的表达显着上调,这些基因主要参与脂肪酸(acp P、cfa、acc ACD、fad R、fab BDG、tes AB)、磷脂(ass、pls B、pls C)和类脂A(lpx A)的合成。这些脂类物质在肠炎沙门氏菌蛋清抗逆中发挥着重要作用。上述结果表明,肠炎沙门氏菌通过压力应激、调控子、铁离子吸收、氨基酸合成、辅酶和维生素合成、转运、能量代谢、运动与趋化以及毒力等相关蛋白质的共同作用来抵抗蛋清逆境。其中,压力应激因子YbgC主要通过调控细胞膜脂肪酸组成以及细胞膜完整性来响应蛋清溶菌酶的胁迫,从而在肠炎沙门氏菌蛋清抗逆中发挥关键作用。这些成果为在蛋白质水平上较系统地揭示肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境的分子机制提供了新的思路。
李平[6](2020)在《基于量子点表面分子印迹技术的高通量荧光传感器检测食品中乐果》文中指出乐果(Dimethoate)是一种有机磷农药,在农业生产中经常被作为杀虫剂使用,但是由于人类过度或不合理使用乐果,乐果会通过生物富集,食物链传递等方式进入人体和生态坏境,对人体健康和地球环境产生一定的威胁。目前,对于食品中乐果残留量的分析检测方法已有大量的报道,但传统检测方法(主要是色谱法)中使用的仪器相对昂贵,操作复杂,在现场检测中不适用。因此,迫切需要探索一种简单、稳定、快速、高灵敏度的乐果检测方法。本实验利用量子点独特的光学性质和分子印迹聚合物选择识别性强的优点,制备了量子点表面分子印迹材料作为乐果荧光识别探针,并借助微孔板,构建了可用于高通量快速检测乐果的荧光传感器,该方法可以实现对乐果稳定,快速,高通量、高灵敏度的测定,并且可以实现对环境样品和食品样品中乐果的快速检测,具体内容如下:利用反相微乳液体系一步合成反应法,疏水CdSe/ZnS量子点作为中心,以3-氨丙基三乙氧基硅烷、四乙氧基硅烷和乐果分别作为功能单体,交联剂和模板分子制备量子点(quantum dots,QDs)表面分子印迹材料(molecular imprinted polymer,MIP)使其作为乐果分子识别的荧光探针(MIP@QDs)。MIP@QDs的荧光信号可以被重新吸附识别的乐果分子高效猝灭。实验过程中用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)、傅立叶红外光谱(fourier transform infrarde sepctrometer,FT-IR)、荧光光谱对MIP@QDs进行表征,并对MIP@QDs的稳定性进行了研究。对影响荧光传感器性能的pH进行优化,实验结果表明最佳pH为7.4。对所构建的基于MIP@QDs的荧光传感器进行性能测试,包括乐果检测标准曲线的建立,传感器的选择性和重复性。实验结果表明,在最优的检测条件下,所构建荧光传感器的荧光猝灭值与乐果浓度在5.0μg/L-150.0μg/L范围内呈线性关系,其相关系数为0.9958。该传感器可以很好的对乐果进行特异性识别,对结构类似物倍硫磷、乙酰甲胺磷、敌百虫几乎没有识别作用;使用该荧光传感器分别对乐果,乐果与结构类似物的混合溶液进行检测,MIP@QDs的荧光强度值基本相同,结果表明结构类似物很难干扰乐果的检测。用一定体积比的乙醇/乙酸混合溶液对MIP@QDs功能材料进行洗脱,洗脱已经结合的乐果分子来对其进行再生,再生后,将识别探针MIP@QDs再次用于乐果溶液的测定,六个循环后,MIP@QDs的荧光强度猝灭值逐渐降低并保留初始猝灭值的93%。采用加标回收的方法将对环境样品和食品样品中乐果进行测定,取得了良好的效果,加标回收率为89.8%98.0%。
谭力[7](2020)在《罗非鱼—大豆共沉淀蛋白的营养、结构及组成研究》文中研究表明具有卓越营养价值和功能特性的双蛋白体系备受关注。优质动植物蛋白结合实现优势互补的双蛋白科学发展策略已被提出,但现有研究和应用集中在乳蛋白和大豆蛋白,与水产蛋白相关的双蛋白体系研究极少。为此,本研究混合不同质量比的罗非鱼肉和大豆豆粕,通过碱溶-等电点沉淀法制备了罗非鱼分离蛋白(Tilapia Protein Isolate,TPI)、5种罗非鱼-大豆共沉淀蛋白(Tilapia-Soybean Protein Co-precipitates,TSPC3:1、TSPC2:1、TSPC1:1、TSPC1:2和TSPC1:3)和大豆分离蛋白(Soybean Protein Isolate,SPI),对其营养质量、结构特征及蛋白质组成进行研究,探讨了TSPC较TPI和SPI的优势,并为蛋白质品质的评定提供了参考。主要结果如下:1、TPI、TSPC和SPI的粗蛋白含量均高于90%,且TSPC的基本成分、大部分氨基酸组成和体外蛋白质消化率(in vitro protein digestibility,IVPD)介于TPI和SPI之间。SDS-PAGE电泳显示TSPC包含来自TPI和SPI的蛋白亚基组分。与TPI和SPI相比,TSPC2:1和TSPC1:1的色氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、组氨酸和精氨酸含量最高,且TSPC1:1还显示了色氨酸和组氨酸的最高氨基酸评分(amino acid score,AAS)。与其它比例的TSPC相比,TSPC1:1中苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、色氨酸和组氨酸的AAS均高于SPI。5种TSPC中,TSPC1:1的体外蛋白质消化率修正的氨基酸评分(protein digestibility corrected amino acid score,PDCAAS)为0.86,营养价值最好。因此,通过碱溶-等电点沉淀法制备的罗非鱼-大豆共沉淀蛋白是平衡罗非鱼蛋白和大豆蛋白的营养质量,开发罗非鱼-大豆双蛋白体系的有效策略。2、TSPC的溶解性和热稳定性均高于TPI。在中性p H条件下,TSPC1:3的溶解度达81.90%,热变性温度为90.30°C。紫外光谱和圆二色光谱的变化表明,TSPC的局部结构不同于TPI和SPI。红外光谱分析显示,在TSPC中同时存在TPI和SPI的结构,其主要的二级结构是α-螺旋和β-折叠,且五种TSPC的结构呈现不规律的变化。TSPC1:1的结构是独特的。相关性分析表明,氨基酸组成影响蛋白二级结构,其中蛋氨酸对α-螺旋的影响最大(R=0.975,p<0.01),苯丙氨酸对β-折叠的影响最大(R=0.913,p<0.01)。α-螺旋显着影响IVPD(R=0.954,p<0.01)。就溶解性而言,α-螺旋呈显着负相关,β-折叠呈正相关(R=0.743)。因此,TSPC有应用于食品加工的潜力,且二级结构与氨基酸组成、消化率和溶解性密切相关,α-螺旋和β-折叠结构是主要相关因素。3、通过蛋白质全谱分析在TPI、TSPC1:1和SPI中分别鉴定到2222种、5092种和5878种蛋白,其中TSPC1:1独有989种蛋白。与TPI和SPI相比,基因本体(Gene Ontology,GO)注释发现TSPC1:1特有细胞聚集(cell aggregation)和其他生物部分(other organism part和other organism)三种功能;京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析显示TSPC1:1特有45条KEGG通路,这些结果说明TSPC1:1能参与更多的生化功能和代谢途径。此外,对TSPC1:1特有各种类型的N-聚糖生物合成(Various types of N-glycan biosynthesis)通路的研究表明,参与该通路的含有Glycos_transf_1域的蛋白质(Glycos_transf_1 domain-containing protein)和α-1,2-甘露糖苷酶(alpha-1,2-Mannosidase)这两种蛋白属于TSPC1:1独有的989种蛋白。总体分析,TSPC1:1较TPI和SPI在蛋白组成、GO功能和KEGG通路方面都有很大差异,具有更多的生物学功能,值得进一步应用于食品工业。
