一、急性缺氧条件下脑认知功能障碍发生时段的研究（论文文献综述）
程畅[1]（2021）在《小胶质细胞表型转化在慢性低灌注脑白质损伤中的作用及机制》文中提出目的探讨慢性低灌注下小胶质细胞极化对脑白质损伤的作用及其机制。方法第一部分:慢性低灌注脑白质损伤模型的选择与构建成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组（SG）、经典双侧颈总动脉结扎组（BG）和改良双侧分期颈总动脉结扎组（GG）,采用经典或改良双侧颈动脉结扎法建立慢性低灌注脑白质损伤大鼠模型;术后3d、4w观察各组死亡率;术后7天观察各组瞳孔对光反射消失情况;4w时采用Kluver-Barrera染色观察脑白质的病理损害;4w时采用水迷宫评估大鼠认知功能损害。第二部分:慢性低灌注脑白质损伤中小胶质细胞表型变化特征成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组（SG）和低灌注组（CG）,采用改良分期双侧颈动脉结扎法建立慢性低灌注脑白质损伤大鼠模型;在2w、4w、8w三个时间点,采用Iba-1免疫组化染色,观察胼胝体小胶质细胞活化情况;采用MBP免疫组化染色观察少突胶质细胞和髓鞘损伤情况;采用荧光免疫组化染色双标,标记脑组织Iba-1+CD16双阳性细胞和Iba-1+CD206双阳性细胞,观察在体模型中,脑白质区域M1/M2型小胶质细胞极化的情况;采用western-blot法检测胼胝体IL-1β、IL-6、IL-10三种炎性因子的表达;Kluver-Barrera染色观察脑白质的病理损害;采用水迷宫评估大鼠认知功能损害。第三部分:慢性低灌注脑白质损伤中小胶质细胞表型变化的机制（一）慢性低灌注下A2AR与小胶质细胞表型变化的关系成年雄性SD大鼠,随机分为假手术组（SG）和低灌注组（CG）、A2AR抑制剂组（IG）、A2AR激动剂组（AG）,采用改良分期双侧颈动脉结扎法建立慢性低灌注脑白质损伤大鼠模型;4w采用Kluver-Barrera染色观察脑白质的病理损害;4w时采用水迷宫评估大鼠认知功能损害;用western-blot法检测胼胝体IL-1β、IL-6、IL-10三种炎性因子的表达,检测胼胝体i NOS、Arg 1两种小胶质细胞极化标记物的表达;采用荧光免疫组化染色,标记脑白质中MBP,观察脑白质少突胶质细胞损伤和脱髓鞘的情况;采用荧光免疫组化染色双标,标记脑组织Iba-1+CD16双阳性细胞和Iba-1+CD206双阳性细胞,观察在体模型中,脑白质区域M1/M2型小胶质细胞极化的情况。（二）慢性低灌注下A2AR调控小胶质细胞表型变化的信号通路将少突胶质细胞-小胶质细胞共培养系采用缺氧低糖方法建立慢性低灌注细胞模型,并分别用A2AR激动剂、PKA抑制剂干预,设置对照组（SG）、低灌注组（CG）、A2AR激动剂组（AG）、A2AR激动剂+PKA组抑制剂（AP）。采用Eilsa法检测细胞IL-1β、IL-6、IL-10三种炎性因子的表达,采用Elisa法检测PKA活性,Elisa法检测少突胶质细胞损伤指标检测LDH活性;采用western-blot法检测细胞i NOS、Arg 1两种小胶质细胞极化标记物的表达,检测PKA-CREB信号通路相关分子p-CREB、CREB。在离体模型中,研究A2AR通过PKA-CREB信号通调控小胶质细胞极化的机制。结果第一部分:慢性低灌注脑白质损伤模型的选择与构建术后3d成活率分别为SG组100%,BG组60%,GG组95%;4w成活率为SG组100%,BG组55%,GG组95%。术前瞳孔对光反射消失率三组均为0%,术后7d三组消失率SG组0%,BG组61.5%,GG组0%。Kluver-Barrera染色显示:较SG组,BG组和GG组大鼠脑白质区域均可见神经纤维稀疏、排列紊乱、夹杂空泡样变;BG组和GG组之间无明显差异。水迷宫实验显示,与SG组相比,BG组到达平台潜伏时间延长（P<0.01）,穿平台次数减少（P<0.01）;与BG组相比,GG组在达到平台潜伏时间和穿平台次数上均无显着差异（P>0.05）。第二部分:慢性低灌注脑白质损伤中小胶质细胞表型变化的特征1.Kluver-Barrera染色显示:相比于SG组,CG组脑白质病理损伤加重,出现脱髓鞘、神经纤维紊乱。2.Morris水迷宫认知功能检测:与SG组比较,CG组到达平台的潜伏时间在术后4w、8w时明显延长（P<0.05,P<0.01）,2w时无明显差异;与SG组比较,CG穿越平台次数在术后2w、4w、8w显着减少（P<0.01）。3.免疫组化染色显示慢性低灌注大鼠脑白质区域胶质细胞变化:用Iba-1抗体标记小胶质细胞,Iba-1免疫组化显示SG组、慢性低灌注组2w、4w、8w四组间阳性细胞数差距有统计学意义（P<0.01）。S-N-K检验结果显示,与假手术组,慢性低灌注2w、4w、8w组阳性细胞数值均增加,其中慢性低灌注4w组增加最明显;MBP免疫组化显示假手术组、慢性低灌注组2w、4w、8w四组间IOD值差距有统计学意义（P<0.05）。S-N-K检验结果显示,与假手术组,慢性低灌注2w、4w、8w组IOD值均减少,其中慢性低灌注4w、8w组减少最明显。4.荧光免疫组化双标显示慢性低灌注大鼠脑白质区域胶质细胞极化情况:CD16、Iba-1共标显示,四组间双阳性细胞数差距有统计学意义（P<0.01）。S-N-K检验结果显示,与SG组比较,CG组在2w、4w、8w双阳性细胞均显着增加（P<0.01）,CG组在2w、4w、8w三个时间点之间双阳性细胞无显着差异。荧光免疫组化双标CD206、Iba-1显示,四组间双阳性细胞数差距有统计学意义（P<0.01）。S-N-K检验结果显示,与SG组比较,CG组双阳性细胞在2w增加（P<0.05）;SG组和CG组4w、8w双阳性细胞无显着差异（P>0.05）。5.western-blot检测脑白质炎性因子IL-1β、IL-6和IL-10的表达:与假手术组相比,慢性低灌注组IL-1β在术后2w、4w显着升高（P<0.01）,在8w差异无统计学意义（P>0.05）;与假手术组相比,慢性低灌注组IL-6在术后2w、4w、8w升高（P<0.05）,其中4w显着升高（P<0.01）;与假手术组相比,慢性低灌注组IL-10在术后2w升高（P<0.05）,4w、8w降低（P<0.05）。第三部分:慢性低灌注脑白质损伤中小胶质细胞表型变化的机制（一）慢性低灌注下A2AR与小胶质细胞表型变化的关系Kluver-Barrera染色结果示:与SG组相比,CG组大鼠神经纤维变得疏松,部分纤维排列紊乱,局部出现空泡,且随着慢性低灌注时间的增加,变化更加明显。与CG组相比,IG组经过A2AR抑制剂处理后,神经纤维变得更加疏松,纤维排列紊乱,空泡增加;AG组经过A2AR激动剂处理后,与CG组相比,神经纤维变得紧密,紊乱程度有所降低,空泡减少。结果提示,慢性低灌注引起大鼠脑白质损伤,A2AR激动剂能减轻慢性低灌注后引起的损伤,A2AR抑制剂则能加重慢性低灌注后引起的损伤。Morris水迷宫实验显示:到达平台潜伏时间方面,各组间有统计学差异（P<0.01）,SNK组间比较:与SG组相比,CG组潜伏时间增加（P<0.01）;与CG组相比,AG组潜伏时间减少;穿越平台次数时间方面,各组间有统计学差异（P<0.05）,SNK组间比较:与SG组相比,CG组次数减少（P<0.01）;与CG组相比,AG组次数增加（P<0.05）。western-blot检测脑白质炎性因子IL-1β、IL-6和IL-10的表达:与SG组相比,CG组IL-1β、IL-6显着升高（P<0.01）,IL-10显着降低（P<0.01）;与CG组相比,IG组IL-1β、IL-6显着升高（P<0.01）,IL-10无明显差异（P>0.05）;与CG组相比,AG组IL-1β、IL-6显着降低（P<0.01）,IL-10显着升高（P<0.01）。western-blot检测小胶质细胞极化标记物的表达:与SG组相比,CG组i NOS显着升高（P<0.01）,Arg-1无明显差异（P>0.05）;与CG组相比,IG组i NOS显着升高（P<0.01）,Arg-1无明显差异（P>0.05）;与CG组相比,AG组i NOS显着降低（P<0.01）,Arg-1显着升高（P<0.01）。荧光免疫组化染色显示脑白质区域胶质细胞变化:荧光免疫组化单标MBP显示,与SG组比较,CG组IOD值显着降低（P<0.01）;与CG组比较,IG组IOD值降低（P<0.05）;与CG组比较,AG组IOD值显着升高（P<0.01）。荧光免疫组化双标CD16、Iba-1显示,与SG组比较,CG组双阳性细胞显着增加（P<0.01）;与CG组比较,IG组双阳性细胞增加（P<0.05）;与CG组比较,AG组双阳性细胞显着减少（P<0.01）。荧光免疫组化双标CD206、Iba-1显示,与SG组比较,CG组双阳性细胞无明显差异（P>0.05）;与CG组比较,IG组双阳性细胞无明显差异（P>0.05）;与CG组比较,AG组双阳性细胞显着增加（P<0.01）。（二）慢性低灌注下A2AR调控小胶质细胞表型变化的信号通路Eilsa法检测细胞上清液炎性因子的表达:与SG组相比,CG组IL-1β、IL-6显着升高（P<0.01）,IL-10显着降低（P<0.01）;与CG组相比,AG组IL-1β、IL-6显着降低（P<0.01）,IL-10显着升高（P<0.01）;与AG组相比,AP组IL-1β显着升高（P<0.01）,IL-10显着降低（P<0.01）。Elisa法检测PKA活性:与SG组相比,CG组PKA活性升高（P<0.05）;与CG组相比,AG组PKA活性显着升高（P<0.01）;与AG组相比,AP组PKA活性显着降低（P<0.01）。Elisa法检测少突胶质细胞损伤指标:与SG组相比,CG组显着升高（P<0.01）;与CG组相比,AG组显着降低（P<0.01）;与AG组相比,AP组显着升高（P<0.01）。采用western-blot法检测小胶质细胞极化标记物的表达:与SG组相比,CG组i NOS显着升高（P<0.01）,Arg-1无明显差异（P>0.05）;与CG组相比,AG组i NOS显着降低（P<0.01）,Arg-1显着升高（P<0.01）;与AG组相比,AP组i NOS显着升高（P<0.01）,Arg-1显着降低（P<0.01）。采用western-blot法检测PKA-CREB信号通路相关分子的表达:与SG组相比,CG组p-CREB/CREB升高（P<0.05）;与CG组相比,AG组p-CREB/CREB显着升高（P<0.01）;与AG组相比,AP组p-CREB/CREB显着降低（P<0.01）。结论1.改良大鼠分期双侧颈动脉结扎模型是理想的慢性低灌注脑白质损伤模型;2.慢性低灌注下,大鼠脑白质区域小胶质细胞激活,并向M1表型极化,介导脑白质炎性损伤;3.慢性低灌注下,激活A2AR可使小胶质细胞向M2表型极化,在慢性低灌注脑白质损伤中发挥保护作用;而抑制A2AR则产生相反效应;4.腺苷A2AR通过PKA-CREB信号通路调控小胶质细胞极化,进而调节慢性低灌注脑白质损伤。
姜海伟[2]（2021）在《基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究》文中研究表明目的1.通过对缺血性卒中后认知障碍（PSCI）相关“毒邪”进行具体分类,了解各类毒邪的临床分布特征及总体特性,初步分析黄连解毒汤用于PSCI治疗的可行性。2.基于“毒损脑络”理论,通过黄连解毒汤早期干预PSCIND患者,分析其对认知功能、日常生活能力、实验室指标、中医证候评分的疗效作用,并了解PSCI毒邪的动态变化特点。3.通过实验研究探讨黄连解毒汤干预PSCI的应用时机及部分相关机制,并进一步讨论“毒损脑络”理论对于PSCI病机的合理性。方法1.参考大数据分析结果及“SDSVD量表”中的症状要素,对入选的123例PSCI患者,参考“一般病证+严重、秽浊、迁延邪气”原则制定“PSCI中医毒邪症状要素表”并进行“毒邪”分类,并采用“SDSVD量表”进行中医辨证分型,分析各类毒邪与各中医证型、非特异性症状、发病危险因素、实验室检查（CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy）、TOSAT分型、影像学特征（侧支代偿、梗死部位、脑灌注）及认知功能等方面的分布特征及相关性,并从毒邪相兼情况及热性症状存在情况,评价PSCI相关“毒邪”分类方法的临床基础,分析毒邪的共同特性。分布率的比较采用?2检验,相关性分析采用Pearson相关性及Logistic回归分析。2.将60例PSCIND患者随机分为两组,对照组29例行西医基础治疗,治疗组31例加用黄连解毒汤,比较两组治疗前与治疗后1周、1月、3月、6月的MMSE、Mo CA、NIHSS、ADL、中医证候评分,比较两组治疗前与治疗后1周、1月的CRP、NSE、D-D、FIB、Hcy值,对治疗后1月、6月的疗效进行相关因素分析,总结分析“毒邪”的动态变化特点。计数资料根据方差检验情况行t检验或秩和检验,疗效相关性分析采用二元Logistic回归分析。3.将多发性脑梗死动物模型随机分为5组:假手术组、24h模型对照组、7d模型对照组、24h黄连解毒汤组、7d黄连解毒汤组。给药28天后对比观察其水迷宫检测结果以了解其认知功能,光镜观察梗死及周围区病理,CD34标记MVD,WB法测Notch信号通路Notch1、Jagged2、Hes1、Stat3蛋白及VEGF蛋白含量,ELISA法检测IL-6、IL-1β、TNF-β、IL-4、IL-10表达情况。各组之间的比较采用单因素方差（one-way ANOVA）分析。结果1.据“PSCI中医毒邪症状要素表”毒邪分类为热毒、痰毒、瘀毒、腑滞浊毒、正虚蕴毒。经Pearson相关性检验,各中医证型与各毒邪分布具有线性相关。Logistic回归分析发现,热毒与无多次脑梗死、无高血压、有糖尿病、侧支代偿差、CRP升高、嗜睡相关;痰毒与卒中到PSCI时间短、高脂血症、侧支代偿差、NSE升高相关;瘀毒与有高血压、吸烟、饮酒、小血管或前循环大血管病变、D-D及FIB升高有关;腑滞浊毒与侧支代偿差、CRP升高、嗜睡有关;正虚蕴毒与卒中到PSCI时间短、Hcy升高有关。整体毒邪与侧支代偿差、卒中到PSCI时间短、CRP升高、Hcy升高有关。各类“毒邪”相互交织,热象存在率平均达79.60%,提示各类“毒邪”存在共性及整体统一性。2.黄连解毒汤治疗PSCIND,在MMSE及Mo CA评分方面治疗组起效更早,可显着提高ADL评分（p<0.05）。对热毒内盛、痰浊阻络、腑滞浊留、气血不足证候评分可在治疗早期产生更积极作用（p<0.05）,可防阴虚阳亢证进一步加重。治疗组在CRP、NSE、D-D方面的改善作用更明显（p<0.05）。二元Logistic回归分析发现,治疗后1月有效性与采用黄连解毒汤,降低热毒内盛评分及清除热毒相关,同时与CRP、NSE值降低、ADL值降低相关。治疗后6月有效性与采用黄连解毒汤、总体毒邪被清除ADL值降低有关。3.动物实验研究结果,在认知功能行为学方面24h及7d黄连解毒汤组定位航行及空间探索能力优于各模型对照组（p<0.05）,24h黄连解毒汤组优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组梗死及周围区存活细胞密度相对较高。各黄连解毒汤组在大脑皮层Notch1、Jagged2、Hes1、STAT3蛋白及IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10表达改善作用均优于各模型对照组（p<0.05）。24h黄连解毒汤组在Hes1蛋白、IL-6、IL-4的表达优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。各黄连解毒汤组与对照模型组VEGF表达无明显差异（p>0.05）。24h黄连解毒汤组脑组织MVD显着优于7d黄连解毒汤组（p<0.05）。结论1.对毒邪的分类研究发现,各类毒邪在中医辨证分型、非特异性症状、TOSAT分型、实验室指标、影像学特征方面的分布具有一定的趋向性和相关性。多数毒邪相互交织存在,多数存在热性症状,具有整体统一性,采用黄连解毒汤早期干预PSCI具有可行性。2.采用黄连解毒汤干预PSCICN患者可对患者血CRP、NSE、D-D等及中医证候评分产生积极影响,可改善患者认知功能;黄连解毒汤对其整体毒邪具有清除作用,不单纯局限于热毒。其毒邪动态变化特点进一步反应了毒邪的整体性,也反应了随着病情发展进行“辨证论治”的必要性。3.在缺血性卒中急性期,尽早使用黄连解毒汤可减轻多发性脑梗死动脉模型大鼠的认知功能行为学损害,其部分机制是通过抑制Notch信号通路的激活、调节炎性因子及改善梗死周围区域微循环而实现的。“毒损脑络”理论反应了PSCI的病机特点,也反应了PSCI的“防”与“治”的整体一致性。
赵明[3]（2021）在《钙响应因子CaRF在小胶质细胞介导慢性低灌注性脑白质损伤中的作用与机制研究》文中指出血管性认知功能障碍（vascular cognitive impairment,VCI）是引起痴呆的病因之一,目前发病率已仅次于阿尔茨海默病（Alzheimer disease,AD）。随着2020年12月我国第七次人口普查登记完毕,我国人口总量已接近零增长,同时由于医疗条件的改善以及生活水平提高,人口呈现老龄化的趋势将在短时间内不可逆转,如何积极应对这一影响民生的问题则成为重中之重。由于VCI包含从轻度认知损害到痴呆的整个过程,因此了解疾病的病理发生机制和及时进行有效干预是预防VCI进展加重的有效手段。脑灌注不足是导致VCI和痴呆发生的重要因素,脑灌注减少与痴呆的严重程度具有显着的相关性,并且这种脑血流低灌注的降低与磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）T2序列下脑白质高信号（white matter hypertension,WMH）的严重性有关。这些白质变化的存在和严重程度,特别是额叶中的白质改变则是影响认知功能和痴呆症的重要决定因素,然而这种低灌注引起的白质损伤产生的病理机制仍未完全阐明,并且尚无有效药物来针对这一过程进行有效的干预。因此,深入研究这一病理过程的发病机制,并找到治疗慢性低灌注引起脑白质损伤的有效靶点将为治疗VCI和严重痴呆提供新的希望。小胶质细胞是广泛存在于大脑中的固有免疫细胞,一旦脑实质受到外界刺激或损伤,小胶质细胞在多种因素作用下被迅速活化,同其他免疫细胞一起参与调控神经炎症反应,修复受损的组织。在慢性脑血流低灌注的动物模型中,小胶质细胞在大脑低灌注早期即可出现增殖现象,从静息状态转变为激活状态且这种改变贯穿于慢性灌注不足的整个阶段。通过去除小胶质细胞或诱导小胶质细胞向抑炎表型转化能够促进胼胝体部位的再髓鞘化,增加白质部位的完整性,进而改善认知功能,这表明通过调控小胶质细胞的不同表型可以作为治疗低灌注性认知功能损害的一种有效手段。但引起小胶质细胞表型改变的具体原因仍不十分明确,需要了解并找到能够调控这小胶质细胞定向转化的关键靶点。钙响应因子（calcium response factor,Ca RF）是一种具有转录功能的钙反应蛋白,能够在神经元中发挥转录因子的作用,主要在脑中和性腺中表达,并且在人类和动物中具有高度的保守性。我们的前期研究表明Ca RF与同源盒基因（MSX3）一样在不同表型的小胶质细胞中具有差异表达的特点,能够在抑炎表型的小胶质细胞中出现高表达趋势,提示其也同样具有改变小胶质细胞活化状态的潜在可能性。那么,Ca RF是否能够通过小胶质细胞介导慢性低灌注脑白质损伤,目前尚未见相关的研究报道。本研究运用多种实验方法,验证了Ca RF在慢性低灌注脑白质损伤模型及WMH患者中通过调节小胶质细胞表型来影响脑白质损伤及认知功能的作用,为后期研究Ca RF在小胶质细胞表型调控的信号通路打下了坚实的基础,也为临床上VCI病变或痴呆条件下探索与设计理想的神经免疫疗法开拓了新的思路。研究取得的主要结果如下:一、构建慢性低灌注动物模型:双侧颈总动脉狭窄（bilateral common carotid artery stenosis,BCAS）及其对认知功能和脑白质的影响1、BCAS模型在吸入性麻醉手术过程中具有较好的术后存活率;2、前循环脑血流量（cerebral blood flow,CBF）在术后即刻（57.73%±20.06）和术后30天（82.05%±7.9）均显着低于术前CBF,呈慢性低灌注状态;3、BCAS模型存在学习能力下降和空间记忆力障碍的认知功能异常;4、BCAS小鼠胼胝体、纹状体均出现一定程度的脱髓鞘改变,且随时间延长髓鞘碱性蛋白（myelin basic protein,MBP）和髓鞘相关糖蛋白（myelin associated glycoprotein,MAG）表达不断减少。二、钙响应因子Ca RF在BCAS模型中的表达模式1、Ca RF在BCAS胼胝体的小胶质细胞中表达减少。2、小胶质细胞在BCAS第7天表现出显着促炎表型的同时其中Ca RF表达显着减少,在第14天表现出抑炎性表型的同时Ca RF表达较前有所升高,在第30天则表现出单纯增殖状态,表型无明显改变。三、条件性敲除小胶质细胞中Ca RF加重BCAS的认知功能障碍和脑白质损伤1、条件性敲除CX3CR1细胞中Ca RF能够引起小鼠记忆再提取障碍、胼胝体髓鞘的丢失和MBP/MAG蛋白的减少,而这种损伤在BCAS中更加显着。2、髓鞘超微结构在慢性低灌注中受到损伤。3、缺少Ca RF导致胼胝体中小胶质细胞激活和促炎表型的转化。四、Ca RF干预的小胶质细胞能够保护少突胶质前体细胞（oligodendrocyte precursor cell,OPCs）和神经元的突触1、小胶质细胞中过表达Ca RF的条件上清具有促进OPCs分化成熟并且降低OPCs凋亡的作用。2、小胶质细胞中缺少Ca RF后导致了体内前额叶皮层（medial prefrontal cortex,m PFC）神经元突触蛋白的减少,而在BCAS的环境中进一步增加了突触的损伤。五、以Ca RF为靶点对小胶质细胞进行的药物筛选及地加瑞克对BCAS的保护作用1、利用FDA认证的1959个化合物干预原代培养的小胶质细胞,发现地加瑞克能够在RNA水平和蛋白水平共同升高小胶质细胞中的Ca RF。2、地加瑞克在BCAS中能够改善小鼠的认知功能,0.2mg的剂量组在学习和工作记忆过程中表现出较好的治疗效果。3、地加瑞克能够减轻慢性低灌注引起的脱髓鞘损伤、保护神经元轴突的完整性、恢复m PFC的突触蛋白表达和树突棘的数量。六、Ca RF在慢性低灌注WMH患者中具有的诊断价值1、慢性低灌注WMH组年龄、高血压、MOCA评分是WMH的独立危险因素。2、WMH患者外周血单核巨噬细胞中Ca RF水平显着下调,与TNF-α和IL-1β的表达呈现显着负相关性,而与ARG-1呈现显着正相关性。3、Ca RF与WMH等级具有显着的负相关性,Ca RF具有单独作为诊断和预测WMH的效能和优势。通过以上结果,本课题研究得出以下结论:1、Ca RF通过小胶质细胞参与了慢性低灌注脑白质损伤的过程,Ca RF的减少或丢失会促进小胶质细胞向炎性表型转化,造成胼胝体脱髓鞘和认知功能障碍。2、Ca RF具有调控小胶质细胞促进OPCs分化成熟和减少凋亡的能力,小胶质细胞中缺少Ca RF可引起小鼠m PFC神经元突触蛋白的减少,在BCAS的环境中更为显着。3、地加瑞克能够升高小胶质细胞中Ca RF的表达,保护BCAS胼胝体脱髓鞘损伤,增加m PFC神经元树突棘的数量,以及改善BCAS小鼠的认知功能。4、慢性低灌注WMH患者外周血单核巨噬细胞中Ca RF表达下降,且Ca RF具有单独作为预测和诊断WMH的效能和优势。
胡杨[4]（2021）在《在慢性缺氧条件下Hsp27对脑血管内皮细胞的保护作用研究》文中提出目的:建立脑血管内皮细胞慢性缺氧模型,观察脑血管内皮细胞在慢性缺氧状态下小热休克蛋白20（heat shock protein 20,Hsp20）、小热休克蛋白22（heat shock protein22,Hsp22）、小热休克蛋白27（heat shock protein 27,Hsp27）以及肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素-1β（interleukin-1beta,IL-1β）的表达情况,以及在慢性缺氧条件下Hsp27与炎症因子之间的相关性,探讨在慢性缺氧时其对脑血管内皮细胞可能的保护作用。方法:将鼠脑血管内皮细胞b End.3于低氧条件下（2%O2、5%CO2和93%N2）培养,模拟慢性脑低灌注体外细胞模型。使用倒置荧光显微镜观察常氧培养及缺氧培养24h、48h、72h的细胞形态,并用CCK-8检测细胞活性。使用western blot及RT-q PCR检测热休克蛋白Hsp20、Hsp22、Hsp27以及炎症因子TNF-α、IL-1β的表达。使用Hsp27抑制剂KRIBB3培养脑血管内皮细胞后检测炎症因子的表达,验证其相关性。结果:1、慢性缺氧培养后显微镜下可见内皮细胞皱缩、变圆,与周围细胞联成网状,细胞间隙明显增宽,存活细胞数减少。2、随着慢性缺氧培养时间延长,与对照组相比,缺氧培养组细胞活力明显下降（P<0.05）。3、慢性缺氧处理细胞后,小热休克蛋白Hsp20、Hsp22及Hsp27的表达均较对照组升高（P<0.001）。4、慢性缺氧处理细胞后,炎症因子TNF-α及IL-1β的表达较对照组升高（P<0.001）。5、使用Hsp27抑制剂KRIBB3处理细胞并进行缺氧培养,炎症因子表达量较未处理组明显增高（P<0.001）。结论:1、慢性缺氧培养脑血管内皮细胞可以作为慢性脑低灌注体外细胞模型,随着缺氧时间延长,细胞活性明显下降。2、慢性缺氧使脑血管内皮细胞上小热休克蛋白的表达增加。3、慢性缺氧使脑血管内皮细胞上炎症因子的表达增加。4、Hsp27通过减轻炎症反应来保护慢性缺氧造成的脑血管内皮细胞损伤。