刘倩[8](2020)在《毛霉蛋白酶水解制备大豆鲜味肽的研究》文中提出鲜味肽来源广泛,是一类本身具有鲜味,同时也可与其它呈味物质协同增效,赋予食品细腻丰富滋味的小分子肽类,通常分子量在1000 Da以下。其呈味丰富、易于消化吸收、同时兼具营养价值和特殊生理功能。因此,如何提纯鲜味肽并进一步探索其结构组成,对开发新型调味品,推进我国调味品的产业升级具有重要意义。利用毛霉蛋白酶水解制备大豆鲜味肽,首先探索了不同酶解条件与蛋白和糖类等呈味基础物质变化之间的关系以及最佳酶解工艺,根据单因素试验结果构建响应预测模型,得到最佳工艺条件为酶解温度34.3℃,酶解时间92.5 h,料液比1:2.2(g/g),不调pH,并预测在此条件下水解度达5.637%,验证实验得到水解度为5.62%,与预测值接近,说明响应面试验设计合理可靠。采用浓度为40%、60%和80%乙醇对酶解液进行分级沉淀得到4个组分(E1、E2、E3和E4),E2的水解和游离氨基酸中鲜味氨基酸占比最高,E3鲜味最佳,存在于肽段中的鲜味氨基酸含量最高,水解与游离氨基酸中均有较高比例的甜味氨基酸。E3游离氨基酸的TAV值构成与鲜甜鸡汤类似,除鲜味氨基酸外,组氨酸的TAV值最大。上清液E4苦味最强。最佳工艺条件下的酶解充分,4个组分小于1000 Da肽段含量均超过90%,且含有大量180~500 Da的肽段,其中E3组分中500~1000 Da肽段含量最高。大多数鲜味肽可在浓度为60%~80%的乙醇溶液中沉淀下来。将E3在不同条件下进行热处理,温度120℃加热30 min条件下美拉德产物积累最多。与稀释酱油复配时,由E3直接加水配制得到的原液R1提高鲜味的同时也增加苦味,外加葡萄糖后120℃加热30 min所得的R3能一定程度减少苦味且增鲜效果最好。采用G-15葡聚糖凝胶层析对E3组分进行分离纯化,得到3个有效组分g-1、g-2和g-3。由感官评价结果可知,g-1、g-2和g-3滋味基调是类似味精的鲜味,保留时间最短的g-1鲜味效果最好。综合水解与游离氨基酸的数据可知,g-1与g-2均有大量的鲜味、甜味和亲水性氨基酸存在于肽段中。g-3组分的鲜味氨基酸大部分以游离状态存在且有大量苦味和疏水性氨基酸存在于肽段中。醇沉分离之后,葡聚糖凝胶层析是一种简单有效的鲜味肽富集方法。采用UHPLC-MS/MS技术对葡聚糖凝胶层析分离后鲜味最突出的g-1进行分离和序列鉴定,共检测出6种鲜味肽段,分子量分别为452.2、488.2、490.2、544.3、556.3和 570.3 Da,氨基酸序列分别是 PEHA(Pro-Glu-His-Ala)、EDLL(Glu-Asp-Leu-Leu)、DMEP(Asp-Met-Glu-Pro)、DRGVV(Asp-Arg-Gly-Val-Val)、DYFL(Asp-Tyr-Phe-Leu)和 GELPR(Gly-Glu-Leu-Pro-Arg)。
程雨薇[9](2020)在《硒硫互作富集西蓝花芽苗异硫氰酸酯技术及其作用机制》文中认为西蓝花(Brassica oleracea L.),又称青花菜,是富集具有抗癌活性的异硫氰酸酯(Isothiocyanates,ITCs)和硒的良好试材。ITCs是硫代葡萄糖苷(简称硫苷)在内源黑芥子酶的作用下降解的产物之一,能够有效地防止膳食中多种致癌物质引起的DNA损伤。硫酸盐胁迫通过提高硫苷含量进而促进西蓝花中ITCs的富集,而硫苷含量与植物体内硫含量密切相关,由于硒和硫在原子大小、化学性质方面相似,在新陈代谢进程中硒不仅可以代替硫元素促进硒化合物的合成,而且与硒交换硫可能会进一步提高硫苷水解产物ITCs的生物活性。本文以西蓝花芽苗为试材,从生理代谢水平、基因转录水平和蛋白质表达水平探讨硒硫互作对西蓝花芽苗中异硫氰酸酯代谢影响,主要研究结果如下:1、研究了硫酸锌(4 mM,ZnSO4)及其联合高浓度(0.10 mM)和低浓度(0.01 mM)亚硒酸钠(Na2SeO3)处理对西蓝花芽苗生理代谢和ITCs富集的影响。西蓝花芽苗在ZnSO4处理下生长受到严重抑制,芽长变短、鲜重降低,丙二醛以及H2O2含量上升;发芽6d时,在ZnSO4处理的基础上加入高浓度和低浓度Na2SeO3均可以缓解单独ZnSO4处理对芽苗造成的伤害,降低丙二醛含量,提高芽苗中总酚含量,显着提高硒含量但并不影响总硫含量(p<0.05)。ZnSO4处理通过提高西蓝花芽苗中硫苷含量与黑芥子酶活力,实现ITCs和萝卜硫素的富集;在ZnSO4富集ITCs的基础上加入高浓度和低浓度Na2SeO3处理对ZnSO4处理组的ITCs含量无任何显着影响,显着降低了芽苗中的萝卜硫素含量。在ZnSO4处理4 d西蓝花芽苗的基础上,加入浓度为0.10 mM Na2SeO3时,较0.01 mM浓度富集ITCs与萝卜硫素含量的效果好,0.10 mM为最适Na2SeO3浓度。2、研究ZnSO4、高浓度Na2SeO3及ZnSO4联合高浓度Na2SeO3处理对西蓝花芽苗ITCs合成以及硒代谢相关基因表达的影响。ZnSO4处理下,4 d西蓝花芽苗中UGT74B1、FMOGs-OX1、ST5b、BoSMT、BoCOQ5-2及4d和6d下ESP、BoSultr1:1表达水平显着上调(p<0.05),6 d芽苗中MYB28、UGT74B1、FMOGS-OX1、ST5b、BoCOQ5-2 表达显着下调(p<0.05),4 d 下 MYB28,6 d 下 BoSMT及4d 和 6 d下MYR、BoSAT1;1、BoHMT1的表达量无显着变化(p>0.05);高浓度Na2SeO3处理下,4d西蓝花芽苗中UGT74B1、FMOGS-OX1、ST5b,6 d 下MYB28及4 d和6 d下BoSMT、BoHMT1、BoCOQ5-2、BoSultr1;1表达水平显着上调(p<0.05),6 d芽苗中UGT74B1、ESP表达显着下调(p<0.05),4 d 下 MYB28、ESP、6 d 下 ST5b、FMOGS-OX1及4d 和6d下MYR、BoSAT1;1的表达量无显着变化(p>0.05);ZnSO4联合高浓度Na2SeO3处理下,4d西蓝花芽苗中ST5b、FMOGS-OX1、ESP,6 d下MYR、BoSAT1;1及4 d和6 d下UGT74B1、BoSMT、BoHMT1、BoCOQ5-2、BoSultr1;1表达水平显着上调(p<0.05),6 d 芽苗中 MYB28、FMOGS-OX1、ESP表达显着下调(p<0.05),4 d 下 MYB28、MYR、BoSAT1;1及6d下ST5b的表达量无显着变化(p>0.05)。结果表明,不同处理下西蓝花芽苗中与异硫氰酸酯合成和硒代谢有关的基因响应具有差异,ZnSO4联合高浓度Na2SeO3处理上调6 d芽苗中UGT74B1、MYR增加异硫氰酸酯,上调BoHMT1的表达增加硒含量。