郭俊峰[5]（2020）在《基于ANT及ERP对OSA患者注意功能特点的研究》文中认为背景阻塞性睡眠呼吸暂停（obstructive sleep apnea,OSA）是指人体在正常睡眠状态中反复出现可逆的、短暂的上呼吸道阻塞或狭窄,导致人体处于呼吸暂停或者低通气状态,常常伴有鼾声明显、日间过度嗜睡等其他临床表现,进而将导致全身多器官、多系统功能受损的一组临床症候群。指南中指出其发病的主要危险因素包括年龄、性别、肥胖、吸烟饮酒史、上气道解剖异常等,最常见于中年超重或肥胖的男性,并且有明显的性别和体重的差异。其临床症状的特点除了在睡眠过程中反复出现的呼吸暂停及鼾声之外,还有睡眠结构紊乱、异常觉醒、日间过度嗜睡等等,症状严重时将伴有行为、心理、智力等方面的改变。指南中主要根据AHI和SaO2并结合临床症状对患者病情进行诊断及分度,而在针对OSA患者认知损伤的研究中发现,患者认知功能障碍的严重程度与AHI密切相关,同时,其损伤的特点还存在不同年龄层次间的区别,以及不同性别间的差异。认知心理学认为,认知活动是指人体接受外界信号输入并对输入的信息进行加工的过程,囊括了感觉、知觉、注意、记忆和思维等心理活动。OSA患者出现认知功能障碍存在非常复杂的发生机制,目前尚未完全清楚,学者们认为肯定是多种原因导致的后果,其中,睡眠期间反复的间断性缺氧和睡眠结构紊乱是导致认知障碍的两个重要机制。长期的慢性缺氧会造成多组织器官尤其是中枢神经系统的缺血缺氧性损害,而睡眠结构紊乱常表现出睡眠片断化、觉醒数增多、睡眠的有效时间缩短、睡眠深度不足等多种问题,综合其他各种原因,患者将逐渐出现日间嗜睡、警觉性下降、注意力障碍等一系列与认知障碍相关的临床症状。在认知活动中,注意功能本身并不是一种独立的心理过程,是时刻伴随着其他各种心理活动的特殊心理现象,贯穿于心理过程的始终并在其中起维持指向作用。注意的机制应该是人类祖先在危险的自然环境为防御野兽和敌人的侵袭而不断进化产生的。在现代快节奏的生活与工作中,人的大脑时刻都在通过全身各种感觉器接受外界信息,而通过注意功能的正常运行来排除干扰信息,并选择出需要进行深度加工的有效信息。这样的心理活动就体现了注意功能进行信息加工的指向性和集中性,这两个基本特征需要紧密相关,互相配合,以便使被选中的信息能够被有效地记录、加工和处理。在针对注意功能的研究中,人们又对注意本身进行了划分,将注意定义为包含了多种成分的复杂功能体系。研究者运用各种手段对注意功能进行评估,其中最方便实用的是各种评估量表,有包含注意内容的认知综合评估量表,例如MMSE和MoCA等,也有根据注意的特征设计的专注于注意功能的测试量表,例如持续操作测试、Stroop色词关联测验等。然而这些量表及测验被认为仅评估了部分的注意功能,Posner等人就提出了有功能定位的注意功能网络,而FAN教授等人根据注意网络的理论设计出名为ANT的行为学测试程序,能够相对全面地评估注意功能。而随着神经电生理技术的发展,ERP作为公认的能够相对客观地反映认知功能的评估手段被广泛地用于实践,其中P300成分被学者们认定为一个相对客观的生物指标,并被认为与注意的关系最为密切,只有在注意的条件下才能诱发P300,而非注意条件下基本不能诱发出P300。与传统的认知心理量表结果相比,ERP的指标在评估轻度认知损害时更加敏感。虽然既往关注于注意功能的临床研究发现,很多疾病都可能导致注意功能障碍,但是针对OSA患者注意功能损伤的系统性研究相对较少,相关研究结果支持低氧或睡眠障碍将导致注意功能的效能下降,这些结论佐证了 OSA患者存在注意功能损害的确定性。目前,OSA能导致患者认知功能损伤是目前学术界公认的观点,但是OSA患者认知功能障碍的主要特征是怎样的呢?功能损伤是以认知的哪些子项目为主呢?是否是以注意功能受损为主的呢?OSA患者的视觉注意网络功能的损伤情况是怎样的呢?是注意网络系统整体受损,还是部分受损呢?OSA患者的视觉注意功能损伤的时域特征是怎样的呢?是随意注意受损严重,还是非随意注意受损严重呢?这些问题仍是大家一致争论的内容,我们将通过本实验对以上问题进行分析研究。第一章 阻塞性睡眠呼吸暂停患者认知功能障碍及其特征目的:通过研究确认OSA患者存在认知功能损伤,进一步明确OSA患者的认知功能损伤是一种以注意等功能损伤为主的轻度认知功能障碍。方法:招募并筛选了 43名OSA患者及26名健康志愿者,所有被试均需要接受1整晚的PSG监测与评估,并根据AHI对被试进行分组。被试者被要求在晚上10:00前上床,第二天早上6:00醒来,记录身体质量指数、睡觉前及睡醒后血压、AHI和夜间最低血氧饱和度。在PSG监测后的第二天,所有睡眠时间超过6小时的志愿者于上午10:00在独立、安静房间内开始进行简易精神状态量表和蒙特利尔认知评定量表的评估,同时完成了 Epworth睡眠量表、抑郁自评量表、焦虑自评量表等问卷调查。采用SPSS 20.0软件（芝加哥,伊利诺伊州,美国）进行统计学分析。结果:人口学的结果显示,性别、教育年限和年龄的三组间差异无统计学意义（p>0.05）。临床检查与评估结果显示,三组间BMI、BP、SaO2 nadir、AHI、ESS、SDS、SAS、MMSE、MoCA总分的差异均有统计学意义（p<0.05）。两两比较后发现,中重度组患者的BMI、cBP、bBP、mBP、AHI、SAS明显高于其他两组,而SaO2 nadir、MMSE及MoCA总分明显比其他两组低,差异有统计学意义（p<0.05）,其中Sa02 nadir和SAS的轻度组与正常组间差异也有统计学意义（p<0.05）。OSA两组的ESS评分均明显高于正常组,差异有统计学意义（p<0.05）,但OSA两组的组间差异不显着。中重度组的SDS评分与正常组的组间差异有统计学意义（p<0.05）。MoCA子项目中的视空间、注意及延迟记忆存在显着的组间差异（p<0.05）,两两比较后发现,中重度组的得分明显低于其他两组（p<0.05）,但轻度组与正常组的组间差异无统计学意义。结论:OSA患者存在体重超标、血压升高、日间嗜睡严重等问题,并且发生了情绪改变。患者存在明确的认知损伤,其中中重度OSA患者认知功能损伤最重,而轻度患者未发现损伤,而且OSA患者认知损伤以注意、记忆及视空间功能损伤为主要特征的轻度认知功能障碍。第二章 阻塞性睡眠呼吸暂停对患者注意网络测试的影响目的:通过研究明确OSA患者存在注意功能的损伤,进一步确认患者的注意网络功能的损伤是整体性网络损伤,还是部分性子网络功能受损为主的注意网络损伤。方法:招募并筛选了 30名OSA患者及26名健康志愿者,所有被试均需要接受1整晚的PSG监测与评估,并根据AHI对被试进行分组。被试者被要求在晚上10:00前上床,第二天早上6:00醒来,记录身体质量指数、睡觉前及睡醒后血压、AHI及夜间最低血氧饱和度。在PSG监测后的第二天,所有睡眠时间超过6小时的志愿者于上午10:00在独立、安静房间内进行注意网络测试的评估,同时完成了 Epworth睡眠量表、抑郁自评量表、焦虑自评量表等问卷调查。采用SPSS 20.0软件（芝加哥,伊利诺伊州,美国）进行统计学分析。结果:PSG监测结果显示,OSA组的SaO2 nadir明显低于对照组,而AHI明显升高,组间差异有统计学意义（p<0.01）。临床结果显示,BMI、BP、ESS和SAS的组间差异有统计学意义（p<0.01）。根据两组被试在四种线索（无、中心、双侧、空间）提示条件下对三种类型靶刺激（中性、一致、不一致）的平均反应时间分析,反应时间的组别主效应显着（p<0.01）,OSA组反应时间比健康组要长;线索主效应显着（p<0.01）,在无提示条件下反应时间最长,在空间提示下反应时间最短;Flanker主效应显着（p<0.01）,在不一致条件下的反应时间显着增加,明显大于中性条件或一致条件,而后两种条件下的反应时的差异不显着。注意网络测试整体指标的比较结果显示,OSA组的总反应时间明显延长（p<0.05）,但两组间的正确率差异不显着。针对注意网络的三个子网络功能的分析显示,警觉网络的效应值比对照组明显减小,执行控制网络的效应值却明显延长,差异有统计学意义（p<0.05）。结论:OSA患者的确出现注意功能缺损,当无线索提示时,OSA患者在Flanker类型不一致的条件下反应最慢,其注意损伤是以警觉及执行控制两个子网络功能受损为主要特征的。第三章 阻塞性睡眠呼吸暂停患者视觉注意损伤的事件相关电位研究目的:通过研究评估OSA患者在非随意注意和随意注意状态下的脑电活动,分析脑电变化是以P3a代表的朝向反应的改变为特征,还是以P3b代表的集中注意的改变为特征。方法:招募并筛选了 26名OSA患者及23名健康志愿者,所有被试均需要接受1整晚的PSG监测与评估,并根据AHI对被试进行分组。被试者被要求在晚上10:00前上床,第二天早上6:00醒来,记录身体质量指数、睡觉前及睡醒后血压、AHI及夜间最低血氧饱和度。在PSG监测后的第二天,所有睡眠时间超过6小时的志愿者于上午10:00在独立、安静房间内进行事件相关电位视觉ODDBALL范式的评估,同时完成了 Epworth睡眠量表、抑郁自评量表、焦虑自评量表等问卷调查。采用SPSS 20.0软件（芝加哥,伊利诺伊州,美国）进行统计学分析。结果:两组被试都可以诱发出明显的P3a和P3b电位。其中正常组表现为Cz、Pz电极采集的脑电波幅比Fz要高,而OSA组P3a及P3b的波幅均比对照组出现显着的降低,尤其是p3a在Fz和Pz的波幅降低显着。而在潜伏期的变化方面,OSA组P3a及P3b的潜伏期显着延长,而且两者均在Pz位置上延长明显。相关性分析的结果提示P300的改变与PSG结果和情绪评分的关系较为密切,其中P3a和P3b的波幅的改变与AHI负相关,与SaO2正相关,P3b潜伏期的变化与AHI正相关。结论:OSA患者的视觉非随意注意及随意注意功能均出现受损,导致患者应对突发事件情况下的觉察能力减退,对视觉信息加工的速度减慢。
蔡立辉[6]（2020）在《基于脑电图的意识障碍多层脑网络分析与评估》文中提出意识障碍（Disorder of Consciousness,DOC）是一种严重脑损伤导致的慢性脑部疾病,其临床评估和机制研究依赖于神经生理学和神经影像学经验的互补。脑电图凭借经济无创、高时间分辨率的优势,为DOC患者的实时床旁监测提供了一种选择。作为大脑内部节律性电活动的直接反映,静息态脑电包含神经集群振荡、信息流路径等丰富信息。越来越多的证据表明脑功能网络的变化与意识的丧失或恢复相关,但目前基于脑电的功能网络研究仍主要局限于时间恒定假设或单一频率视角。如何将脑电信号所蕴含的丰富信息融入网络并从网络角度理解DOC患者的脑功能异常,是DOC评估和病理机制研究的关键问题之一。针对这一问题,本文利用静息态脑电构建DOC的多层脑功能网络,将EEG网络中节律、时间和空间信息进行有机结合,在不同的时空尺度上全面评估DOC患者的意识状态。首先,为了刻画脑网络的跨频率耦合特性,构建了基于频率的EEG多路复用网络和全连接多层网络,揭示了DOC脑网络在不同节律之间的信息交互异常。研究证实了意识程度与跨频率耦合强度的正相关性,且随着意识状态的下降,多层网络的分离和整合特性也发生了显着变化。其次,在不同时标下构建了EEG的时变脑功能网络,从网络时间变异性和状态转换两方面建立了网络时间动态和意识水平的联系。研究发现在alpha频带下网络连接强度的变异性随意识水平的提升增大,而连接模式则相反。在不同的时标下,网络状态转换与意识状态呈现不同关系。相比于正常人,DOC患者的网络工作状态更趋于随机,且在分离和整合状态间达到一种新的动态平衡。最后,构建了时变的跨频率耦合网络,揭示了DOC网络跨频率耦合特性的动态变化规律。研究发现了跨频率动态耦合存在的证据,且与意识水平正相关。在不同时空尺度上,DOC对网络跨频率耦合模式的转换均具有明显调制作用,但在不同脑区和频带间存在较大差异。本研究促进了我们对于DOC网络机理的理解,为DOC患者的意识水平评估提供了潜在生理标记;同时研究还丰富了EEG脑网络的分析方法,为大脑神经电活动的解构提供了新的视角和思路。
陈甲[7]（2020）在《慢性缺血缺氧条件下p75神经营养素受体在神经损害中的作用研究》文中研究指明血管性认知损害（vascular cognitive impairment,VCI）是仅次于阿尔茨海默病的能够导致认知损害和痴呆的疾病,包括了从轻度认知损害（mild cognitive impairment,MCI）到痴呆的整个阶段。特别是在全球快速老龄化的社会进程中,血管性认知损害的患病率将显着上升。根据我国2010年第六次人口普查结果,我国仅60岁以上人口就已达1亿8千万之巨,占人口总数的13.3%。因此,整个社会将面临着包括血管性认知损害和痴呆在内的威胁老年人群健康的疾病挑战。慢性脑低灌注性认知损害（chronic cerebral hypoperfusion-induced VCI,CCH-VCI）是血管性认知损害临床类型中容易被忽视的重要类型,主要是由于各种原因导致大脑半球或全脑持续性缺血低灌注而引起,本质上其发展过程为持续脑低灌注-慢性缺血缺氧-进展性神经损害-神经网络结构和功能破坏-认知损害和痴呆。在中老年人群中,除了少数心脏泵血功能衰竭等原因外,更多的是长期存在高血压、糖尿病等脑血管危险因素的人群中,无明显卒中发作的脑血管病变逐渐增多,如颅内单侧或双侧的脑供血动脉硬化和渐进性狭窄,可造成大脑半球或全脑的持续性缺血低灌注,神经损害逐渐加重并引发记忆、执行能力等功能损害,虽然这种损害在早期可能是可逆的,但是长期的、持续性的脑组织缺血缺氧可伴随反复卒中的发生认知损害加重,最终导致痴呆。值得注意的是,与急性缺血导致的突发性神经损伤不同,慢性脑低灌注性认知损害往往有一个相对隐匿和逐渐发展的过程,因此起始认知损害症状往往不够典型,即使被发现其严重性也容易被忽视,因此需要引起注意。而对于那些不能够或暂不适合进行血管成形等外科治疗的患者,持续的缺血低灌注带来的神经损害将破坏神经网络结构和功能的完整性,导致认知损害甚至痴呆。遗憾的是,除了少数改善痴呆症状的药物,目前尚无明确的针对这种慢性脑低灌注条件下神经缺血缺氧损伤的药物,因此,寻找能够在慢性缺血缺氧条件下避免或改善神经损害这一重要环节的治疗靶点和干预策略值得我们探索。神经损害的重要机制通常包括氧化应激、神经炎症反应、神经细胞死亡以及神经突触可塑性破坏等环节。与常见的神经组织突然缺血或缺血再灌注损伤（如缺血性卒中）不同,中枢神经系统（central nervous system,CNS）可因长期的慢性低灌注而导致持续缺血缺氧,在这种不利环境下,神经细胞代谢受到损伤的同时还可能发生适应性调整,基因转录和表达出现变化,而这种变化可能是暂时有利的,但也可能从长时间来看是有害的,比如持续过度的神经炎症反应将带来自身损害。有证据就显示,血清白细胞介素6、C反应蛋白等与老年人群认知功能下降相关。因此,我们需要明确在这种情况下神经损害的特点以及可能干预的靶点。p75神经营养素受体（p75 neurotrophin receptor,p75NTR）是肿瘤坏死因子受体超家族成员,多表达于与认知功能有关的脑内胆碱能神经元上,被认为是多种神经营养素前体的受体。既往研究表明,在缺血性脑卒中、阿尔茨海默病患者血清中,被蛋白酶水解脱落的p75NTR细胞外段（p75NTR extracellular domain,p75NTR-ECD）含量增高且可能与疾病的严重程度相关,间接提示p75NTR可能在神经系统疾病的发生或进展中发挥作用。鉴于脑缺血低灌注同时存在于上述神经系统疾病中,可以推测p75NTR可能在CCH-VCI中起到作用。但是,对于在慢性脑低灌注引发的持续性缺血缺氧条件下,p75NTR在中枢神经系统中的表达和在神经损害过程中的作用尚不清楚。另一方面,在上述慢性中枢神经系统疾病中,多个研究均报告了炎症因子的异常升高,并被认为可能与脑内缺血低灌注导致神经损害有关。基于此,本研究通过以下实验环节逐步深入探索,来寻找p75NTR在慢性缺血缺氧引发神经损害过程中发挥作用的证据。首先我们研究了慢性脑低灌注认知损害患者血清中p75NTR-ECD及多种炎症因子的水平,并寻找两者的相关性,通过其受体胞外段的研究,间接证明慢性脑低灌注性认知损害患者脑内p75NTR很可能出现了相应的变化。为进一步证实缺血缺氧条件下p75NTR在神经细胞损伤中的作用,我们通过三气培养箱和无糖培养在体外构建人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的氧糖剥夺（oxygen-glucose deprivation,OGD）模型,来模拟体内缺血缺氧环境下p75NTR表达的变化及其在细胞损伤中的作用。这里我们使用了一种小分子2-氨基-3-甲基-戊酸酰胺（LM11A-31）,它能通过胃粘膜和血脑屏障并能作为竞争性配体与p75NTR结合,从而一定程度上阻断其介导效应。最后,我们通过双侧颈总动脉不完全结扎（残留内径0.22mm）制作慢性低灌注性认知损害的小鼠模型,来研究持续性缺血缺氧条件下脑内p75NTR的表达变化,以及其在神经炎症反应、神经凋亡及突触可塑性破坏等环节中的作用。各部分研究内容摘要如下:第一部分慢性脑低灌注性认知损害患者血清p75神经营养素受体细胞外段水平及其与炎症因子的关系目的:检测慢性脑低灌注性血管性认知损害（CCH-VCI）患者血清p75神经营养素受体胞外段（p75NTR-ECD）水平,并探讨其与肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）的关系。资料和方法:选择海军军医大学长海医院脑血管病中心2018年8月至12月收治的34例CCH-VCI患者,以及同期相同年龄段的36名中老年健康人和34例缺血性脑卒中患者作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验测定并比较3组研究对象的血清p75NTR-ECD、TNF-α、IL-1β、IL-6水平。采用Spearman相关分析研究CCH-VCI患者血清p75NTR-ECD水平与TNF-α、IL-1β、IL-6水平的相关性。结果:CCH-VCI组血清p75NTR-ECD水平高于健康对照组和缺血性脑卒中组[(544.36（440.88,628.50）pg/m L vs 276.49（262.59,313.87）pg/m L、366.87（337.09,450.43）pg/m L],差异均有统计学意义（U=87.500、335.500,p均<0.05）。CCH-VCI组患者血清TNF-α、IL-1β、IL-6水平分别为196.02（141.20,280.35）pg/m L、68.23（60.79,91.94）pg/m L、51.04（40.24,65.26）pg/m L,缺血性脑卒中组分别为218.67（143.76,281.28）pg/m L、76.87（59.10,99.91）pg/m L、64.45（43.13,86.76）pg/m L,均分别高于健康对照组[分别为73.71（56.94,79.81）pg/m L、42.98（34.52,51.34）pg/m L、14.97（11.76,21.19）pg/m L],差异均有统计学意义（U=4.000、31.000,132.000、106.000,13.000、48.000;p均<0.05）。CCH-VCI患者血清p75NTR-ECD水平与TNF-α水平存在相关性（r=0.391,p=0.022）,但与IL-1β和IL-6水平均无明显相关性（r=0.032、0.164,p=0.855、0.355）。结论:慢性脑低灌注损伤后p75NTR可能与TNF-α等炎症因子有关,并共同参与了CCH-VCI的发病。第二部分氧糖剥夺条件下p75神经营养素受体在人神经母细胞瘤细胞中的表达和作用目的:探讨氧糖剥夺（OGD）条件下p75神经营养素受体（p75NTR）在人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）中的表达变化和作用。材料和方法:SH-SY5Y细胞OGD模型的建立采用三气培养箱无糖无血清培养方法。模型成功建立后设立3组:无血清常规培养组（对照组）、OGD组和OGD+p75NTR竞争性阻断剂LM11A-31处理组（OGD+LM11A-31组）。在细胞培养12h时用利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测3组细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）活力检测试剂盒测定LDH释放活力,流式细胞术检测凋亡细胞比例,蛋白质印迹法检测p75NTR的蛋白表达。结果:成功构建SH-SY5Y细胞OGD模型。细胞培养12h时,OGD组细胞存活率（%）显着低于对照组,（50.34±5.55 vs.94.80±4.06,P<0.05）;OGD+LM11A-31组细胞存活率同样低于对照组（64.68±4.59 vs.94.80±4.06,P<0.05）,但高于OGD组（64.68±4.59 vs.50.34±5.55,P<0.05）。OGD组LDH释放活性（U/L）显着高于对照组（353.09±30.67 vs.46.93±5.49,P<0.05）;OGD+LM11A-31组LDH释放活性同样高于对照组（282.20±25.60 vs.46.93±5.49,P<0.05）,但低于OGD组（282.20±25.60 vs.353.09±30.67,P<0.05）。OGD组细胞凋亡比例（Q2+Q4,%）明显高于对照组（14.98±2.59 vs.1.82±0.45,P<0.05）;OGD+LM11A-31组凋亡细胞比例也高于对照组（7.36±1.98 vs.1.82±0.45,P<0.05）,但低于OGD组（7.36±1.98 vs.14.98±2.59,P<0.05）。OGD组p75NTR相对表达水平高于对照组（0.41±0.02 vs.0.06±0.01,P<0.05）;OGD+LM11A-31组p75NTR表达也高于对照组（0.19±0.03 vs.0.06±0.01,P<0.05）,但是低于OGD组（0.19±0.03 vs.0.41±0.02,P<0.05）。结论:氧糖剥夺条件下p75NTR在SH-SY5Y细胞中表达增加,可能促进了神经细胞损伤和凋亡。第三部分p75NTR在慢性脑低灌注性认知损害模型小鼠神经损伤中的作用目的:研究p75NTR在慢性脑低灌注性认知损害模型小鼠脑内的表达和在这种慢性脑缺血缺氧条件下对神经损伤的影响。材料和方法:采用双侧颈动脉不完全结扎的方法建立慢性脑低灌注性认知损害（CCH-VCI）小鼠模型（均为5月龄雌性c57BL/6小鼠）。设置正常对照组（Control）、假手术组（Sham）、手术模型组（CCH-VCI）和模型药物干预组（CCH-VCI+LM11A-31）,采用ELISA检测外周血中炎症因子水平,组织化学和Western blotting方法检测各组小鼠脑内NF-κB表达和磷酸化水平、神经凋亡和JNKs表达及磷酸化水平、树突棘数量密度和PSD-95表达情况,以及p75NTR在各组的表达。结果:通过双侧颈动脉不完全结扎成功建立CCH-VCI小鼠模型。分组实验显示,CCH-VCI组与假手术组比较其小鼠血清TNF-α、IL-1β和IL-6水平增高（TNF-α:129.17±5.42 vs.29.64±4.27;IL-1β:40.67±3.69 vs.16.13±2.41;IL-6:50.59±8.88vs.14.43±2.93;pg/ml,P均<0.05）、脑内p75NTR相对表达上调（0.400±0.037 vs.0.053±0.005,P<0.05）、NF-κB p65表达和磷酸化水平增高（p65/β-Actin:0.349±0.033 vs.0.073±0.003,P<0.05;p-p65/p65:0.587±0.055 vs.0.310±0.018,P<0.05）、JNKs表达和磷酸化水平增高（JNKs/β-Actin:0.348±0.009 vs.0.057±0.001,P<0.05;p-JNKs/JNKs:0.463±0.015 vs.0.282±0.049,P<0.05）、神经凋亡增加（TUNEL阳性染色面积比%:1.587±0.128 vs.0.363±0.021,P<0.05）、PSD-95表达降低（0.144±0.004 vs.0.495±0.019,P<0.05）、树突棘数量密度降低（0.160±0.055 vs.0.480±0.084,P<0.05,个/μm）,而p75NTR被阻断后上述变化程度降低,且正常对照组和假手术组之间均无统计学差异。结论:p75NTR在慢性低灌注性认知损害中对神经炎症反应、神经凋亡、突触可塑性破坏等环节起到介导和调节作用,是有效干预的潜在靶点。通过以上结果,本课题研究得出以下结论:1.p75NTR参与了慢性脑低灌注性认知损害的发病基础,其本质是p75NTR参与介导了慢性缺血缺氧条件下的神经损害过程。2.在慢性缺血缺氧条件下p75NTR表达上调并促进与神经损伤有关的病理过程,如神经炎症反应、神经凋亡。3.在慢性缺血缺氧条件下,p75NTR通过促进神经炎症反应、神经凋亡和神经突触可塑性等机制环节从而促进了神经损伤的发生,并破坏神经网络和结构的完整性,这也是慢性脑低灌注性认知损害的重要病理机制之一,有希望成为其有效的干预靶点。