3、4d西蓝花芽苗经ZnSO4及高浓度Na2SeO3处理后,分别鉴定出差异表达的蛋白310、353个;经ZnSO4联合高浓度Na2SeO3处理后与ZnSO4处理相比,差异表达的蛋白共202个,与高浓度Na2SeO3处理相比,差异表达的蛋白共170个;这些差异蛋白功能主要涉及氨基酸代谢、碳水化合物代谢、防御、能量等。各处理对二次代谢与硒代谢均有调控作用。ZnSO4处理对于ITCs合成中MAM1、IPMI2、IIL1、IMD1、BCAT3、SOT17、SOT18、MYR1和MYR2的表达丰度显着增加,利于硫苷的合成和MYR活性从而促进ITCs的富集;对于硒代谢的MS2、NTRB、APS1较对照无显着性差异,其余参与硒代谢的酶表达丰度均增加。高浓度Na2SeO3处理后IIL1相对表达较对照显着降低了 34.63%,其通过降低IIL1的蛋白表达调控脂肪族硫苷,进而调控ITCs,MYR活性与蛋白表达无关;对于硒代谢中鉴定出的11个酶表达丰度较对照均显着增加,进而促进硒的积累。ZnSO4联合高浓度Na2SeO3处理后与单独ZNSO4处理或高浓度Na2SeO3处理相比均降低了IIL1和IPMDS3、MYR1、ESP和NSP2的表达丰度,通过调控MYR2表达丰度提高MYR活力从而利于ITCs的富集;较单独ZnSO4处理MS2,MTO1,APS3均增加,较高浓度Na2SeO3处理均降低或不显着,其余参与硒代谢的酶表达丰度较ZnSO4或Na2SeO3均无显着性差异,表明ZnSO4联合高浓度Na2SeO3通过上调硒代谢相关基因BoHMT1及MS2,MTO1,APS3蛋白表达丰度增加硒含量。
李进磊[10](2020)在《基于BRCA基因保守序列活性肽的设计、合成及与靶标RAD51的相互作用》文中提出乳腺癌是威胁女性健康的恶性肿瘤之一,随着年龄的增长患病人数不断增加,其发生涉及了多种基因的变化,这些变化导致细胞的恶性增殖并诱发癌变。研究发现大部分的乳腺癌患者与乳腺癌易感基因(BRCA)的突变密切有关。乳腺癌易感基因BRCA1和BRCA2分别位于人类17号、13号染色体上,都是非常重要的抑癌基因。BRCA1和BRCA2的有害突变会降低基因调控和DNA修复功能,导致受损DNA的积累和细胞内同源重组修复功能的紊乱,从而使乳腺癌、卵巢癌等癌症的发病率增加。DNA同源重组酶RAD51是一种重要的DNA修复蛋白,也是一种被广泛研究的肿瘤抑制基因产物。在维持基因组稳定性和完整性的过程中,同源重组可以准确修复断裂的DNA双链,RAD51是参与修复过程中最重要蛋白之一。BRCA1和BRCA2与RAD51之间的相互作用在同源重组和双链DNA修复过程中起着关键作用。本论文中以BRCA(BRCA1和BRCA2)基因中的保守序列为模板,RAD51的关键肽段为靶标,通过计算机设计筛选出可以改善RAD51作用效果的11条突变肽。利用Fmoc固相合成法合成,反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离和纯化,最后经过电喷雾电离质谱(ESI-MS)表征得到纯度都在95%以上的目标肽。使用荧光光谱法、圆二色光谱法(CD)研究了BRCA肽与RAD51关键肽段之间的相互作用。CD结果表明,RAD51的二级结构在加入任意一条BRCA肽后均发生了变化。荧光光谱结果表明,在加入任意一条不同浓度的类BRCA肽后都会发生不同程度的荧光猝灭,经计算其猝灭方式均为静态猝灭。综合两种光谱结果发现所有的肽段均可以独立结合RAD51,但是不同的肽段有不同的结合能力,其中突变肽BRCA1(856-871,Y856R,R866Y,Q867R)和BRCA2(1524-1548,V1542R)与RAD51的相互作用最强,结合常数分别为2.065×104L·mol-1;3.41×104L·mol-1。
二、氨基酸的合成及其在食品中的应用(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、氨基酸的合成及其在食品中的应用(论文提纲范文)
(1)豆粕源抗氧化肽对急性酒精性肝损伤的预防作用及机制研究(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
英文缩写词表 |
第1章 绪论 |
1.1 豆粕肽的研究简述 |
1.1.1 豆粕的简介 |
1.1.2 豆粕肽的理化特性 |
1.1.3 豆粕肽的功能活性 |
1.2 生物活性肽的研究概况 |
1.2.1 制备方法 |
1.2.2 分离纯化技术 |
1.2.3 结构鉴定 |
1.2.4 功能活性评价 |
1.3 酒精性肝损伤的研究进展 |
1.3.1 酒精的吸收代谢 |
1.3.2 酒精性肝损伤的概况 |
1.3.3 动物模型的构建 |
1.3.4 发病机制 |
1.4 组学的研究现状 |
1.4.1 基因组学 |
1.4.2 转录组学 |
1.4.3 蛋白质组学 |
1.4.4 代谢组学 |
1.5 研究意义及主要内容 |
1.5.1 研究意义 |
1.5.2 研究内容 |
1.5.3 技术路线 |
第2章 豆粕源抗氧化肽的制备、纯化、鉴定及表征 |
2.1 材料与设备 |
2.1.1 材料与试剂 |
2.1.2 仪器与设备 |
2.2 实验方法 |
2.2.1 SAPs的制备单因素实验 |
2.2.2 SAPs的制备响应面实验 |
2.2.3 SAPs的分离纯化 |
2.2.4 SAPs的序列鉴定及活性表征 |
2.2.5 体外抗氧化活性的测定方法 |
2.2.6 统计学分析 |
2.3 结果与讨论 |
2.3.1 单因素实验结果 |
2.3.2 响应面实验结果 |
2.3.3 分离纯化结果 |
2.3.4 序列鉴定结果 |
2.3.5 活性表征结果 |
2.4 本章小结 |
第3章 豆粕源抗氧化肽预防急性酒精性肝损伤的作用效果 |
3.1 材料与设备 |
3.1.1 材料与试剂 |
3.1.2 仪器与设备 |
3.2 实验方法 |
3.2.1 实验分组及造模方法 |
3.2.2 脏器系数的计算 |
3.2.3 血清指标的检测 |
3.2.4 肝脏匀浆指标的检测 |
3.2.5 肝脏与肾脏的病理形态学分析 |
3.2.6 统计学分析 |
3.3 结果与分析 |
3.3.1 ICR小鼠的生长情况 |
3.3.2 ICR小鼠的肝脏系数与脾脏系数 |
3.3.3 ICR小鼠的血清指标结果 |
3.3.4 ICR小鼠肝脏中氧化损伤指标结果 |
3.3.5 ICR小鼠肝脏中炎症指标结果 |
3.3.6 ICR小鼠的肝肾病理切片分析 |
3.4 本章小结 |
第4章 豆粕源抗氧化肽预防急性酒精性肝损伤的作用机制 |
4.1 材料与设备 |
4.1.1 材料与试剂 |
4.1.2 仪器与设备 |
4.2 实验方法 |
4.2.1 RNA测序 |
4.2.2 基因信息分析 |
4.2.3 统计学分析 |
4.3 结果与分析 |
4.3.1 肝脏组织RNA的质量检测结果 |
4.3.2 测序数据的统计与质控结果 |
4.3.3 序列比对结果 |
4.3.4 基因表达量的结果 |
4.3.5 基因表达量的差异结果 |
4.3.6 差异基因集的功能注释结果 |
4.3.7 差异基因集的功能富集结果 |
4.3.8 SAPs预防急性酒精性肝损伤的作用机制 |
4.4 本章小结 |
第5章 结论 |
5.1 结论 |
5.2 创新点 |
5.3 展望 |
参考文献 |
附录 |
导师简介 |
作者简介及科研成果 |
致谢 |
(2)真菌联合乳酸菌发酵豆渣改性工艺优化及应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第1章 文献综述 |