张晓岩[8]（2020）在《西红花苷预处理保护急性高原缺氧大鼠脑海马神经元的SIRT1/PGC-1a机制研究》文中指出背景及目的:青藏高原,平均海拔4000米以上,号称“世界屋脊”。但是由于空气稀薄、大气压低、紫外线强等因素导致大部分高原地区自然环境十分恶劣。而急性暴露于高原低压低氧环境下,存在着的发生高原疾病风险。人体在高原急性低氧等环境因素影响下会发生一系列的生理病理改变,其中急性低氧环境是导致这些改变的最主要因素。脑是机体最主要的耗氧器官之一,在急性缺氧状态下对缺氧损害具有很高的敏感性,尤其是脑海马结构和功能的损伤最明显。因此如何通过药物预防这种病理性损伤是高原医学脑科学的研究热点。沉默调节蛋白1（Silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1）为依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）的去乙酰化酶。SIRT1通过调控过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助因1α（peroxisome proliferators activated receptorγcoactivator 1α,PGC-1α）等相关因子在细胞线粒体生物合成、细胞的凋亡、组织细胞抗氧化以及在延长细胞寿命方面都起到了非常重要的调控作用。西红花苷是传统药材藏红花（Saffron,Crocus sativus L）的有效活性成分。现代医学研究发现西红花苷具有抗氧化、抗凋亡、抗癌、神经保护及防治心血管疾病等广泛的药理作用。基于课题组前期研究发现西红花苷可以上调高海拔急性低氧条件下大鼠脑海马SIRT1表达。所以针对性提出假设:在急性高海拔低氧条件下西红花苷预处理能否对海马神经元发挥保护作用,以及与SIRT1/PGC-1α通路调节有何联系?为回答以上问题,课题进行了四方面的研究（1）在海拔4200m现场建立大鼠高海拔急性低氧脑海马损伤模型;（2）通过西红花苷不同剂量（25mg/kg/d、50mg/kg/d、100mg/kg/d）预处理对大鼠高海拔急性低氧脑海马损伤模型低氧72小时的作用,明确保护作用及SIRT1/PGC-1α通路分子保护机制和西红花苷最佳有效浓度;（3）验证西红花苷最佳浓度预处理对大鼠高海拔急性低氧脑海马损伤模型在高海拔急性低氧1、3、5、7天的保护作用及SIRT1/PGC-1α通路分子保护机制;（4）在整体动物层面阐明西红花苷通过SIRT1/PGC-1α通路调节对大鼠高海拔急性低氧脑海马损伤模型的保护机制,同时以HT22细胞为研究对象,在细胞层面验证西红花苷对低氧条件下HT22细胞的保护作用,及通过相关通路发挥抗线粒体损伤、抗氧化应激、抗凋亡分子保护机制。方法:1.模型构建:雄性SD大鼠,从海拔2250m通过5小时急进海拔4200m现场建立大鼠高海拔急性低氧脑海马损伤模型。通Morris水迷宫实验检测学习和记忆能力;通过HE染色、Nissl染色观察海马组织病理学变化;透射电镜观察海马神经元超微结构的变化;检测脑海马SOD、GSH-Px和MDA表达;TUNEL法检测大鼠脑海马神经元凋亡率。2.西红花苷预处理通过SIRT1/PGC-1α通路调节对大鼠高海拔急性低氧脑海马损伤模型保护机制及最佳剂量筛选:雄性SD大鼠随机分为5组,低海拔对照组（2250m）、急性高海拔低氧组（4200m）、西红花苷低剂量+急性低氧组（25mg/kg/d）、西红花苷中剂量+急性低氧组（50mg/kg/d）、西红花苷高剂量+急性低氧组（100mg/kg/d）。用药组每天肌肉注射西红花苷1次,对照组每天肌肉注射相同体积的0.9%Nacl,连续给药3天后运至高海拔低氧环境（青海省果洛州甘德县,海拔4200米）72小时;Morris水迷宫实验检测学习和记忆能力;HE染色、Nissl染色、透射电镜观察海马组织病理学变化;免疫组织化学法、RT-PCR、Western blot检测脑海马SIRT1、PGC-1α、TFAM、caspases-3、Bcl-2、Bax表达;检测脑海马SOD、GSH-Px和MDA表达及TUNEL法检测大鼠脑海马神经元凋亡率。3.验证西红花苷（100mg/kg/d）预处理对模型大鼠在高海拔急性低氧1、3、5、7天的保护作用及相关分子机制:设立低氧模型组和西红花苷组（100mg/kg/d）,利用Morris水迷宫实验检测高海拔低氧1、3、5、7天学习和记忆能力;HE染色、Nissl染色和透射电镜观察海马组织病理学变化;用免疫组织化学法、RT-PCR、Western blot检测低氧1、3、5、7天各组脑海马组织SIRT1、PGC-1α和TFAM、caspases-3、Bcl-2、Bax因子表达;检测高海拔低氧1、3、5、7天各组脑海马SOD、GSH-Px、MDA的水平;TUNEL法检测高海拔低氧1、3、5、7天各组脑海马神经元凋亡水平。4.验证西红花苷对低氧条件下HT22细胞的保护作用及通过SIRT1/PGC-1α通路分子机制:（1）建立（1%O2）低氧HT22细胞损伤模型;（2）通过CCK-8法检测西红花苷（0.001、0.01、0.1、1、10、100μmol/L）对HT22低氧（1%O2）12、24小时细胞活力影响,明确最佳剂量范围;（3）西红花苷对低氧条件下HT22细胞的保护分子机制:设常氧对照组、低氧（1%O2）组、SIRT1抑制剂（EX-527,100μmol/L）+低氧（1%O2）组、西红花苷25μmol/L+低氧（1%O2）组、西红花苷50μmol/L+低氧（1%O2）组、西红花苷100μmol/L+低氧（1%O2）组,通过透射电镜观察HT22细胞的超微结构变化,通过Western-blot、RT-PCR检测各组的SIRT1、PGC-1α和TFAM、caspases-3、Bcl-2、Bax表达,通过试剂盒检测各组SOD、GSH-Px、MDA的表达及流式细胞技术检测各组细胞调亡率。结果:1.高海拔急性低氧大鼠海马损伤模型构建成功。行为学Morris水迷宫实验显示,模型组寻台潜伏期和行进距离显着增加（P<0.05）,而目标象限百分比下降（P<0.05）;组织病理学结果显示模型组大鼠海马神经元细胞排列紊乱,核皱缩,局部有溶解性坏死（嗜酸性神经元）而且海马CA1区神经元Nissl染色IOD值明显减低（P<0.05）;透射电镜观察发现,模型组大鼠海马CA1区神经元结构欠清晰,线粒体数量明显减少,线粒体高度肿胀并见嵴破坏严重;模型组大鼠脑海马GSHPx和SOD活性明显下降（P<0.05）,MDA含量显着升高（P<0.05）,TUNEL染色结果显示,急性高海拔低氧组海马CA1区TUNEL凋亡阳性细胞数明显高于对照组（P<0.05）.2.西红花苷（25mg/kg/d、50mg/kg/d、100mg/kg/d）预处理通过SIRT1/PGC-1α通路对模型组大鼠发挥了保护作用,且呈剂量依赖效应。行为学Morris水迷宫实验显示,西红花预处理组的寻台潜伏期和行进距离显着降低（P<0.05）,而目标象限百分比升高（P<0.05）,呈剂量依赖性效应（P<0.05）;组织病理学结果显示,HE染色显示西红花苷预处理各组均能明显减轻急性高海拔低氧72小时大鼠脑海马神经元病理损伤,Nissl染色显示大鼠海马CA1区神经元IOD值明显升高（P<0.05）,透射电镜显示,西红花苷预处理各组大鼠海马CA1区神经元核结构恢复正常,线粒体肿胀减轻,线粒体脊结构均趋于正常,呈剂量依赖性效应;西红花苷预处理能显着提高大鼠脑海马GSHPx和SOD表达,降低MDA含量（P<0.05）同时西红花苷预处理减少凋亡阳性细胞的数量（P<0.05）,呈剂量依赖性效应（P<0.05）;西红花苷预处理能上调脑海马SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2m RNA和蛋白表达,下调Bax和Caspase-3的表达（P<0.05）,呈剂量依赖性效应（P<0.05）;结果显示西红花苷（100mg/kg/d）效果最佳。3.西红花苷（100mg/kg/d）对高海拔急性低氧1,3,5天大鼠脑海马神经元的保护作用明显,与SIRT1/PGC-1α通路分子保护机制相关。通过Morris水迷宫实验检测,与低氧模型组比较西红花苷预处理组大鼠急性高海拔低氧第1、3、5天的学习和记忆能力明显提高（P<0.05）;通过形态学观察发现急性高海拔低氧环境导致大鼠脑海马区神经细胞排列紊乱,局部有溶解性坏死,线粒体水肿及结构损伤,尤其在第1、3、5天损伤明显,通过西红花苷干预处理也明显减轻神经元及线粒体损伤;西红花苷预处理组能显着提高急性高海拔低氧1、3、5天大鼠脑海马SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2在m RNA和蛋白水平相对表达量（P<0.05）,而下调Bax、Caspase-3表达（P<0.05）,同时西红花苷预处理能显着提高急性高海拔低氧组1、3、5天大鼠脑海马GSH-Px和SOD活性,降低MDA含量;西红花苷预处理明显降低急性高海拔低氧1、3、5天大鼠脑海马神经元的凋亡（P<0.05）。4.西红花苷预处理对低氧条件下HT22细胞有明显保护作用与SIRT1/PGC-1α通路分子保护机制相关。透射电镜发现,HT22细胞O2%低氧模型组12、24小时胞质结构松散,核膜皱缩,线粒体肿胀明显,线粒体脊消失,24小时比12小时损伤严重且SIRT1抑制剂+低氧组损伤更明显;西红花苷（25、50、100μmol/L）+低氧组HT22细胞核结构逐渐恢复正常,线粒体和内质网肿胀减轻,线粒体脊结构均趋于正常,呈剂量依赖效应;与对照组相比,低氧组和SIRT1抑制剂+低氧组12、24小时SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2蛋白及m RNA水平表达显着降低（P<0.05）,而Bax、Caspase-3蛋白及m RNA表达明显升高（P<0.05）,抑制剂+低氧组比低氧组抑制作用更明显（P<0.05）;而各西红花苷（25、50、100μmol/L）+低氧组SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2蛋白及m RNA表达显着降低上调,而Bax、Caspase-3蛋白及m RNA表达明显下调（P<0.05）,呈剂量依赖表达（P<0.05）;与对照组比较低氧组和抑制剂+低氧组12、24小时SOD、GSH-Px活性下降、MDA的表达升高（P<0.05）,抑制剂+低氧组比低氧组抑制作用更明显（P<0.05）,而各西红花苷（25、50、100μmol/L）+低氧组中SOD、GSH-Px活性明显增强,MDA的下降,呈剂量依赖表达（P<0.05）;与对照组比较低氧组和抑制剂+低氧（1%O2）组12、24小时凋亡率明显升高（P<0.05）,抑制剂+低氧组比低氧组凋亡率更高（P<0.05）,而各西红花苷+低氧组凋亡率明显下降（P<0.05）,呈剂量依赖表达（P<0.05）。结论:1.成功构建高海拔急性低氧大鼠海马损伤模型。2.西红花苷（25mg/kg/d、50mg/kg/d、100mg/kg/d）预处理能明显改善高海拔急性低氧脑海马损伤模型大鼠认知功能障碍,改善脑海马神经元病理损伤,通过调控SIRT1/PGC-1α通路相关因子表达发挥抗线粒体损伤、抗氧化应激、抗凋亡中的作用,呈剂量依赖性效应。3.西红花苷（100mg/kg/d）预处理明显改善高海拔急性低氧第1、3、5天大鼠的学习和记忆能力,明显减轻脑海马神经元病理性损伤,也通过调控SIRT1/PGC-1α通路发挥抗线粒体损伤、抗氧化应激、抗凋亡的作用。4.西红花苷通过调控SIRT1/PGC-1α通路相关因子表达减轻HT22细胞在1%O2条件下12和24小时线粒体结构损伤,发挥抗氧化应激、抗凋亡作用。
张霜梅[9]（2020）在《卒中后失眠的临床研究及其中医药治疗的Meta分析》文中认为目的:越来越多的证据表明,睡眠障碍对心脑血管疾病后的生活质量有着持续的负面影响。脑卒中相关的睡眠失调常见失眠、睡眠呼吸暂停、嗜睡、不安腿综合征等多种形式。近年来不同形式的睡眠障碍与卒中之间的关系得到学者们的关注,卒中后失眠作为公认的脑血管病后常见的并发症之一,不仅严重影响卒中幸存者的康复治疗,还会降低患者的生存和生活质量。虽然现代医家对卒中后失眠的治疗积累了丰富而宝贵的临床经验,但对于其病因病机的总结,体质、症候、常见中医临床症状与卒中后失眠的关系等方面尚未有系统总结。本课题基于国内外学者对卒中后睡眠障碍的基础和临床研究,进行前瞻性恢复期卒中后失眠的临床观察性研究、横断面后遗症期卒中后失眠的临床观察性研究和卒中后失眠的中西医治疗网状Meta分析,以期完成对卒中后失眠发病因素的初步探索并明确其与常见脑血管危险因素、中医体质症候方面的关系,系统地总结中医治疗卒中后失眠的特色和经验,丰富对卒中后失眠研究的中医内容并以此作为中医开展相关研究开端,争取为今后中医研究卒中后并发疾病方面提供方法学经验。方法:本课题分为四部分,第一部分全面梳理国内外对卒中与各种形式睡眠障碍的研究报道完成文献综述,初步从中西医两方面整理卒中与多种睡眠障碍间关系的研究进展;第二部分和第三部分别通过前瞻性和横断面临床研究收集不同时期卒中患者的中西医相关临床因素,通过logistic回归分析进行卒中后失眠的发病因素或常见合并症状的总结;第四部分检索中国知网、万方数据、Pubmed、Web of science等数据库纳入中医疗法对比单纯西药治疗卒中后失眠的随机对照试验,通过Meta分析的方式进行单纯针灸、针药联合、单纯耳穴与单纯西药在有效率、痊愈率、PSQI评分等方面的比较,总结当代医家在治疗卒中后失眠时的主方中药与穴位选择,为推广使用针灸等疗法治疗卒中后失眠提供疗效依据。结果:1.通过文献研究总结国内外学者对睡眠障碍与卒中发病、卒中后出现睡眠障碍对于患者预后等方面进行的探索,发现各种形式的睡眠障碍可能与卒中之间通过多种病理机制相联系,甚至可形成恶性循环而产生不利影响。2.中医经典中无卒中后睡眠障碍的病名和专门论述,但其作为理论来源指导着我国医家对卒中后睡眠障碍的治疗。目前对于卒中后合并睡眠障碍尤其是睡眠呼吸暂停、嗜睡、不安腿综合征的中医治疗主要以个案和临床经验总结为主,且尚未形成对卒中后多种形式睡眠障碍病因病机的系统认识。我国医家对卒中后失眠的治疗进行了大量探索,尤其是多种治疗方法合用,疗效较为显着,值得进行进一步研究和推广。3.通过前瞻性收集275例急性期卒中患者的临床相关因素,对恢复期卒中后失眠的发病因素进行了探索。根据Logistic回归分析结果提示,在西医方面,糖化血红蛋白、年轻老年、失眠、NIHSS评分>10分、抗生素应用、颈动脉硬化、焦虑、脑卒中、抑郁是卒中后3个月失眠的危险因素,其OR值分别为5.92、0.3、4.4、5.33、6.81、2.73、2.92、3.53、2.94。在中医方面,根据Logistic回归分析结果提示,中风病临床症候评分>40分、不欲饮食、善太息、情绪低落、多愁善感、失眠多梦、血瘀质、肌肤甲错、心悸、痰湿质、湿热质、多痰、脘腹胀满是卒中后3个月失眠的常见要素,其OR值分别为4.29、4.3、5.15、2.6、4.56、17.04、9.99、2.86、3.09、5.55、11.7、13.36、3.5、7.83。4.使用Logistic回归探索恢复期卒中后出现失眠的患者在卒中证型与性别、年龄、临床类型、发病部位、发病数目、发病季节、卒中位置、体质的关系,发现病位在左侧、右侧,年龄大于75岁与卒中后失眠风痰阻络证常同时出现。血瘀质、后循环、男性不常与风痰阻络证同时出现。发病季节在春季,发病时体质为阳虚质常与卒中后失眠的阴虚风动证同时出现,而男性不常与阴虚风动证同时出现。5.通过横断面研究收集后遗症期卒中患者的临床相关因素,对后遗症期卒中后失眠的发病因素进行了探索。综合两种Logistic回归分析结果提示,在西医方面,男性、BMI>24kg/m2、脑干、心脏病史、失眠史、糖尿病、运动习惯、焦虑史皆为卒中后失眠的危险因素。在中医方面,根据Logistic回归分析结果提示,胸闷、气虚质、失眠多梦、头痛、中风病临床症候评分<20分、情绪低落、善太息、神疲乏力、头昏、风痰阻络、气短懒言、恶风是卒中后遗症期失眠的常见合并要素。6.使用Logistic回归探索后遗症期卒中后出现失眠的患者在卒中证型与性别、年龄、临床类型、发病部位、发病数目、发病季节、卒中位置、体质的关系,发现卒中后失眠的病人中年龄小于44岁、年龄大于75岁在后遗症期风痰阻络证的卒中后失眠中更常见,而出血性卒中少与后遗症期风痰阻络证卒中后失眠同时出现。发病季节在春季,发病时体质为阳虚质、平和质常与阴虚风动证卒中后失眠同时出现,而出血性卒中不常与阴虚风动证同时出现。7.通过网状Meta分析结果显示,单纯针灸、针药联合、单纯耳穴对比单纯西药治疗卒中后失眠在有效率、痊愈率、PSQI评分上,有着良好的改善作用值得进行推广。结论:1.结合文献研究和临床研究,无论是在恢复期还是后遗症期,血糖异常、既往有失眠史都是卒中后失眠发病的危险因素。在恢复期,与卒中相关的急性期使用过抗生素治疗、NIHSS评分>10分是恢复期卒中后失眠的危险因素。2.在中医方面,通过临床研究的Logistic回归分析结果提示,无论是在恢复期还是后遗症期,平素有善太息、情绪低落、失眠多梦都是卒中后不寐易发的常见合并症;恢复期卒中后不寐的发生更易受体质如血瘀质、痰湿质、湿热质的影响。3.对于无论是在恢复期还是后遗症期的风痰阻络证卒中患者,年龄大于75岁都是其常见因素;对于无论是在恢复期还是后遗症期的阴虚风动证卒中患者,常与阳虚质、卒中发病季节在春季都是同时出现在卒中后失眠的患者中。4.通过Meta分析显示,中医疗法尤其是针灸疗法对比单纯西药治疗有着不俗的临床疗效,结合本课题组既往的直接Meta部分,针灸可能在改善肢体功能、减少不良反应上更有优势,值得进一步推广。但鉴于随机对照试验质量不一以及研究间异质性的存在,鼓励未来进一步开展更高质量、规模的临床研究为中医药治疗卒中后失眠的国际推广提供试验依据。
刘优[10]（2020）在《不同时间高原习服正常人群脑血管反应性的研究》文中研究说明目的:探讨不同时间高原习服正常人群脑血管反应性的变化方法:选取从平原进入西宁（海拔2260m）2-3天的20-30岁健康青年汉族30例为急进高原组;从平原进入西宁7-12天的20-30岁健康青年汉族30例为初步习服组;选取在西宁生活10年以上的20-30岁健康青年汉族30例为完全习服组。收集3组研究对象的基本资料及血压（BP）、血氧饱和度（SpO2）,同时采用德国DWL公司生产的Multi-Dop X经颅多普勒超声监测仪,在常规模式下分别检测并记录3组研究对象的双侧大脑中动脉（MCA）、双侧椎动脉（VA）及基底动脉（BA）的最大血流速度（Vs）、最小血流速度（Vd）、平均血流速度（Vm）、搏动指数（PI）、阻力指数（RI）。在监护模式下应用系统QL软件分别检测研究对象吸入CO2前后大脑中动脉平均脑血流速度及呼气末CO2分压,计算它们的脑血管反应性（CVR）及脑血管储备指数（CVRI）。运用统计学方法分析:3组间血压（BP）、血氧饱和度（SpO2）、大脑血管参数指标（Vs,Vd,Vm,PI,RI）、CVR、CVRI是否存在差异。结果:（1）急进高原组血压明显高于初步习服组、完全习服组,差异均具有统计学意义（P<0.05）;三组间比较血氧饱和度差异均无统计学意义（P>0.05）。（2）急进高原组部分大脑中动脉血管参数（Vs,Vd,Vm,）、部分基底动脉血管参数（Vs,Vd,Vm）明显高于初步习服组、完全习服组,差异具有统计学意义（P<0.05）;急进高原组部分大脑中动脉血管参数（PI,RI）参数显着低于完全习服组,差异具有统计学意义（P<0.05）。（3）急进高原组CVR（2.86±0.66 cm/s?mm Hg）高于久居高原组CVR（2.21±0.42 cm/s?mm Hg）和初步习服组CVR（2.41±0.45 cm/s?mm Hg）,差异具有统计学意义（P<0.05）;初步习服组与完全习服组CVR差异无统计学意义（P>0.05）。（4）急进高原组CVRI（4.32±1.00%/mm Hg）高于完全习服组CVRI（3.66±0.97%/mm Hg）和初步习服组CVRI（3.74±0.79%/mm Hg）,差异具有统计学意义（P<0.05）;初步习服组与完全习服组CVRI差异无统计学意义（P>0.05）。结论:（1）急性缺氧可引起脑血流速度增快,脑血流量（CBF）增加;（2）不同习服时间对脑血管反应性影响不同,急进高原人群脑血管反应性高于完全习服人群,随着机体习服时间延长,基本接近于完全习服人群。
二、急性缺氧条件下脑认知功能障碍发生时段的研究（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、急性缺氧条件下脑认知功能障碍发生时段的研究（论文提纲范文）
（1）小胶质细胞表型转化在慢性低灌注脑白质损伤中的作用及机制（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 英文摘要 |
| 中文摘要 |
| 前言 |
| 第一部分 慢性低灌注脑白质损伤模型的选择与构建 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 慢性低灌注脑白质损伤中小胶质细胞表型变化特征 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 慢性低灌注脑白质损伤中小胶质细胞表型变化的机制 |
| (一)慢性低灌注下A2AR表达与小胶质细胞表型变化的关系 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| (二)A2AR调控小胶质细胞表型转化的信号通路 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 中枢神经系统中小胶质细胞对髓鞘再生的影响 |
| 参考文献 |
| 学位期间研究成果 |
| 学位论文自评表 |
| 致谢 |
（2）基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分:对PSCI相关中医“毒邪”分类的研究 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.观察指标及研究方法 |
| 4.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.入选患者中医证型及有关实验室指标的总体分布情况 |
| 2.各中医证型与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 3.毒邪的分类与所观察指标的分布特征及相关性分析 |
| 4. 各中医证型与相应毒邪的分布特征及相关性 |
| 5. 各类毒邪相兼情况分布特征 |
| 6. 各类毒邪中热性症状存在情况 |
| 7. 各类毒邪与所观察要素的相关性分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的中医证候学研究 |
| 2.对PSCI毒邪的分类定义 |
| 3.对PSCI中医证型及毒邪分类研究结果的解读及探讨 |
| 4.对于“素毒”与“新毒”的理解 |
| 5.PSCI毒邪的整体统一性及黄连解毒汤治疗的可行性 |
| 6.本研究需要进一步延伸的方向 |
| 第二部分:早期应用黄连解毒汤对PSCIND患者的疗效观察 |
| 引言 |
| 临床资料与方法 |
| 1.研究对象 |
| 2.纳排标准 |
| 3.分组情况及治疗方法 |
| 4.观察指标及研究方法 |
| 5.统计学方法 |
| 结果 |
| 1.黄连解毒汤对认知功能MMSE评分的影响 |
| 2.黄连解毒汤对认知功能MoCA评分的影响 |
| 3.黄连解毒汤对神经功能NIHSS评分的影响 |
| 4.黄连解毒汤对日常生活能力ADL评分的影响 |
| 5.黄连解毒汤对各中医证候评分的影响 |
| 6.黄连解毒汤对实验室指标的影响 |
| 7.对治疗后1 月、6 月疗效的相关因素分析 |
| 讨论 |
| 1.PSCI的治疗与“毒损脑络”学说 |
| 2.黄连解毒汤在脑血管病中的应用 |
| 3.导师组有关黄连解毒汤在认知障碍方面的研究基础 |
| 4.对神经、认知功能及ADL评分的影响作用分析 |
| 5.对各中医证候评分及有关毒邪的动态影响作用分析 |
| 6.对相关实验室指标的影响作用分析 |
| 7.本研究的意义及仍需解决的问题 |
| 第三部分:黄连解毒汤对脑梗死动物模型认知功能影响的实验研究 |
| 引言 |
| 实验动物与方法 |
| 1.实验动物 |
| 2.试剂及仪器 |
| 3.多发性脑梗死大鼠动物模型的制作 |
| 4.随机分组及给药 |
| 5.大鼠脑组织取材 |
| 6.指标检测及方法 |
| 7.统计学方法 |
| 结果 |
| 1. 各组大鼠的行为学认知功能检测 |
| 2. 各组大鼠皮层组织 HE 染色病理检查 |
| 3. 各组大鼠脑组织梗死周围区 MVD 检测 |
| 4.各组大鼠脑皮层组织Notch信号通路及VEGF蛋白检测 |
| 5.各组大鼠脑皮层组织炎性相关因子的检测 |
| 讨论 |
| 1.对PSCI发生机制的认识及所观察指标的选择 |