1.1 大豆的研究现状 |
1.1.1 大豆成分概述 |
1.1.2 大豆加工概述 |
1.2 豆渣及研究现状 |
1.2.1 豆渣概述 |
1.2.2 豆渣改性加工研究概况 |
1.2.3 发酵豆渣制品的研究概况 |
1.3 本研究的由来 |
第2章 绪论 |
2.1 研究目的和意义 |
2.2 主要研究内容 |
2.2.1 真菌发酵改性对豆渣食品化学特性的影响 |
2.2.2 真菌联合乳酸菌发酵改性对豆渣食品化学特性的影响 |
2.2.3 生物发酵改性豆渣食品化学特性比较分析及应用研究 |
第3章 真菌发酵改性对豆渣食品化学特性的影响 |
3.1 前言 |
3.2 材料与设备 |
3.2.1 实验材料 |
3.2.2 主要试剂 |
3.2.3 主要设备 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 真菌孢子悬浮液制备 |
3.3.2 真菌发酵豆渣工艺流程 |
3.3.3 真菌发酵豆渣的制备 |
3.3.4 真菌发酵豆渣工艺优化 |
3.3.5 分析方法 |
3.3.6 数据处理 |
3.4 结果与分析 |
3.4.1 真菌发酵对豆渣食品化学特性的影响 |
3.4.2 真菌发酵豆渣的响应面优化 |
3.5 本章小结 |
第4章 真菌联合乳酸菌发酵改性对豆渣食品化学特性的影响 |
4.1 前言 |
4.2 材料与设备 |
4.2.1 实验材料 |
4.2.2 主要试剂 |
4.2.3 主要设备 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 乳酸菌菌悬液制备 |
4.3.2 真菌联合乳酸菌发酵豆渣工艺流程 |
4.3.3 真菌联合乳酸菌发酵豆渣的制备 |
4.3.4 真菌联合乳酸菌发酵工艺优化 |
4.3.5 指标测定 |
4.3.6 数据处理 |
4.4 结果与分析 |
4.4.1 真菌联合乳酸菌发酵对豆渣食品化学特性的影响 |
4.4.2 真菌联合乳酸菌发酵豆渣的响应面优化 |
4.5 本章小结 |
第5章 生物改性豆渣食品化学特性比较分析及应用研究 |
5.1 前言 |
5.2 材料与设备 |
5.2.1 实验材料 |
5.2.2 主要试剂 |
5.2.3 主要设备 |
5.3 实验方法 |
5.3.1 食品化学特性分析 |
5.3.2 功能特性分析 |
5.3.3 其他成分测定 |
5.3.4 豆渣面条的制备 |
5.3.5 面条烹煮特性测定 |
5.3.6 面条的感官评定 |
5.3.7 面条的质构特性分析 |
5.3.8 数据分析 |
5.4 结果与分析 |
5.4.1 发酵改性豆渣基础营养成分组成分析 |
5.4.2 不同菌种及组合发酵改性豆渣食品化学特性比较分析 |
5.4.3 不同菌种组合发酵改性豆渣功能特性比较分析 |
5.4.4 发酵豆渣添加量对面条品质的影响 |
5.4.5 发酵改性豆渣应用于面条制品初步研究 |
5.5 本章小结 |
5.5.1 改性豆渣一般营养成分比较分析结果 |
5.5.2 改性豆渣食品化学特性比较分析结果 |
5.5.3 改性豆渣添加量的确定 |
5.5.4 改性豆渣应用于面条制品 |
第6章 主要研究成果及展望 |
6.1 主要研究成果 |
6.1.1 真菌发酵改性对豆渣食品化学特性的影响 |
6.1.2 真菌联合乳酸菌发酵改性对豆渣食品化学特性的影响 |
6.1.3 生物改性豆渣食品化学特性比较分析及应用研究 |
6.2 展望 |
参考文献 |
附录 |
致谢 |
(3)蒸汽爆破对牛骨理化特性的影响及液化工艺优化研究(论文提纲范文)
致谢 |
摘要 |
第一章 前言 |
1.1 引言 |
1.2 畜禽骨的结构及营养元素 |
1.2.1 畜禽骨的结构与力学特性 |
1.2.2 畜禽骨的营养组成及作用 |
1.3 畜禽骨的研究利用与加工技术现状 |
1.3.1 畜禽骨的研究利用现状 |
1.3.2 畜禽骨的加工技术现状 |
1.4 蒸汽爆破技术的研究与应用现状 |
1.4.1 蒸汽爆破技术研究现状 |
1.4.2 蒸汽爆破技术应用现状 |
1.5 本课题研究的主要内容 |
1.5.1 研究目的 |
1.5.2 技术路线 |
1.5.3 研究内容 |
第二章 牛骨液化工艺实验台的设计搭建 |
2.1 引言 |
2.2 沼气蒸汽发生器的设计计算 |
2.2.1 沼气燃烧器结构设计计算 |
2.2.2 沼气燃烧器热力计算 |
2.2.3 烟风阻力计算 |
2.2.4 沼气蒸汽发生器的设计参数与结构 |
2.3 爆破装置选配 |
2.3.1 热喷放技术 |
2.3.2 瞬时弹射技术 |
2.4 牛骨液化工艺实验台的总体结构 |
2.5 本章小结 |
第三章 牛骨的蒸汽爆破机理研究 |
3.0 引言 |
3.1 牛骨蒸汽爆破过程 |
3.2 牛骨蒸汽爆破过程能量传递与能耗分析 |
3.2.1 牛骨蒸汽爆破过程热传递模型建立 |
3.2.3 牛骨蒸汽爆破过程能耗分析 |
3.3 牛骨蒸汽爆破中的传质过程分析 |
3.3.1 牛骨蒸汽爆破过程中的水分迁移 |
3.4 本章小结 |
第四章 牛骨的液化工艺优化 |
4.1 引言 |
4.2 牛骨的液化机制与工艺优化 |
4.2.1 材料与方法 |
4.2.2 结果与分析 |
4.3 牛骨的去脂机制与工艺优化 |
4.3.1 材料与方法 |
4.3.2 结果与分析 |
4.4 本章小结 |
第五章 超微牛骨粉的制备与表征 |
5.1 引言 |
5.2 超微牛骨汤粉的制备与表征 |
5.2.1 材料与方法 |
5.2.2 结果与分析 |
5.3 牛骨源生物活性羟基磷灰石的制备与表征 |
5.3.1 材料与方法 |
5.3.2 结果与分析 |
5.4 本章小结 |
第六章 牛骨资源化利用技术经济评价 |
6.1 引言 |
6.2 分析方法 |
6.2.1 技术经济评价指标 |
6.2.2 生产成本分析 |
6.2.3 敏感性分析 |
6.3 分析与评价 |
6.3.1 技术经济评价指标 |
6.3.2 成本估算 |
6.3.3 敏感性分析 |
6.4 本章小结 |
第七章 结论与展望 |
7.1 主要结论 |
7.2 创新点 |
7.3 研究展望 |
参考文献 |
ABSTRACT |
攻读博士期间论文发表情况 |
(4)无铝胭脂虫红色素呈色效果的改善途径研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 胭脂虫红酸概述 |
1.1.1 胭脂虫红酸结构 |
1.1.2 胭脂虫红酸的化学性质 |
1.1.3 胭脂虫红酸呈色的影响因素 |
1.2 胭脂虫红铝色淀概述 |
1.2.1 胭脂虫红铝色淀 |
1.2.2 铝元素的安全性问题 |
1.3 提高色素稳定性的方法 |
1.3.1 添加金属螯合剂 |
1.3.2 添加多酚等辅色剂 |
1.3.3 色素分子的改造与修饰 |
1.3.4 色素分子的包埋 |
1.4 蛋白质-多酚复合物对小分子物质的保护研究 |
1.5 研究背景及意义 |
1.6 本课题主要研究内容 |
第二章 食品中不同组分对胭脂虫红色素颜色的影响 |
2.1 引言 |
2.2 实验材料与设备 |
2.2.1 实验材料 |
2.2.2 实验设备 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 SPI的制备 |
2.3.2 MFP的提取 |
2.3.3 胭脂虫红色素在典型食材中的呈色 |