| 2.黄连解毒汤对于脑缺血及PSCI影响的可能机制 |
| 3.对PSCI相关信号通路的选择 |
| 4.动物造模方法的选择 |
| 5.对实验分组方法的选择 |
| 6.对实验结果的解读及分析 |
| 7.本研究的意义及有待延伸的方向 |
| 结语 |
| 参考文献 |
| 附录1 文献综述:“毒损脑络”学说与卒中后认知障碍 |
| 参考文献 |
| 附录2 血管性痴呆中医证候诊断量表(SDSVD) |
| 附录3 PSCI中医毒邪症状要素表 |
| 附录4 蒙特利尔认知评估量表(MoCA) |
| 附录5 简易智能精神状态检查量表(MMSE) |
| 附录6 日常生活能力(ADL)评分量表 |
| 附录7 大鼠改良神经功能缺损评分(mNSS) |
| 附录8 各组实验动物水迷宫活动轨迹图例 |
| 附录9 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区 HE 染色病理结果 |
| 附录10 各组实验大鼠梗死区及梗死周围区微血管密度情况 |
| 在校期间发表的论文 |
| 在读期间参与的科研项目 |
| 致谢 |
（3）钙响应因子CaRF在小胶质细胞介导慢性低灌注性脑白质损伤中的作用与机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 慢性低灌注模型BCAS及其对认知功能和脑白质的影响 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第二部分 钙响应因子CaRF在 BCAS模型中对脑白质病理发生的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第三部分 条件性敲除小胶质细胞中CaRF对 BCAS的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第四部分 CaRF干预的小胶质细胞对少突胶质前体细胞和神经元的影响 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第五部分 以CaRF为靶点进行的小分子药物筛选及其对BCAS的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 第六部分 CaRF分子在慢性低灌注脑白质高信号患者中的作用 |
| 一、前言 |
| 二、材料与方法 |
| 三、实验结果 |
| 四、讨论 |
| 参考文献 |
| 附录 FDA认证小分子化合物库 |
| 综述 脑白质高信号在诊断血管性认知功能障碍中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 在读期间发表论文和参加科研工作情况说明 |
| 致谢 |
（4）在慢性缺氧条件下Hsp27对脑血管内皮细胞的保护作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 1.实验材料 |
| 1.1 主要试剂及耗材 |
| 1.2 主要仪器设备 |
| 2.实验方法 |
| 2.1 细胞培养 |
| 2.2 慢性脑低灌注体外细胞模型创建 |
| 2.3 CCK-8检测细胞活性 |
| 2.4 蛋白印迹法检测蛋白表达 |
| 2.5 实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测基因表达 |
| 2.6 统计学方法 |
| 结果 |
| 1.慢性缺氧对脑血管内皮细胞活性的影响 |
| 2.慢性缺氧使脑血管内皮细胞上小热休克蛋白表达增加 |
| 3.慢性缺氧后脑血管内皮细胞炎症因子表达增加 |
| 4.慢性缺氧条件下Hsp27与TNF-α之间的相关性 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 热休克蛋白与神经炎症的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录 中英文名词缩略词对照 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
（5）基于ANT及ERP对OSA患者注意功能特点的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 引言 |
| 第一章 阻塞性睡眠呼吸暂停患者认知功能障碍及其特征 |
| 1. 研究对象 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.2 临床资料 |
| 2.3 认知功能评估量表 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第二章 阻塞性睡眠呼吸暂停对患者注意网络测试的影响 |
| 1. 研究对象 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.2 临床资料 |
| 2.3 注意网络测试(ANT) |
| 2.4 统计学分析 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 第三章 阻塞性睡眠呼吸暂停患者视觉注意损伤的事件相关电位研究 |
| 1. 研究对象 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 一般资料 |
| 2.2 临床资料 |
| 2.3 ERP视觉oddball范式检查 |
| 2.4 统计学分析 |
| 3. 结果 |
| 4. 讨论 |
| 结论 |
| 不足之处与展望 |
| 附录 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 博士学位期间发表学术论文目录 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
| 英文论文1 |
| 英文论文2 |
（6）基于脑电图的意识障碍多层脑网络分析与评估（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第1章 绪论 |
| 1.1. 引言 |
| 1.2. 意识障碍评估的研究现状及存在问题 |
| 1.2.1. 意识障碍及其行为学评估概述 |
| 1.2.2. 意识障碍的神经影像学评估概述 |
| 1.2.3. 静息态脑电在意识障碍中的应用 |
| 1.3. 多层脑网络理论与脑功能评估 |
| 1.3.1. 多层脑网络理论的发展 |
| 1.3.2. 动态脑网络的基本研究方法及应用 |
| 1.4. 研究思路与内容 |
| 1.5. 研究特色与创新之处 |
| 1.6. 本文组织结构 |
| 第2章 实验设计与脑电数据获取 |
| 2.1. 引言 |
| 2.2. 实验设计 |
| 2.2.1. 实验对象 |
| 2.2.2. 实验设备及数据采集流程 |
| 2.3. EEG数据去噪 |
| 2.3.1. 零相移滤波 |
| 2.3.2. 独立成分分析 |
| 2.3.3. 数据截取 |
| 2.4. 源空间EEG信号的获取 |
| 2.4.1. 溯源分析方法简介 |
| 2.4.2. 溯源方法比较 |
| 2.5. 本章小结 |
| 第3章 意识障碍脑网络的跨频率耦合特性 |
| 3.1. 引言 |
| 3.2. 跨频率耦合特性的多路复用网络分析 |
| 3.2.1. 多路复用网络的构建与特征提取 |
| 3.2.2. 头皮EEG数据的多路复用网络 |
| 3.2.3. 源空间EEG数据的多路复用网络 |
| 3.3. 跨频率耦合特性的全连接多层网络分析 |
| 3.3.1. 全连接多层网络的构建及特征提取 |
| 3.3.2. 意识障碍患者的全连接多层网络 |
| 3.4. 跨频率耦合结果讨论 |
| 3.5. 本章小结 |
| 第4章 特定频带下意识障碍脑功能连接的时间变异性 |
| 4.1. 引言 |
| 4.2. 脑功能网络的动态连接 |
| 4.2.1. 动态连接分析 |
| 4.2.2. 意识障碍患者的动态功能连接 |
| 4.3. 脑网络连接模式的时域变异性 |
| 4.3.1. 加权网络时域相关性 |
| 4.3.2. 二元网络时间相关性 |
| 4.4. 基于网络时域变异性的意识检测 |
| 4.4.1. 意识检测 |
| 4.4.2. 意识检测结果 |
| 4.5. 网络时域变异性结果讨论 |
| 4.6. 本章小结 |
| 第5章 特定频带下意识障碍脑功能网络的状态转换 |
| 5.1. 引言 |
| 5.2. 网络状态转换的灵活度 |
| 5.2.1. 网络灵活度分析 |
| 5.2.2. 意识障碍的状态转换灵活度 |
| 5.3. 网络分离与集成状态之间的动态转换 |
| 5.3.1. 动态转换分析 |
| 5.3.2. 意识障碍患者整合与分离状态的转换 |
| 5.4. 网络转换结果讨论 |
| 5.5. 本章小结 |
| 第6章 意识障碍对跨频率耦合网络时间动态的调制作用 |
| 6.1. 引言 |
| 6.2. 脑网络的动态跨频率耦合 |
| 6.3. 幅值-幅值耦合模式的动态转换 |
| 6.3.1. 幅值-幅值耦合的动态转换分析 |
| 6.3.2. 意识障碍患者的幅值-幅值耦合模式切换 |
| 6.4. 相位-幅值耦合模式的动态转换 |
| 6.4.1. 相位-幅值耦合的动态分析 |
| 6.4.2. 意识障碍患者的相位-幅值耦合模式切换 |
| 6.5. 耦合模式动态切换结果讨论 |
| 6.6. 本章小结 |
| 第7章 总结与展望 |
| 7.1. 工作总结 |
| 7.2. 未来展望 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 致谢 |
（7）慢性缺血缺氧条件下p75神经营养素受体在神经损害中的作用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 慢性低灌注性认知损害患者血清P75神经营养素受体细胞外段水平及其与炎症因子的关系 |
| 一、引言 |
| 二、资料与方法 |
| (一)研究对象 |
| (二)材料和仪器 |
| (三)方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)三组研究对象基本资料情况 |
| (二)三组研究对象血清p75NTR-ECD、炎症因子水平比较 |
| (三)CCH-VCI组血清p75NTR-ECD与炎症因子相关性分析 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 第二部分 氧糖剥夺条件下P75神经营养素受体在人神经母细胞瘤细胞中的表达和作用 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| (一)材料 |
| (二)方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)SH-SY5Y细胞OGD模型的建立 |
| (二)LM11A-31干预浓度的确定 |
| (三)分组实验中细胞存活率和LDH释放活性 |
| (四)细胞凋亡检测 |
| (五)p75NTR蛋白表达 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 第三部分 p75神经营养素受体在慢性脑低灌注性认知损害模型小鼠神经损伤中的作用 |
| 一、引言 |
| 二、材料与方法 |
| (一)材料 |
| (二)方法 |
| 三、实验结果 |
| (一)慢性脑低灌注性认知损害小鼠模型的建立 |
| (二)p75NTR表达变化 |
| (三)神经炎症反应 |
| (四)神经细胞凋亡 |
| (五)神经突触可塑性 |
| 四、讨论 |
| 五、小结 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述一 血管性认知损害的研究进展 |
| 参考文献 |
| 文献综述二 p75NTR 与神经系统疾病 |
| 参考文献 |
| 论文发表及参加科研情况 |
| 致谢 |
（8）西红花苷预处理保护急性高原缺氧大鼠脑海马神经元的SIRT1/PGC-1a机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要符号对照表 |
| 第一章 引言 |
| 1 高原低氧对脑神经影响 |
| 2 SIRT1/PGC-1A通路调控机制及低氧条件下的脑保护作用 |
| 3 西红花苷对脑神经的影响 |
| 4 科学问题及研究内容 |