2.3.4 不同蛋白质对胭脂虫红色素呈色的影响 |
2.3.5 不同pH值对胭脂虫红色素呈色的影响 |
2.3.6 金属离子对胭脂虫红色素呈色及缓冲液的影响 |
2.3.7 部分食品添加剂对胭脂虫红色素呈色的影响 |
2.3.8 数据统计分析 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 胭脂虫红色素在典型食材中的呈色 |
2.4.2 不同蛋白质对胭脂虫红色素呈色的影响 |
2.4.3 金属离子对胭脂虫红色素呈色的影响 |
2.4.4 部分食品添加剂对胭脂虫红色素呈色的影响 |
2.5 本章小结 |
第三章 两性化合物及金属螯合剂对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的改善研究 |
3.1 引言 |
3.2 实验材料与设备 |
3.2.1 实验材料 |
3.2.2 实验设备 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 含铁含钙胭脂虫红酸溶液的配制 |
3.3.2 Al~(3+)和Zn~(2+)对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.3.3 氨基酸对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.3.4 肽对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.3.5 WPI对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.3.6 EDTA对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.3.7 数据统计分析 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 Al~(3+)和Zn~(2+)对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.4.2 氨基酸对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.4.3 肽对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.4.4 WPI对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.4.5 EDTA对含铁含钙胭脂虫红酸溶液呈色的影响 |
3.5 本章小结 |
第四章 蛋白质-多酚复合物对胭脂虫红酸呈色的改善研究 |
4.1 引言 |
4.2 实验材料与设备 |
4.2.1 实验材料 |
4.2.2 实验设备 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 金属离子和多酚对胭脂虫红酸呈色效果的影响 |
4.3.2 蛋白质-多酚-胭脂虫红酸复合物的制备 |
4.3.3 高效液相色谱法(HPLC)测定胭脂虫红酸含量 |
4.3.4 胭脂虫红酸负载率的测定 |
4.3.5 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物颜色的光热稳定性 |
4.3.6 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物色价的测定 |
4.3.7 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物在含铁含钙溶液中的呈色 |
4.3.8 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物在含铁含钙溶液中的作用力分析 |
4.3.9 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物对肉糜及奶油的染色 |
4.3.10 数据统计分析 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 金属离子和多酚对胭脂虫红酸呈色效果的影响 |
4.4.2 蛋白质-多酚-胭脂虫红酸复合物制备参数的优化 |
4.4.3 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物颜色的光热稳定性 |
4.4.4 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物色价的比较 |
4.4.5 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物在含铁含钙溶液中的呈色及机理探讨 |
4.4.6 WPI-单宁酸-胭脂虫红酸复合物对肉糜及奶油的染色情况 |
4.5 本章小结 |
主要结论与展望 |
主要结论 |
展望 |
致谢 |
参考文献 |
附录 A:胭脂虫红酸的色谱图及吸收光谱图 |
附录 B:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 |
(5)肠炎沙门氏菌蛋清抗逆蛋白YbgC的挖掘及其功能分析(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
符号说明 |
第一章 绪论 |
1.1 沙门氏菌 |
1.1.1 沙门氏菌的生物学特性 |
1.1.2 沙门氏菌的命名与分类 |
1.1.3 沙门氏菌与食品安全 |
1.1.4 沙门氏菌的抗逆性 |
1.2 蛋清 |
1.2.1 蛋清的抑菌特性 |
1.2.2 蛋清的抑菌机制 |
1.3 肠炎沙门氏菌在蛋清中的存活机制研究进展 |
1.3.1 肠炎沙门氏菌在蛋清中的存活能力 |
1.3.2 肠炎沙门氏菌在蛋清中的存活机制 |
1.3.3 现有相关研究的局限性 |
1.4 iTRAQ在食源性致病菌压力应答机制研究中的应用 |
1.4.1 iTRAQ的原理与优势 |
1.4.2 iTRAQ用于食源性致病菌压力应答机制研究 |
1.5 研究目的、意义和思路 |
1.5.1 研究目的和意义 |
1.5.2 研究思路 |
第二章 肠炎沙门氏菌响应蛋清逆境的蛋白质组学分析 |
2.1 引言 |
2.2 材料与仪器 |
2.2.1 菌株 |
2.2.2 鸡蛋 |
2.2.3 主要培养基 |
2.2.4 主要试剂(盒) |
2.2.5 主要仪器 |
2.3 方法 |
2.3.1 菌株的活化 |
2.3.2 蛋清的制备 |
2.3.3 蛋清对肠炎沙门氏菌抑菌作用的测定 |
2.3.4 蛋清处理下肠炎沙门氏菌细胞形态的观察 |
2.3.5 总蛋白质提取 |
2.3.6 蛋白质浓度的测定 |
2.3.7 SDS-PAGE电泳 |
2.3.8 蛋白质的酶解和肽段定量 |
2.3.9 肽段标记 |
2.3.10 强阳离子交换色谱 |
2.3.11 毛细管高效液相色谱 |
2.3.12 质谱鉴定 |
2.3.13 蛋白质定性和定量分析 |
2.3.14 蛋白质组学结果的验证 |
2.3.15 生物信息学分析 |
2.3.16 肠炎沙门氏菌抵御蛋清逆境的抗性应答网络分析 |
2.4 结果 |
2.4.1 蛋清对肠炎沙门氏菌生长的影响 |
2.4.2 蛋清对肠炎沙门氏菌细胞表面形态的影响 |
2.4.3 蛋白质浓度测定结果 |
2.4.4 SDS-PAGE结果 |
2.4.5 蛋白质定性和定量结果 |
2.4.6 蛋白质组学结果的RT-q PCR验证 |
2.4.7 差异蛋白质的GO功能注释 |
2.4.8 差异蛋白质的KEGG通路富集 |
2.4.9 差异蛋白质的互作网络 |
2.4.10 差异蛋白质的聚类 |
2.4.11 肠炎沙门氏菌对蛋清的抗性形成模式 |
2.5 讨论 |
2.6 小结 |
第三章 肠炎沙门氏菌蛋清抗逆相关蛋白的功能鉴定 |
3.1 引言 |
3.2 材料与仪器 |
3.2.1 菌株和质粒 |
3.2.2 鸡蛋及蛋清 |
3.2.3 主要培养基 |
3.2.4 主要试剂(盒)和工具酶 |
3.2.5 主要仪器 |
3.3 方法 |
3.3.1 ybgC、glnK、fes和 iroD基因缺失突变株的构建 |
3.3.2 基因缺失突变株生长曲线的测定 |
3.3.3 基因缺失突变株在蛋清中存活能力的测定 |
3.3.4 回补株的构建 |
3.3.5 回补株的存活能力测定 |
3.3.6 数据处理与分析 |
3.4 结果 |
3.4.1 同源重组质粒的构建 |
3.4.2 基因缺失突变株的获得 |
3.4.3 基因缺失突变株的生长曲线 |
3.4.4 基因缺失突变株在蛋清中的存活能力 |
3.4.5 回补株⊿ybg C-C的获得 |
3.4.6 WT、⊿ybg C和⊿ybg C-C的生长曲线 |
3.4.7 WT、⊿ybg C和⊿ybg C-C在蛋清中的存活能力 |
3.5 讨论 |
3.6 小结 |
第四章 YbgC在肠炎沙门氏菌抵抗蛋清逆境中的作用解析 |
4.1 引言 |
4.2 材料与仪器 |
4.2.1 菌株 |
4.2.2 鸡蛋及蛋清 |
4.2.3 主要培养基 |
4.2.4 主要试剂(盒)和工具酶 |
4.2.5 主要仪器 |
4.3 方法 |
4.3.1 蛋清超滤基质的制备 |
4.3.2 蛋清抑菌组分的配制 |
4.3.3 肠炎沙门氏菌存活能力的测定 |
4.3.4 细胞形态的观察 |
4.3.5 细胞外膜渗透性的测定 |
4.3.6 细胞膜脂肪酸组成分析 |
4.3.7 细胞膜脂质合成相关基因表达分析 |
4.3.8 YbgC调控模式的解析 |
4.3.9 数据处理与分析 |
4.4 结果 |
4.4.1 WT、⊿ybg C和⊿ybg C-C在蛋清组分中的存活能力 |
4.4.2 WT、⊿ybg C和⊿ybg C-C在蛋清中的细胞形态 |
4.4.3 溶菌酶对肠炎沙门氏菌细胞表面形态的影响 |
4.4.4 溶菌酶对肠炎沙门氏菌细胞外膜渗透性的影响 |
4.4.5 溶菌酶对肠炎沙门氏菌细胞膜脂肪酸组成的影响 |
4.4.6 溶菌酶对肠炎沙门氏菌细胞膜流动性的影响 |
4.4.7 溶菌酶对肠炎沙门氏菌细胞膜脂质合成相关基因表达的影响 |
4.4.8 YbgC在肠炎沙门氏菌抵抗蛋清溶菌酶胁迫中的作用解析 |
4.5 讨论 |
4.6 小结 |
第五章 结论与展望 |
5.1 结论 |
5.2 创新点 |
5.3 展望 |
参考文献 |
附录1 差异蛋白质的RT-qPCR分析所用引物序列 |
附录2 不同浓度蛋清胁迫下肠炎沙门氏菌共有的93个差异蛋白质 |
附录3 蛋清胁迫下肠炎沙门氏菌差异蛋白质所属的主要功能类群 |
附录4 菌株和质粒信息 |
附录5 |
致谢 |
攻读博士学位期间已发表的学术论文 |
(6)基于量子点表面分子印迹技术的高通量荧光传感器检测食品中乐果(论文提纲范文)
中文摘要 |
Abstract |
第1章 绪论 |
1.1 乐果概述 |
1.1.1 乐果基本性质 |
1.1.2 乐果的用途及危害 |
1.1.3 食品中乐果残留检测方法 |
1.2 量子点介绍 |
1.2.1 量子点简介 |
1.2.2 量子点的光学性质 |
1.2.3 量子点在分析检测领域的应用 |
1.3 分子印迹技术概述 |
1.3.1 分子印迹技术 |
1.3.2 分子印迹聚合物的制备方法 |
1.3.3 分子印迹聚合物的应用 |
1.4 基于量子点的分子印迹荧光传感器 |
1.4.1 基于量子点的分子印迹荧光传感器概述 |
1.4.2 基于量子点的分子印迹荧光传感器的应用 |
1.5 研究内容及意义 |
1.5.1 研究内容 |
1.5.2 研究意义 |
第2章 高通量荧光传感器的构建及其在食品中乐果检测的应用 |
2.1 前言 |
2.2 实验仪器、试剂 |
2.2.1 实验仪器 |
2.2.2 实验试剂 |
2.3 实验内容 |
2.3.1 量子点(QDs)表面分子印迹聚合物(MIP)的制备 |
2.3.2 荧光测量 |
2.3.3 样品前处理 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 MIP@QDs的分子印迹机制及高通量分析操作的步骤 |
2.4.2 所制备荧光传感识别探针 MIP@QDs 的表征 |
2.4.3 NIP@QDs和 MIP@QDs的荧光性能表征 |
2.4.4 MIP@QDs的稳定性 |
2.4.5 pH对 MIP@QDs荧光传感器性能的影响 |
2.4.6 利用MIP@QDs作为荧光探针的荧光传感分析 |
2.4.7 基于 MIP@QDs 的荧光传感器的选择性和重复性 |
2.4.8 基于MIP@QDs的荧光传感器对实际样品的测定 |
2.4.9 不同方法检测乐果的比较 |
2.5 实验结论 |
第3章 全文总结与展望 |
3.1 全文总结 |
3.2 展望 |
参考文献 |
致谢 |
个人简况及联系方式 |
(7)罗非鱼—大豆共沉淀蛋白的营养、结构及组成研究(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
1 绪论 |
1.1 双蛋白 |
1.1.1 双蛋白的发展概述 |
1.1.2 双蛋白的加工特性 |
1.1.3 双蛋白在食品中的应用 |
1.2 罗非鱼蛋白 |
1.2.1 罗非鱼的资源概述 |
1.2.2 罗非鱼分离蛋白的组成 |
1.2.3 罗非鱼分离蛋白的加工特性及应用 |
1.3 大豆蛋白 |
1.3.1 大豆的资源概述 |
1.3.2 大豆分离蛋白的组成 |
1.3.3 大豆分离蛋白的加工特性及应用 |
1.4 共沉淀蛋白 |
1.4.1 共沉淀蛋白的发展概述 |
1.4.2 共沉淀蛋白的物理特性 |
1.4.3 共沉淀蛋白的营养特性 |
1.4.4 共沉淀蛋白的功能特性 |
1.4.5 共沉淀蛋白的感官特性 |
1.5 研究方法 |
1.5.1 蛋白质营养评价 |
1.5.2 蛋白质二级结构测定 |
1.5.3 蛋白质组学技术 |
1.6 本研究的立题依据及研究内容 |
1.6.1 研究目的及意义 |
1.6.2 主要研究内容 |
2 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的制备及营养评价 |
2.1 引言 |
2.2 材料与设备 |
2.2.1 材料与试剂 |
2.2.2 仪器与设备 |
2.3 实验方法 |
2.3.1 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的制备流程 |
2.3.2 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的pH溶解曲线实验 |
2.3.3 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的制备 |