| 5 研究流程图 |
| 6 研究内容及目标 |
| 第二章 西红花苷对急性高海拔低氧脑海马损伤模型的保护作用 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 方法 |
| 2.2.2.1 Morris水迷宫检测 |
| 2.2.2.2 HE染色 |
| 2.2.2.3 透射电镜检测 |
| 2.2.2.4 Nissl染色 |
| 2.2.2.5 抗氧化指标 SOD, GSHPx, MDA 检测 |
| 2.2.2.6 免疫组织化学检测 |
| 2.2.2.7 Western Blot 实验检测蛋白表达 |
| 2.2.2.8 qRTPCR检测结果 |
| 2.2.2.9 TUNEL 凋亡检测 |
| 2.3 结果 |
| 2.3.1 Morris水迷宫检测结果 |
| 2.3.2 HE染色结果 |
| 2.3.3 透射电镜观察海马细胞超微结构 |
| 2.3.4 Nissl染色结果 |
| 2.3.5 抗氧化SOD,GSHPx,MDA水平 |
| 2.3.6 Western blot检测结果 |
| 2.3.7 qRTPCR检测结果 |
| 2.3.8 免疫组织化学检测结果 |
| 2.3.9 TUNEL检测结果 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 小结 |
| 第三章 西红花苷最佳剂量预处理急性高海拔低氧大鼠脑海马相关因子及凋亡的影响 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 材料与方法 |
| 3.2.1 实验动物 |
| 3.2.2 药物及试剂 |
| 3.2.3 实验仪器 |
| 3.2.4 方法 |
| 3.2.4.1 Morris水迷宫检测 |
| 3.2.4.2 HE染色观察大鼠脑海马CA1神经元形态 |
| 3.2.4.3 Nissl染色观察 |
| 3.2.4.4 透射电镜观察大鼠脑海马超微结构 |
| 3.2.4.5 抗氧化指标SOD、GSHPx、MDA检测 |
| 3.2.4.6 RT-PCR检测两组脑海马SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3 因子在m RNA水平表达 |
| 3.2.4.7 Western Blot检测两组脑海马SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3 因子蛋白表达 |
| 3.2.4.8 用TUNEL法观察脑海马神经元凋亡 |
| 3.2.5 统计学分析方法 |
| 3.3 结果与分析 |
| 3.3.1 Morris水迷宫检测 |
| 3.3.2 HE染色观察大鼠脑海马CA1神经元病理变化 |
| 3.3.3 Nissl染色观察大鼠脑海马CA1 神经元病理变化 |
| 3.3.4 透射观察大鼠脑海马神经元超微结构 |
| 3.3.5 抗氧化指标SOD、GSHPx、MDA检测结果 |
| 3.3.6 RT-PCR检测两组脑海马SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3 因子在mRNA水平表达 |
| 3.3.7 Wester blot检测两组脑海马SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3 因子在蛋白水平表达 |
| 3.3.8 TUNTL检测各组大鼠脑海马CA1 区凋亡细胞结果 |
| 3.4 讨论 |
| 3.5 小结 |
| 第四章 西红花苷对急性低氧条件下HT22细胞保护作用的研究 |
| 4.1 前言 |
| 4.2 研究对象及主要试剂 |
| 4.2.1 主要试剂 |
| 4.2.2 主要仪器 |
| 4.3 研究方法 |
| 4.3.1 HT22细胞传代培养 |
| 4.3.2 西红花苷对HT22细胞在低氧条件存活率的测定 |
| 4.3.3 通过透射电镜检测西红花苷对HT22细胞在低氧条件下形态结构变化 |
| 4.3.4 WesternBlot检测西红花苷对HT22 细胞在低氧条件下SIRT1、PGC-1a、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白的表达 |
| 4.3.5 RTPCR检测西红花苷对HT22细胞在低氧条件下 SIRT1、PGC-1a、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白的表达 |
| 4.3.6 西红花苷对 HT22 细胞在低氧条件下 SOD、GSHPx、MDA 水平的检测 |
| 4.3.7 西红花苷对HT22细胞低氧条件凋亡的影响 |
| 4.3.8 统计学处理 |
| 4.4 结果 |
| 4.4.1 西红花苷对低氧 HT22 细胞存活率的检测 |
| 4.4.2 透射电镜示各组HT22细胞超微结构 |
| 4.4.3 Wester blot 检测西红花苷对低氧刺激12小时 HT22 细胞相关蛋白表达影响 |
| 4.4.4 Wester blot 检测西红花苷对低氧刺激 24 小时 HT22相关蛋白表达影响 |
| 4.4.5 qRT-PCR检测西红花苷对低氧12 小时HT22 细胞SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3m RNA水平表达影响 |
| 4.4.6 qRT-PCR检测西红花苷对低氧24 小时HT22 细胞SIRT1、PGC-1α、TFAM、Bcl-2、Bax、Caspase-3mRNA水平表达影响 |
| 4.4.7 西红花苷对低氧12 小时HT22 细胞抗氧化指标SOD、GSHPX、MDA检测结果 |
| 4.4.8 西红花苷对低氧24 小时HT22 细胞抗氧化指标SOD、GSHPX、MDA检测结果 |
| 4.4.9 西红花苷对低氧12小时HT22细胞凋亡结果 |
| 4.4.10 西红花苷对低氧 24 小时HT22细胞凋亡检测 |
| 4.5 讨论 |
| 4.6 小结 |
| 第五章 全文讨论 |
| 参考文献 |
| 博士学位期间科研成果简介 |
| 致谢 |
| 附录 A(综述1)藏红花活性成分对神经系统疾病的作用 |
| 参考文献 |
（9）卒中后失眠的临床研究及其中医药治疗的Meta分析（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一章 文献研究 |
| 第一节 卒中与睡眠的中西医认识 |
| 一、中医对中风与不得卧的认识 |
| 二、西医对卒中与睡眠的认识 |
| 第二节 不同睡眠障碍类型与中风 |
| 一、中医对中风与不寐的研究概况 |
| 二、西医对中风与失眠的研究概况 |
| 三、中风与鼾症的中医研究进展 |
| 四、西医对卒中与睡眠呼吸暂停的研究进展 |
| 五、中风与不安腿综合征中医研究概况 |
| 六、中风与不安腿综合征西医研究概况 |
| 七、其他形式睡眠障碍与卒中的西医研究进展 |
| 八、小结 |
| 第二章 卒中后失眠发病因素的前瞻性临床观察研究 |
| 第一节 前瞻性临床观察研究设计 |
| 一、研究目的 |
| 二、研究内容 |
| 三、研究方法 |
| 第二节 恢复期卒中后失眠前瞻性观察统计结果分析 |
| 一、研究对象的一般情况 |
| 二、脑卒中3月时失眠影响因素分析 |
| 三、脑卒中后失眠影响因素的Logistic回归分析 |
| 四、卒中后3个月失眠患者中医症候要素资料分布 |
| 五、失眠与非失眠患者中医要素临床相关资料分布 |
| 六、脑卒中后失眠中医要素的Logistic回归分析 |
| 七、失眠患者证型与性别、年龄、体质、卒中位置和季节的结果分析 |
| 第三章 后遗症期卒中后失眠相关因素的横断面观察研究 |
| 第一节 后遗症期卒中后失眠横断面观察研究研究设计 |
| 一、研究目的 |
| 二、研究内容 |
| 三、研究方法 |
| 第二节 后遗症期卒中后失眠横断面观察统计结果分析 |
| 一、研究对象的一般情况 |
| 二、后遗症期脑卒中后失眠影响因素分析 |
| 三、脑卒中后失眠影响因素的Logistic回归分析 |
| 四、后遗症期卒中后失眠患者中医症候要素资料分布 |
| 五、失眠与非失眠患者中医要素临床相关资料分布 |
| 六、脑卒中后失眠中医要素的Logistic回归分析 |
| 七、失眠患者证型与性别、年龄、体质、卒中位置和季节的结果分析 |
| 第四章 中西医结合治疗卒中后失眠的网状Meta分析 |
| 一、Meta分析研究设计 |
| 二、纳入文献一般情况 |
| 三、网状Meta分析一致性检验 |
| 四、网状Meta证据图 |
| 五、网状Meta结果图 |
| 六、网状Meta分析森林图 |
| 七、网状Meta分析贡献图 |
| 八、网状Meta分析发表偏倚检验及SUCRA排序 |
| 九、不良反应和远期随访 |
| 十、纳入研究中穴位及中药使用小结 |
| 第五章 讨论 |
| 第一节 恢复期、后遗症期卒中后失眠危险因素探讨 |
| 一、脑卒中急性期、后遗症期卒中后失眠的发病情况 |
| 二、常见因素对卒中后失眠的影响 |
| 第二节 恢复期、后遗症期卒中后失眠症候、体质探讨 |
| 一、体质与卒中后失眠发病的探讨 |
| 二、常见症状与卒中后失眠发病的探讨 |
| 第三节 中西医治疗卒中后失眠的Meta分析结果探讨 |
| 一、普通Meta分析结果探讨 |
| 二、中西医结合治疗卒中后失眠的网状Meta分析探讨 |
| 三、局限性 |
| 四、现代医家常用针灸穴位、中药总结 |
| 结语 |
| 一、结论 |
| 二、创新点 |
| 三、不足 |
| 参考文献 |
| 在校期间发表论文情况 |
| 附录 |
| 统计学审核证明 |
| 致谢 |
| 详细摘要 |
（10）不同时间高原习服正常人群脑血管反应性的研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 引言 |
| 1.1 高原习服 |
| 1.2 脑血管反应性 |
| 1.3 研究目的及意义 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 研究对象 |
| 2.2 观察指标 |
| 2.3 研究方法 |
| 2.4 统计学方法 |
| 第三章 研究结果 |
| 3.1 基本资料比较 |
| 3.2 三组人群间血压、血氧饱和度的比较 |
| 3.3 大脑5条血管在三组人群中的TCD参数比较 |
| 3.4 不同习服时间三组人群CVR与CVRI的比较 |
| 第四章 讨论 |
| 4.1 高原缺氧环境下血压的变化 |
| 4.2 高原缺氧环境下血氧饱和度的变化 |
| 4.3 高原缺氧环境下脑血流动力学变化特点 |
| 4.4 高原缺氧环境下脑血管反应性的变化 |
| 第五章 结论 |
| 第六章 研究局限性及展望 |
| 参考文献 |
| 综述 高原缺氧环境下脑血流调节机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士学位期间科研成果简介 |
四、急性缺氧条件下脑认知功能障碍发生时段的研究（论文参考文献）
- [1]小胶质细胞表型转化在慢性低灌注脑白质损伤中的作用及机制[D]. 程畅. 中国人民解放军陆军军医大学, 2021(01)
- [2]基于“毒损脑络”理论黄连解毒汤早期干预卒中后认知障碍的临床及实验研究[D]. 姜海伟. 湖北中医药大学, 2021(01)
- [3]钙响应因子CaRF在小胶质细胞介导慢性低灌注性脑白质损伤中的作用与机制研究[D]. 赵明. 中国人民解放军海军军医大学, 2021(01)
- [4]在慢性缺氧条件下Hsp27对脑血管内皮细胞的保护作用研究[D]. 胡杨. 大连医科大学, 2021(01)
- [5]基于ANT及ERP对OSA患者注意功能特点的研究[D]. 郭俊峰. 山东大学, 2020(04)
- [6]基于脑电图的意识障碍多层脑网络分析与评估[D]. 蔡立辉. 天津大学, 2020
- [7]慢性缺血缺氧条件下p75神经营养素受体在神经损害中的作用研究[D]. 陈甲. 中国人民解放军海军军医大学, 2020(02)
- [8]西红花苷预处理保护急性高原缺氧大鼠脑海马神经元的SIRT1/PGC-1a机制研究[D]. 张晓岩. 青海大学, 2020(01)
- [9]卒中后失眠的临床研究及其中医药治疗的Meta分析[D]. 张霜梅. 广州中医药大学, 2020(06)
- [10]不同时间高原习服正常人群脑血管反应性的研究[D]. 刘优. 青海大学, 2020(02)