2.3.4 基本成分分析 |
2.3.5 SDS-PAGE电泳 |
2.3.6 氨基酸组成分析 |
2.3.7 体外蛋白质消化率 |
2.3.8 氨基酸评分和体外蛋白质消化率修正的氨基酸评分 |
2.3.9 统计分析 |
2.4 结果与分析 |
2.4.1 罗非鱼-大豆蛋白混合物的pH溶解曲线 |
2.4.2 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的基本成分 |
2.4.3 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的SDS-PAGE电泳分析 |
2.4.4 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的氨基酸组成分析 |
2.4.5 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的营养评价 |
2.5 本章小结 |
3 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的结构与性质的相关性 |
3.1 引言 |
3.2 材料与设备 |
3.2.1 材料与试剂 |
3.2.2 仪器与设备 |
3.3 实验方法 |
3.3.1 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的制备 |
3.3.2 溶解性的检测 |
3.3.3 热稳定性的检测 |
3.3.4 紫外光谱检测 |
3.3.5 圆二色谱检测 |
3.3.6 红外光谱检测和二级结构分析 |
3.3.7 统计分析 |
3.4 结果与分析 |
3.4.1 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的溶解性分析 |
3.4.2 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的热稳定性分析 |
3.4.3 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的紫外光谱分析 |
3.4.4 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的圆二色谱分析 |
3.4.5 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的红外光谱分析 |
3.4.6 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的二级结构分析 |
3.4.7 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的二级结构与其特性的相关性分析 |
3.5 本章小结 |
4 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的蛋白质组学分析 |
4.1 引言 |
4.2 材料与设备 |
4.2.1 材料与试剂 |
4.2.2 仪器与设备 |
4.3 实验方法 |
4.3.1 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的制备 |
4.3.2 蛋白质组学分析流程 |
4.3.3 蛋白酶解 |
4.3.4 液相色谱分离 |
4.3.5 质谱检测 |
4.3.6 生物信息学分析 |
4.4 结果与分析 |
4.4.1 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的鉴定 |
4.4.2 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的GO功能注释分析 |
4.4.3 罗非鱼-大豆共沉淀蛋白的KEGG通路分析 |
4.5 本章小结 |
5 结论与展望 |
5.1 研究结论 |
5.2 研究创新点 |
5.3 研究展望 |
参考文献 |
致谢 |
作者简介 |
导师简介 |
(8)毛霉蛋白酶水解制备大豆鲜味肽的研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一章 绪论 |
1.1 引言 |
1.2 大豆肽的生产方法 |
1.2.1 化学水解法 |
1.2.2 酶水解法 |
1.2.3 微生物发酵法 |
1.3 大豆资源概述 |
1.4 毛霉的选用 |
1.5 鲜味肽 |
1.5.1 鲜味剂概述 |
1.5.2 鲜味肽研究进展 |
1.5.3 鲜味肽的分离纯化 |
1.5.4 鲜味肽的结构鉴定 |
1.6 本课题研究的立论依据和主要研究内容 |
1.6.1 立论依据 |
1.6.2 主要研究内容 |
第二章 响应面法优化毛霉蛋白酶水解大豆蛋白的工艺研究 |
2.1 引言 |
2.2 实验材料与设备 |
2.2.1 实验材料与试剂 |
2.2.2 实验仪器和设备 |
2.3 实验方法与步骤 |
2.3.1 毛霉蛋白酶水解大豆蛋白的工艺流程 |
2.3.2 水解度测定 |
2.3.3 蛋白回收率测定 |
2.3.4 肽氮含量测定 |
2.3.5 总糖含量测定 |
2.3.6 酶解条件的单因素实验 |
2.3.7 响应面分析实验 |
2.3.8 数据处理与分析 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 单因素试验结果分析 |
2.4.2 响应面试验结果分析 |
2.4.3 验证实验 |
2.5 本章小结 |
第三章 大豆鲜味肽的醇沉分离及呈味特性研究 |
3.1 引言 |
3.2 实验材料与仪器 |
3.2.1 实验材料与试剂 |
3.2.2 实验仪器与设备 |
3.3 实验方法与步骤 |
3.3.1 乙醇沉淀分级分离处理 |
3.3.2 氨基酸态氮含量测定 |
3.3.3 蛋白含量测定 |
3.3.4 总糖含量测定 |
3.3.5 肽分子量分布测定 |
3.3.6 氨基酸组成测定 |
3.3.7 醇沉分级组分游离氨基酸的TAV值分析 |
3.3.8 醇沉分级组分的感官评价方法 |
3.3.9 数据处理与分析 |
3.4 结果与讨论 |
3.4.1 醇沉分级各组分的蛋白、氨基酸态氮及总糖含量情况 |
3.4.2 醇沉分级各组分的肽分子量分布情况 |
3.4.3 醇沉分级各组分的氨基酸组成分析 |
3.4.4 醇沉分级各组分的感官评价分析 |
3.5 本章小结 |
第四章 大豆鲜味肽的增鲜、分离纯化与鉴定研究 |
4.1 引言 |
4.2 实验材料与仪器 |
4.2.1 实验材料与试剂 |
4.2.2 实验仪器与设备 |
4.3 实验方法与步骤 |
4.3.1 热处理 |
4.3.2 美拉德反应中期与末期产物测定 |
4.3.3 葡聚糖凝胶层析分离纯化 |
4.3.4 氨基酸组成测定 |
4.3.5 葡聚糖凝胶层析各组分游离氨基酸的TAV值分析 |
4.3.6 UHPLC-MS/MS鉴定大豆鲜味肽 |
4.3.7 感官评价方法 |
4.3.8 数据处理与分析 |
4.4 结果与讨论 |
4.4.1 热处理对大豆鲜味肽美拉德产物的影响 |
4.4.2 大豆鲜味肽与酱油复配的感官评价结果分析 |
4.4.3 葡聚糖凝胶层析分离纯化结果分析 |
4.4.4 氨基酸组成结果分析 |
4.4.5 葡聚糖凝胶层析各组分感官评价结果分析 |
4.4.6 大豆鲜味肽的氨基酸序列鉴定结果分析 |
4.5 本章小结 |
结论与展望 |
一、结论 |
二、创新点 |
三、展望 |
参考文献 |
攻读硕士学位期间取得的研究成果 |
致谢 |
附件 |
(9)硒硫互作富集西蓝花芽苗异硫氰酸酯技术及其作用机制(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
缩写词表 |
第一章 绪论 |
1.1 西蓝花 |
1.2 异硫氰酸酯 |
1.2.1 异硫氰酸酯形成与种类 |
1.2.2 异硫氰酸酯的生理功能 |
1.2.3 萝卜硫素生理功能 |
1.3 植物异硫氰酸酯富集的影响因素 |
1.3.1 硫苷含量 |
1.3.2 黑芥子酶活性 |
1.3.3 ESP活性 |
1.4 硒硫互作与植物生长的关系 |
1.4.1 硒、硫概述 |
1.4.2 硒在植物体内的吸收与转化 |
1.4.3 硒硫互作对植物生长代谢的影响 |
1.4.4 硒硫互作对植物硫苷-黑芥子酶体系的影响 |
1.5 本研究目的意义及主要内容 |
1.5.1 研究目的和意义 |
1.5.2 研究内容 |
第二章 硒硫互作对西蓝花芽苗生理生化及硫苷-黑芥子酶体系的影响 |
2.1 材料与方法 |
2.1.1 材料与试剂 |
2.1.2 主要仪器与设备 |
2.1.3 试验处理方法 |
2.1.4 指标分析方法 |
2.1.5 数据统计与分析 |
2.2 结果与分析 |
2.2.1 硒硫互作对西蓝花芽苗中主要生理生化的影响 |
2.2.2 硒硫互作对西蓝花芽苗异硫氰酸酯相关指标的影响 |
2.2.3 硒硫互作对西蓝花芽苗硒相关指标的影响 |
2.3 讨论 |
2.3.1 硒硫互作对ZnSO_4胁迫的缓解作用 |
2.3.2 硒硫互作对西蓝花芽苗异硫氰酸酯的影响 |
2.3.3 硒硫互作对西蓝花芽苗硒硫含量的影响 |
2.4 本章小结 |
第三章 硒硫互作下西蓝花芽苗异硫氰酸酯形成关键基因表达研究 |
3.1 材料与方法 |
3.1.1 材料与试剂 |
3.1.2 主要仪器与设备 |
3.1.3 试验处理方法 |
3.1.4 测定指标与方法 |
3.1.5 数据处理与统计分析 |
3.2 结果与分析 |
3.2.1 硒硫互作对西蓝花芽苗异硫氰酸酯合成基因表达量的影响 |
3.2.2 硒硫互作对西蓝花芽苗硒相关基因表达量的影响 |
3.3 讨论 |
3.3.1 硒硫互作对异硫氰酸酯形成相关基因表达影响 |
3.3.2 硒硫互作对硒代谢相关基因表达的影响 |
3.4 本章小结 |
第四章 硒硫互作下西蓝花芽苗蛋白组差异表达研究 |
4.1 材料与方法 |
4.1.1 材料与试剂 |
4.1.2 主要仪器与设备 |
4.1.3 试验处理方法 |
4.1.4 指标分析方法 |
4.1.5 数据统计与分析 |
4.2 结果与分析 |
4.2.1 西蓝花芽苗中差异蛋白统计及富集分析 |
4.2.2 西蓝花芽苗中异硫氰酸酯合成相关差异蛋白分析 |
4.2.3 西蓝花芽苗中硒代谢相关差异蛋白分析 |
4.3 讨论 |
4.3.1 硒硫互作对西蓝花芽苗蛋白组差异表达 |
4.3.2 硒硫互作对异硫氰酸酯合成相关差异蛋白的影响 |
4.3.3 硒硫互作对硒代谢相关差异蛋白的影响 |
4.4 本章小结 |
全文结论 |
参考文献 |
附录 |
攻读学位期间发表的学术论文与专利 |
致谢 |
(10)基于BRCA基因保守序列活性肽的设计、合成及与靶标RAD51的相互作用(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 前言 |
1.1 多肽 |
1.1.1 多肽简介 |
1.1.2 多肽的特点 |
1.1.3 多肽的应用及发展 |
1.2 RAD51与乳腺癌易感基因(BRCA1和BRCA2) |
1.2.1 乳腺癌 |
1.2.2 RAD51的结构与功能 |
1.2.3 BRCA1的结构与功能 |
1.2.4 BRCA2的结构与功能 |
1.3 多肽的计算机辅助理性设计 |
1.4 获取多肽的方法 |
1.4.1 多肽的合成 |
1.4.2 多肽的分离与纯化 |
1.4.3 多肽的表征 |
1.5 生物小分子之间相互作用的主要研究方法 |
1.5.1 荧光光谱法 |
1.5.2 圆二色光谱法 |
1.5.3 质谱分析法 |
1.5.4 其他方法 |
1.6 本论文研究的主要内容及意义 |
1.6.1 研究目的 |
1.6.2 研究内容 |
第二章 BRCA肽、类突变肽及靶肽RAD51关键肽段的设计、合成及表征 |
2.1 计算机辅助设计的基础知识 |
2.2 计算机辅助设计BRCA肽及类突变肽 |
2.2.1 BRCA1肽及类突变肽的设计 |
2.2.2 BRCA2肽及类突变肽的设计 |
2.3 多肽的合成 |
2.3.1 实验试剂 |
2.3.2 实验仪器 |
2.3.3 实验方法 |
2.4 结果与讨论 |
2.4.1 BRCA1(856-871)的RP-HPLC分析及质谱表征 |
2.4.2 其他BRCA类突变肽及RAD51关键肽段的RP-HPLC分析及ESI-MS质谱表征 |
2.5 本章小结 |
第三章 BRCA1、BRCA2及类BRCA肽与RAD51的相互作用研究 |
3.1 实验部分 |
3.1.1 实验仪器 |
3.1.2 实验试剂 |
3.1.3 实验方法 |
3.2 结果与讨论 |
3.2.1 BRCA1肽及类突变肽与靶肽RAD51(158-180)相互作用的荧光光谱分析 |
3.2.2 BRCA1肽及类突变肽与靶肽RAD51(181-200)相互作用的荧光光谱分析 |
3.2.3 BRCA2肽及类突变肽与靶肽RAD51(241-260)相互作用的荧光光谱分析 |
3.2.4 BRCA1肽及类突变肽与靶肽RAD51(158-180)相互作用的圆二色光谱分析 |
3.2.5 BRCA1肽及类突变肽与RAD51(181-200)相互作用的圆二色光谱分析 |
3.2.6 BRCA2肽及类突变肽与靶肽RAD51(241-260)相互作用的圆二色光谱分析 |
3.3 本章小结 |
第四章 结论 |
参考文献 |
附录 |
个人简历 |
致谢 |
四、氨基酸的合成及其在食品中的应用(论文参考文献)
- [1]豆粕源抗氧化肽对急性酒精性肝损伤的预防作用及机制研究[D]. 蔡转章. 吉林大学, 2021(01)
- [2]真菌联合乳酸菌发酵豆渣改性工艺优化及应用研究[D]. 赵珠莲. 西南大学, 2021(01)
- [3]蒸汽爆破对牛骨理化特性的影响及液化工艺优化研究[D]. 张舒晴. 河南农业大学, 2020(04)
- [4]无铝胭脂虫红色素呈色效果的改善途径研究[D]. 刘倩. 江南大学, 2020(01)
- [5]肠炎沙门氏菌蛋清抗逆蛋白YbgC的挖掘及其功能分析[D]. 秦晓杰. 上海交通大学, 2020
- [6]基于量子点表面分子印迹技术的高通量荧光传感器检测食品中乐果[D]. 李平. 山西大学, 2020(01)
- [7]罗非鱼—大豆共沉淀蛋白的营养、结构及组成研究[D]. 谭力. 广东海洋大学, 2020(02)
- [8]毛霉蛋白酶水解制备大豆鲜味肽的研究[D]. 刘倩. 华南理工大学, 2020(02)
- [9]硒硫互作富集西蓝花芽苗异硫氰酸酯技术及其作用机制[D]. 程雨薇. 扬州大学, 2020(05)
- [10]基于BRCA基因保守序列活性肽的设计、合成及与靶标RAD51的相互作用[D]. 李进磊. 郑州大学, 2020(02)